CC BY
97
УДК 637.1/.3:663.8(045) DOI: 10.24411/0235-2486-2019-10163
Антипатогенная активность национальных кисломолочных напитков
М. В. Каледина, канд. техн. наук; А. Н. Федосова, канд. биол. наук; И.А. Байдина*, канд. с.-х. наук Белгородский государственный аграрный университет им. В.Я. Горина
Дата поступления в редакцию 22.03.2019 * [email protected]
Дата принятия в печать 31.10.2019 © Каледина М.В., Федосова А.Н., Байдина И.А., 2019
Реферат
Антипатогенная и иммуномодулирующая активность кисломолочных национальных напитков народов России (кефир, курунга, кумыс, айран и др.) формируется за счет продуктов метаболизма микрофлоры смешанного типа брожения, осуществляемого практически однотипным видовым составом микрофлоры, представленной лактобактериями, дрожжами и уксуснокислыми бактериями. Анализ состава микрофлоры и ее метаболитов позволил выделить вещества, способные формировать антагонистические свойства к кишечной инфекции: органические кислоты, этанол, углекислый газ, пероксид водород и особые пептиды (бактериоцины). Однако главную роль в антипатогенной активности в национальных кисломолочных напитках с высокой степенью вероятности выполняют пероксид водород и бактериоцины, способные избирательно вытеснять из сложившегося симбиотического состава постороннюю для этих напитков микрофлору. Такой взгляд на национальные кисломолочные напитки объясняет устойчивость природного симбиотического состава, способность восстанавливаться и сохранять полезные свойства. С целью исследования антипатогенной активности кефира и айрана против Escherichia coli EPEC и VTEC, Staphylococcus aureus, Clostridia difficile, Salmonella thyphimurium изучали динамику антагонистической активности методом развивающихся смешанных популяций в сравнении с ростом тест-штамма на жидких питательных средах с последующим высевом на плотные среды. Согласно результатам исследования кефир и айран проявляли выраженную способность замедлять рост и подавлять жизнедеятельность перечисленных выше кишечных патогенных бактерий. Наиболее значительный антипатогенный эффект наблюдался относительно культур Staphylococcus aureus и Salmonella typhimurium. Степень ингибирования золотистого стафилококка кефиром составила 60,1±1%, айраном - 55,7+2,4%. Для сальмонеллы данный показатель составил в случае внесения кефира 47,8±0,8%, в случае айрана -45,6+1,2%. Антагонистическая активность кефира на кишечную палочку была выше на 21,2% для E. coli VTEC и 35,5% E. coli EPEC, чем у айрана. Данное исследование подтверждает тот факт, что национальные кисломолочные напитки кефир и айран имеют значительный потенциал к снижению риска возникновения кишечных инфекций.
Ключевые слова
кефир, айран, кисломолочные напитки, патогены, антипатогенная активность Для цитирования
Каледина М.В., Федосова А.Н., Байдина И.А. (2019) Антипатогенная активность национальных кисломолочных напитков // Пищевая промышленность. 2019. № 10. С. 72-75.
Antagonistic activity of the national dairy beverages
M. V. Kaledina, Candidate of Technical Sciences; A. N. Fedosova, Candidate of Biological Sciences; I. A. Baydina*, Candidate of Agricultural Sciences Belgorod State Agrarian University named after V.Ya. Gorin
Received: March 22, 2019 * [email protected]
Accepted: October 31, 2019 © Kaledina M.V., Fedosova A.N., Baydina I.A., 2019
Abstract
Antipathogenic and immunomodulating activity of fermented milk in Russian national drinks (kefir, kumis, ayran, etc.) is formed by microflora metabolites of mixed fermentation type, carried out by almost the same species composition of microflora, represented by lactobacillus, yeast and acetic acid bacteria. Analysis of the composition of microflora and its metabolites allowed to identify substances capable of forming antagonistic properties to intestinal infection: organic acids, ethanol, carbon dioxide, hydrogen peroxide and special peptides (bacteriocins). However, most important part in anti-pathogenic activity in national fermented milk drinks with a high degree of probability is played by hydrogen peroxide and bacteriocins that can selectively displace from the existing symbiotic composition extraneous to these drinks microflora. Stability of natural symbiotic composition and ability to recover and maintain useful properties in Russian national drinks are easy to explain from this point of view. To study antipathogenic activity of kefir and ayran against Escherichia coli EPEC and VTEC, Staphylococcus aureus, Clostridia difficile, Salmonella thyphimurium the dynamics of antagonistic activity was observed by the method of developing the mixed population in comparison with the growth of the test strain in a liquid nutrient medium with subsequent seeding in a dense medium. According to the results of the study, kefir and ayran showed an ability to slow down the growth and suppress vital activity of those intestinal pathogenic bacteria. The most significant anti-pathogenic effect was observed with Staphylococcus aureus and Salmonella typhimurium. The degree of inhibition of Staphylococcus aureus by kefir was 60.1±1%, ayran-55.7±2.4%. As for Salmonella this number was 47.8±0.8% in case of kefir, and 45.6±1.2% in case of ayran. The antagonistic activity of kefir on E. coli was higher by 21.2% for E. coli VTEC and 35.5% for E. coli EPEC than in ayran. This study confirms the fact that these national fermented milk drinks kefir and ayran have significant potential to reduce the risk of intestinal infections.
Key words
kefir, ayran, fermented milk, pathogens, antagonistic activity For citation
Kaledina M.V., Fedosova A.N., Baydina I.A. (2019) Antagonistic activity of the national dairy Beverages // Food processing industry = Pischevaya promyshlennost'. 2019. № 10. P. 72-75.
Введение. Сохранение и укрепление здорового питания населения России -стратегическая задача правительства и в целом современного общества. Важнейшими элементами ее реализации являются производство высококачественных и доступных продуктов питания, популяризация и внедрение в рацион функциональных продуктов, в том числе и молочных.
Национальные кисломолочные продукты, характерные для разных регионов страны, являются достоянием российской молочной промышленности, в технологии которой используются природные сим-биотические консорциумы микроорганизмов. Преимущества такого симбиоза микробных партнеров очевидны: возрастание удельной скорости роста микробных клеток, изменение свойств биотической среды, усиление сопротивляемости к воздействию внешних факторов. Микробиологический состав заквасок национальных напитков идентифицирован [1].
Однако попытки приготовления искусственной закваски для выработки кисломолочных напитков по традиционным технологиям на основе выделенных и изолированных отдельных микроорганизмов из состава национальных напитков не увенчались успехом. В искусственно приготовленных заквасках, в отличие от природных симбиозов, очень быстро изменяется соотношение микроорганизмов с преимущественным ростом какого-либо одного вида. Доказано также, что каждый компонент в отдельности не обладает той антибиотической активностью, которую проявляет вся ассоциация. Поэтому наиболее актуальным направлением исследований остается совершенствование естественных сим-биотических заквасок, сформированных естественным природным путем, таких кисломолочных напитков, как кумыс, кефир, курунга, айран и т. д. [2].
Одним из наиболее популярных кисломолочных продуктов у народов РФ, обладающих лечебно-профилактическими свойствами, является кефир: на его долю в настоящее время приходится 2/3 российского производства кисломолочных напитков.
Кефир - продукт смешанного брожения, родина которого Северный Кавказ. Его получают путем сквашивания коровьего молока кефирными грибками, которые содержат молочнокислые бактерии, уксуснокислые бактерии и дрожжи. Видовой состав микрофлоры кефира и влияние технологических факторов на этот состав изучались рядом ученых [3, 4, 5]. Основная микрофлора кефирных грибков представлена в табл. 1.
В ранней технологии кефира в качестве закваски использовали непосредственно грибки, бутылки с кефиром в процессе созревания встряхивали, что способствовало развитию дрожжей и спиртовому
брожению. В кефире, вырабатываемом сегодня, спиртовое брожение выражено очень слабо, количество спирта составляет сотые доли процента. Современный кефир - приятный, освежающий диетический напиток, широко используемый в питании как здоровых людей, так и больных желудочно-кишечными заболеваниями.
Айран - один из любимых напитков народов Кавказа и Азии, напоминает кефир, но имеет свои особенности. Продукт вырабатывается из коровьего (цельного и обезжиренного), овечьего или козьего молока. Закваска его состоит из молочнокислых лактококков, палочек и дрожжей. В составе домашнего айрана были идентифицированы культуры лактококков: Lactococcus lactis subsp. Lactis, Lactococcus lactis subsp. lactis biovar. diacetilactis; молочнокислых палочек: Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus; дрожжи, несбраживающие лактозу: Kluveromyces marxianus [6].
Айран, в отличие от кефира, обладает более тонким, мягким и нежным кисломолочным вкусом и ароматом, имеет нежные хлопья казеина. Более низкая кислотность и более высокий процент пептонизированных белков по сравнению с кефиром повышают его диетические свойства. Айран, вырабатываемый в настоящее время молочными предприятиями РФ, значительно отличается от его этнического, кавказского вида.
Имеются многочисленные исследования лечебно-профилактических свойств кефира и айрана [7]. Установлено, что оба продукта оказывают антиканцерогенное, противоопухолевое, иммуностимулирующее действие, регулируют работу желудочно-кишечного тракта. Считается, что эти национальные напитки помогают победить хроническую усталость, незаменимы при нарушениях сна и неполадках в нервной системе. По своим полезным свойствам превосходят другие кисломолочные продукты. Главным преимуществом напитков является способность оказывать пробиотическое действие: они благоприятно влияют на кишечную
микрофлору желудочно-кишечного тракта. На сегодняшний день ученые всего мира заинтересованы феноменом кефирного грибка и лечебными свойствами национальных кисломолочных напитков смешанного брожения (кефир, курунга, айран).
Цель исследования. Целью данной работы было исследование антипатогенной активности кефира и айрана против Escherichia coli EPEC и VTEC, Staphylococcus aureus, Clostridia difficile, Salmonella thyphimurium.
Ход исследования. Антагонистическая активность является неотъемлемой частью основных характеристик продуктов функционального назначения на основе лакто-бактерий. Поэтому в условиях in vitro был изучен антибактериальный эффект кефира и айрана по отношению к коллекционным тест-культурам Escherichia coli EPEC 8621, VTEC 12900VT, Staphylococcus aureus 8632, Clostridia difficile 13832 и Salmonella Typhimurium LT.
Кефир, используемый в исследовании, изготавливался на основе кефирных грибков по технологической инструкции. Кефирную закваску готовили путем внесения кефирных грибков в пастеризованное обезжиренное молоко в количестве 5% от массы при температуре 20-22 °С. Затем молоко ферментировали в течение 1820 ч при 20-21 °С и оставляли созревать в течение 12 ч при 4-6 °С. Полученную закваску после удаления кефирных грибков использовали для приготовления кефира. Обезжиренное молоко пастеризовали при 90...92 °С в течение 2-3 мин и охлаждали до 22.25 °С перед добавлением закваски. Закваску вносили в количестве 3% от массы молока. После ферментации в течение 8-12 ч молоко охлаждали до 8.12 °C для созревания в течение 8-10 ч.
Образцы айрана были изготовлены по традиционной технологии с использованием закваски домашнего айрана. Обезжиренное молоко пастеризовали при 90.92 °C в течение 2-3 мин. После
Основная микрофлора кефирных грибков
Таблица 1
Молочнокислые бактерии
Кокковая форма клеток
Палочковидная форма клеток
Уксуснокислые
Лактобациллы
L. kefiri, L. casei subsp. casei L. casei subsp. rhamnosus L. plantarum, L. acidophilus L. delbrueckii subsp. bulgaricus L. lactis, L. helveticus
Лактококки Lc. lactis subsp. lactis Lc. lactis subsp. cremoris Lc. lactis subsp. lactis biovar. Diacety-lactis
Лейконостокки Leu. mesenteroides subsp. cremoris Leu. mesenteroides subsp. dextranicum Leu. mesenteroides subsp. mesenteroides
Термофильные стрептококки Streptococcus thermophilus
Дрожжи
Kluyveromyces marxianus, Brettanomyces anomalus, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces exiguous, Saccharomyces unisporus, Debaryomyces hansenii, Pichia fermentans Candida kefir, Candida Holmii, Candida Friendrichii, Torulopsis chaerica, Torulaspora delbrueskii
Acetobacter aceti
5 10 15 20 Время инкубации, ч
Рост E. coli EPEC (A), E. coli VTEC (B), Salmonella typhimurium (В), Clostridia difficile (Г), Staphylococcus aureus (Д) в питательной среде в присутствии айрана (А), кефира (•), контроль (ш)
охлаждения молока до 40...45 °C добавляли закваску айрана из предыдущей выработки. Молоко ферментировали 4-5 ч для обеспечения интенсивного роста термофильных бактерий. После этого температуру опускали до 20.22 °С на 3-4 ч, чтобы обеспечить рост мезофильной микрофлоры. Затем продукт термостати-ровали при температуре 6.8 °C в течение 10-12 ч для развития дрожжей.
Ингибирующую активность кисломолочных напитков в отношении вышеуказанных бактерий исследовали путем их совместного культивирования с патогенными микроорганизмами с последующим высевом на питательные среды для количественного учета. Патогенные культуры Salmonella Typhimuriile и Clostrid difficile культивировали в питательной среде Вилкинс-Чалгрен, Staphylococcus aureus и Escherichia coli - в среде Трептон-соя при 37 °С в течение 18 ч. Далее к 9 мл соответствующей среды добавляли 1 мл кисломолочного напитка и 0,1 мл культуры патогенных микроорганизмов, чтобы получить начальную концентрацию патогена log10 5,5-6,0. Образцы готовили в трех экземплярах. Контроль включал 1 мл стерильной воды вместо кисломолочного напитка. Затем образцы инкубировали при 37 °С в течение 24 ч. Готовили серию разведений в пептонной воде и жизнеспособные популяции определяли путем посева образцов на соответствующий агар через 0, 5, 10 и 24 ч: Мак Конкей агар № 3 для Esherihia coli EPEC и VTEC; манитол-солевой агар для Staphylococcus aureus; усиленный агар для клостри-дий с включением антибиотиков но-вобиоцина и колистина для Clostridia difficile; бриллиантово-зеленый агар для Salmonella typhimurium. Чашки Петри инкубировали при 37 °С в течение 2448 ч. В конце инкубационного периода подсчитывали выросшие колонии.
Результаты и их обсуждение. Динамика развития микроорганизмов отражена на рисунке.
В контрольных образцах содержание E. coli EPEC и VTEC через 5 ч инкубации достигло максимума и за сутки не изменялось. Добавление кефира в инкубационную среду значительно снижало скорость роста кишечной палочки. Образцы, культивированные совместно с айраном, также показали более медленные темпы роста и более низкую конечную популяцию, чем контроль. Кисломолочные напитки имели выраженное ингибирую-щее действие на Salmonella typhimurium, по факту значительно снижая ее содержание от первоначального через 24 ч. Аналогичные результаты были получены с тест-культурой Staphylococcus aureus -в обоих случаях популяция показала значительное уменьшение в течение 24 ч инкубации, тогда как в контроле наблюдался интенсивный рост патогена. Кефир
и айран замедляли рост Clostridia difficile, через 18 ч происходило резкое снижение численности бактерий.
Степень ингибирования патогенных культур кефиром и айраном через 24 ч инкубации отражена в табл. 2.
Антагонистическая активность кефира и айрана практически одинаковая относительно S. aureus и S. typhimurium. Относительно других кишечных патогенов антибактериальные свойства у кефира были выше, чем у айрана. Число клеток других патогенов в среде с айраном больше на 21,2% для E. coli VTEC, 35,5% для E. coli EPEC и на 24,6% для C. difficile, чем в среде с кефиром.
Выводы. Данное исследование достоверно подтверждает факт антибактериального действия национальных кисломолочных напитков кефира и айрана на патогенную кишечную микрофлору, и при регулярном их потреблении будет
снижаться риск возникновения кишечных инфекций.
Антипатогенная активность является результатом действия широкого спектра антибактериальных соединений всего сообщества культур, входящих в национальные кисломолочные напитки. В их число входят молочная, уксусная, бензойная и другие кислоты, этанол, углекислый газ, диацетил, пероксид водород и особые пептиды (бактериоцины). Однако главную роль в антипатогенной активности в национальных кисломолочных напитках, как мы считаем, исполняют пероксид водород и бактериоцины, как вещества, способные разрушать мембраны патогенной кишечной инфекции.
Протонодонорные катаболиты (молочная кислота, уксусная и другие кислоты) подавляют рост кишечных патогенов в среде in vitro. В условиях толстой кишки кислую среду практически невозможно сохранить, там за счет секреции гидрокарбоната натрия поддерживается сла-
Таблица 2
Степень антагонистической активности кефира и айрана через 24 ч совместного культивирования с патогенными штаммами бактерий
Кисломолочные напитки Степень ингибирования патогенной кишечной микрофлоры, %
E. coli VTEC E. coli EPEC C. difficile S. aureus Salmonella typhimurium
Кефирная закваска 31,1+2,1 33,1+2,0 33,7+1,5 60,1+1,0 47,8+0,8
Закваска айрана 24,5+0,9 21,4+2,3 25,4+1,6 55,7+2,4 45,6+1,2
Антибактериальные свойства айрана относительно кефира, % 78,8 64,5 75,4 92,7 95,4
бощелочная реакция, следовательно, кроме кислотного существуют другие механизмы, объясняющие антипатогенные свойства кисломолочных национальных напитков.
Способность молочнокислых бактерий продуцировать перекись водорода (Н2О2) давно доказана, и еще никто этот факт не опровергал. Биосинтез Н2О2 происходит в фазе активного размножения культур, и наиболее активно перекись водорода образует ацидофильная палочка, которая наряду с бифидобактериями является главной пробиотической культурой кишечника. Кишечные патогены и вирусы (в отличие от молочнокислых бактерий) являются каталазоположительными культурами. Фермент каталаза в нативной форме содержит ион двухвалентного железа в структуре гема, и при наличии в среде низкой концентрации перекиси водорода на клетках патогенов создаются условия для реакции Фентона: Н2О2 расщепляется по радикальному механизму, железо фермента окисляется до трехвалентного (гем^е-ОН), и образуются радикалы гидроксила. Гидроксид-радикалы необычайно активны: они разрушают целостность мембран патогенных клеток, что приводит к их гибели. Необходимо заметить: при повышении концентрации перекиси водорода происходит вторая ступень каталазной реакции, приводящей к выделению кислорода и образованию воды.
Высокую антимикробную способность имеют и бактериоцины - низкомолекулярные катионозаряженные пептиды. Бактериоцины способны не только нарушать проницаемость клеточных мембран, но и разрушать их [8]. В настоящее время бактериоцины широко изучаются, рассматриваются как альтернатива антибиотикам, а в ряде случаев бактериоцины даже эффективнее их [9, 10].
Таким образом, главную роль в антипатогенной активности в национальных кисломолочных напитках с высокой степенью вероятности выполняют пероксид водород и бактериоцины: оба типа веществ способны избирательно вытеснять из сложившегося симбиотического состава постороннюю для этих напитков микрофлору. Такой взгляд на национальные кисломолочные напитки позволяет также объяснить устойчивость природного симбиотического состава, способность восстанавливаться и сохранять полезные свойства в течение ряда столетий.
ЛИТЕРАТУРА
1. Фильчакова, С.А. Национальный кисломолочный напиток - кефир // Переработка молока. - 2010. - № 1. - С. 34-35.
2. Байдина, И.А. Влияние технологических факторов на микрофлору кефира и айрана // Органическое сельское хозяйство: проблемы и перспективы. Материалы XXII международной научно-производственной конференции. -2018. - С. 374-376.
3. Градова, Н.Б. Исследование микробного профиля структурированной ассоциативной культуры микроорганизмов - кефирных грибков / Н.Б. Градова, А.А. Саранцева // Известия Самарского научного центра Российской академии наук. - 2012. - Т. 14. - № 5. - С. 705-710.
4. Kim, D.S. Isolation, identification and characterization of lactose nonfermenting yeast from kefir cultures/D.S. Kim, S.K. Park, H.S. Kwak and K.W. Lee // Korean J. Food Sci. Resources. - 2014. - P. 174-175.
5. Занданова, Т.Н. Исследование биотехнологического потенциала микробного консорциума / Т.Н. Занданова, П.А. Гоголева // Вестник ВСГУТУ. - 2017. - № 3 (66). - С. 71-77.
6. Гревцова, С.А. Изучение симбиотической микрофлоры кисломолочного напитка айран разных производителей / С.А. Гревцова, Э.И. Рехвиашвили, М.Ю. Кабулова // Известия Горского государственного аграрного университета. - 2017. - Т. 54. - № 3. - С. 158-162.
7. Santos, A. The antimicrobial properties of different strains of Lactobacillus spp. Isolated from kefir/A. Santos, M. San. Mauro, A. Sanchez // Systematic and Applied Microbiology. - 2013. -№ 26. - P. 434-437.
8. Iraporda, C. Biological activity of the non-microbial fraction of kefir: antagonism against intestinal pathogens / C. Iraporda, M. Abatemarco Júnior, E. Neumann, Á. Cantini Nunes // Journal of Dairy Research. - 2017. Vol. 84. Issue 3 (August). - P. 339-345. https: // doi.org/10.1017/ S0022029917000358
9. Абдуллаева, Н.Ф. Современные представления о механизме действия бактериоцинов молочнокислых бактерий (обзор) // Актуальные проблемы гуманитарных и естественных наук. - 2014. - № 10. - С. 23-27.
10. Сультимова, Т.Д. Бактериоцины молочнокислых бактерий / Т.Д. Сультимова, Е.В. Захаров // Вестник ВСГУТУ. - 2016. - № 2 (59). - С. 41-47.
REFERENCES
1. Fil'chakova SA. Natsional'ny kislomolochny napitok - kefir [National fermented milk drink -kefir]. Pererabotka moloka [Milk processing]. 2010. No. 1. P. 34-35.
2. Baidina IA. Vliyaniye tekhnologicheskikh faktorov na mikrofloru kefira i ayrana [The
influence of technological factors on the microflora of kefir and ayran]. Organicheskoye sel'skoye khozyaystvo: problemy i perspektivy. Materialy XXII mezhdunarodnoy nauchno-proizvodstvennoy konferentsii. 2018. P. 374-376.
3. Gradova NB, Sarantseva AA. Issledovaniye mikrobnogo profilya strukturirovannoy assotsiativnoy kul'tury mikroorganizmov -kefirnykh gribkov [Study of the microbial profile of a structured associative culture of microorganisms - kefir fung]. Izvestiya Samarskogo nauchnogo tsentra Rossiyskoy akademii nauk [Samara Scientific Center RAS News]. 2012. Vol. 14. No. 5. P. 705-710.
4. Kim DS, Park SK, Kwak HS, Lee KW. Isolation, identification and characterization of lactose nonfermenting yeast from kefir cultures. Korean Journal for Food Science of Animal Recources. 2014. P. 174-175.
5. Zandanova TN, Gogoleva PA. Issledovaniye biotekhnologicheskogo potentsiala mikrobnogo konsor-tsiuma [Study of the biotechnological potential of a microbial consortium]. Vestnik VSGUTU. 2017. No. 3 (66). P. 71-77.
6. Grevtsova SA, Rekhviashvili EI, Kabulova M Yu, Kabisov RG, Aylyarova MK. Izucheniye simbioticheskoy mikroflory kislomolochnogo napitka ayran raznykh proizvoditeley [Study of symbiotic microflora of fermented milk drink ayran from different manufacturer]. Izvestiya Gorskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta [Gorsky State Agricultural university news]. 2017. Vol. 54. No. 3. P. 158-162.
7. Santos A, San. Mauro M, Sanchez A, Torres JM, Marguina D. The antimicrobial properties of different strains of Lactobacillus spp. Isolated from kefir. Systematic and Applied Microbiology. 2013. No. 26. P. 434-437.
8. Iraporda C, Abatemarco Júnior M, Neumann E, Cantini Nunes Á. Biological activity of the non-microbial fraction of kefir: antagonism against intestinal pathogens. Journal of Dairy Research. 2017. Vol. 84. Issue 3. P. 339-345. https: //doi.org/10.1017/S0022029917000358
9. Abdullayeva NF. Sovremennye predstavleniya o mekhanizme deystviya bakteriotsinov molochnokislykh bakteriy: obzor [Modern ideas about the mechanism of action of bacteriocins of lactic acid bacteria: review]. Aktual'nye problemy gumanitarnykh i yestestvennykh nauk [Actual problems of humanitarian and natural sciences]. 2014. No. 10. P. 23-27.
10. Sul'timova TD, Zakharov Ye V. Bakteriotsiny molochnokislykh bakteriy [Bacterio-cins of lactic acid bacteria]. Vestnik VSGUTU. 2016. No. 2 (59). P. 41-47.
Авторы
Каледина Марина Васильевна, канд. техн. наук,
Федосова Анна Николаевна, канд. биол. наук,
Байдина Инна Алексеевна, канд. с.-х. наук
Белгородский государственный аграрный университет
им. В.Я. Горина, 308503, Белгородская обл., Белгородский р-н,
пос. Майский, ул. Вавилова, д. 1.
[email protected], fedosova. [email protected], [email protected]
Authors
Marina V. Kaledina, Candidate of Technical Sciences, Anna N. Fedosova, Candidate of Biological Sciences, Inna A. Baydina, Candidate of Agricultural Sciences
Belgorod State Agrarian University named after V.Ya. Gorin, Belgorod State Agricultural University named after V.Ya. Gorin, 1, Vavilova str., Belgorodsky region, Mayskiy village, 308503 [email protected], fedosova. [email protected], [email protected]
