CC BY
428
ЛЕЧЕБНОЕ ПИТАНИЕ
Для корреспонденции
Цыбикова Галина Цыреновна - доктор технических наук, профессор кафедры технологии продуктов из растительного сырья ФГБОУ ВО «Восточно-Сибирский государственный университет технологий и управления» Адрес: 670013, Республика Бурятия, г. Улан-Удэ, ул. Ключевская, 40в Телефон: (3012) 41-71-94 E-mail: [email protected]
Цыбикова Г.Ц.1, Разуваева Я.Г.2, Торопова А.А.2, Николаев С.М.2, 3
Антимутагенные и антиоксидантные свойства кондитерского изделия, содержащего порошок из листьев Hippophae rhamnoides L.
1 ФГБОУ ВО «Восточно-Сибирский государственный университет технологий и управления», Улан-Удэ
2 ФГБУН «Институт общей и экспериментальной биологии» СО РАН, Улан-Удэ
3 Иркутская государственная медицинская академия последипломного образования - филиал ФГБОУ ДПО «Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования» Минздрава России
1 East Siberia State University of Technology and Management, Ulan-Ude
2 Institute of General and Experimental Biology, Ulan-Ude
3 Irkutsk State Medical Academy of Postgraduate Education - Branch of the Russian Medical Academy of Continuing Professional Education
Целями работы были определение возможности использования порошка из листьев облепихи ШррорНав rhаmnoides Ь. для обогащения мучного кондитерского изделия и оценка антимутагенных и антиоксидантных свойств данного продукта. Исследования выполнены на 24 белых крысах линии Вистар с исходной массой тела 180-200 г. Животные опытной группы (п=8) на фоне стандартной диеты вивария в течение 14 дней получали кондитерское изделие, содержащее облепиховый порошок, из расчета 20 мг на 100 г массы тела, животные интакт-ной и контрольной групп - в эквивалентной дозе по аналогичной схеме кондитерское изделие, не содержащее биологическую добавку. Антимутагеннные и антиоксидантные свойства кекса исследовали через 1 сут после однократного введения животным циклофосфана в дозе 20 мг на 1 кг массы тела. Подсчитывали количество хромосомных аберраций в клетках костного мозга
Для цитирования: Цыбикова ГЦ., Разуваева Я.Г, Торопова А.А., Николаев С.М. Антимутагенные и антиоксидантные свойства кондитерского изделия, содержащего порошок из листьев Hippophae rhamnoides L. // Вопр. питания. 2018. Т. 87. № 1. С. 92-7. doi: 10.24411/0042-88332018-10011.
Статья поступила в редакцию 19.01.2017. Принята в печать 18.12.2017.
For citation: Tsybikova G.Ts., Razuvaeva Ya.G., Toropova A.A., Nikolaev S.M. Antimutagenic and antioxidant features of confectionery products containing the powder from the leaves of Hippophae rhamnoides L. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2018; 87 (1): 92-7. doi: 10.24411/00428833-2018-10011. doi: 10.24411/0042-8833-2018-10011. (in Russian) Received 19.01.2017. Accepted for publication 18.12.2017.
Antimutagenic and antioxidant features of confectionery products containing the powder from the leaves of Hippophae rhamnoides L.
Tsybikova G.Ts.1, Razuvaeva Ya.G.2, Toropova A.A.2, Nikolaev S.M.2, 3
белых крыс, определяли активность каталазы, супероксиддисмутазы, концентрацию восстановленного глутатиона и ТБК-активных продуктов в крови. Установлено, что потребление кондитерского изделия, содержащего порошок из листьев ШррорНав rhamnoides Ь., на 45% снизило количество поврежденных клеток, на 50% - долю клеток с множественными разрывами хромосом и на 52% - число ахроматических пробелов по сравнению с животными контрольной группы (п=8). Потребление кекса с добавлением облепихового порошка повышало активность каталазы (на 52%) и супероксиддисмутазы (на 33%), концентрацию восстановленного глутатиона (на 26%) по сравнению с контролем. Ключевые слова: кондитерское изделие, порошок из листьев Hippophae rhamnoides Ь., циклофосфан, антимутагенное, антиоксидан-тное свойства
The aim of the work was to determine the possibility of using the powder from the leaves of Hippophae rhamnoides L. for enriching flour confectionery and to evaluate the antimutagenic and antioxidant activity of the product. The experiment was carried out on 24 white Wistar rats with initial body weight (b.w.) 180-200 g. The animals of the experimental group (n=8) received confection containing sea buckthorn powder at a rate of 20 mg per 100 g b.w. for 14 days on the background of a standard vivarium diet. The animals of the control and intact groups received confection containing no bioactive supplement at the same dose. Antimutagenic and antioxidant effects were estimated in a day after a single injection of cyclophosphamide at a dose of 20 mg/kg b.w. The number of chromosomal aberrations in bone marrow cells of white rats was counted and the activity of catalase, superoxide dismutase (SOD), the level of reduced glutathione and the concentration of TBA-active products in blood were evaluated. The intake of the confectionery containing the powdered H. rhamnoides leaves resulted in the 45% decrease of the number of damaged cells, 50% decrease of the proportion of cells with multiple chromosome breaks and 52% decrease of the number of achromatic gaps as compared to animals of the control group (n=8). The cake intake increased the activity of catalase (by 52%) and SOD (by 33%) and glutathione content (by 26%) in blood. Keywords: confection, powder from the leaves of Hippophae rhamnoides L., cyclo-phosphamide, antimutagenic effect, antioxidant effect
Внастоящее время в связи с развитием науки о питании, а также со стремлением населения поддерживать физическое и умственное здоровье потребление и производство функциональных пищевых продуктов становится все более востребованным. В состав пищевых продуктов вводятся специальные добавки, компоненты с высоким содержанием биологически активных веществ (БАВ), активизирующие функции отдельных систем организма, нормализующие метаболизм, восполняющие дефицит и снижающие риск развития заболеваний. Расширение ассортимента пищевых продуктов функционального назначения возможно за счет более широкого использования растительного сырья, содержащего ценные для функционирования организма человека БАВ [1, 2].
С этой точки зрения перспективным сырьем являются кора, листья и продукты комплексной переработки облепихи. Плоды облепихи в промышленных масштабах используются для производства облепихового масла, перерабатываются в соки, желе и другие консервированные продукты. Остальные части растения, а также продукты переработки плодов облепихи практически не применяются в производстве пищевых продуктов, несмотря на то что, по результатам исследований, они являются источником ценных БАВ. Известно, что листья,
кора и корни облепихи отличаются высоким содержанием флавоноидов, дубильных веществ, служат источником минеральных веществ [3].
Цели данной работы - определение возможности использования порошка из листьев И1ррорЬав гИатпо-des для обогащения мучного кондитерского изделия и оценка антимутагенного и антиоксидантного действия данного продукта.
Материал и методы
Для оценки пищевой ценности кекса и порошка из листьев И1ррорЬае rhаmnoides I. использовали общепринятые методы анализа химического состава и содержания БАВ. Содержание белка определяли по ГОСТ 10846-91. После минерализации образца с серной кислотой нейтрализовали кислоту щелочью, осуществляли перегонку и титрование дистиллята. По количеству выделившегося аммиака вычисляли количество азота [4]. Массовую долю жира определяли по ГОСТ 31902-2012. Метод основан на экстракции жира эфиром с последующей отгонкой растворителя и взвешиванием жира [5]. Содержание нерастворимой в растворе соляной кислоты золы оценивали
по ГОСТ 5901-87 методом озоления с последующей обработкой золы с соляной кислотой и повторным озо-лением материала [6]. Массовую долю углеводов определяли феррицианидным методом по ГОСТ 5903-89 [7].
Для анализа содержания дубильных веществ использовали метод, основанный на окислении дубильных веществ раствором калия перманганата, а танинов -спектрофотометрический [8]. Содержание каротинои-дов и хлорофиллов оценивали спектрофотометрически, путем измерения оптической плотности экстракта пигментов при длинах волн, соответствующих максимумам поглощения каротиноидов и хлорофиллов, с последующим расчетом концентрации пигментов [9]. Количество флавоноидов определяли спектрофотометрическим методом в пересчете на рутин [10]. Содержание минеральных веществ анализировали методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии с использованием прибора «PinAAcle 900T» («Perkin Elmer», США). Содержание элемента в пробе определяли с использованием установленной функциональной зависимости между аналитическим сигналом и концентрацией элемента в образце сравнения [11].
Рецептура кекса включала следующие компоненты: мука пшеничная хлебопекарная высшего сорта, сахар-песок, маргарин, яйцо, соль, ванилин, сода, сахарная пудра, порошок из листьев облепихи Hippophae rhamnoides L. в количестве 15% (вместо муки).
Экспериментальные исследования выполнены на белых крысах линии Вистар с исходной массой тела 180-200 г. Содержание животных соответствовало «Правилам лабораторной практики (GLP) и приказу Минздрава России от 01.04.2016 № 193н «Об утверждении правил надлежащей лабораторной практики». Перед началом экспериментов животных, отвечающих критериям включения, распределяли по группам с учетом пола, возраста, массы тела и принципа рандомизации. Экспериментальную работу осуществляли в соответствии с Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных (приложение к приказу Минздрава СССР от 12.08.1977 № 755), Правилами, принятыми в Европейской конвенции по защите позвоночных животных (Страсбург, 1986).
Животные были разделены на 3 группы. В каждую группу входило по 8 животных. Крысы опытной группы в течение 14 дней получали кондитерское изделие, содержащее 15% порошка из листьев облепихи, из расчета 20 мг на 100 г массы тела; животные интактной и контрольной групп - кондитерское изделие, не содержащее биологическую добавку, в эквивалентной дозе по аналогичной схеме. Циклофосфан в дозе 20 мг на 1 кг массы тела вводили однократно животным контрольной и опытной групп внутрибрюшинно за 1 сут до декапитации (под эфирным наркозом). Животным ин-тактной группы циклофосфан не вводили.
Антимутагенное влияние кондитерского изделия, содержащего порошок из листьев облепихи, оценивали с использованием методов учета хромосомных аберраций в клетках костного мозга млекопитающих
в соответствии с Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ [12]. Учет проводили через 24 ч после введения циклофосфана, а за 2 ч до выведения из эксперимента животным вводили внутрибрюшинно колхицин в дозе 2,5 мг на 1 кг массы тела. Костный мозг отбирали из бедренной кости. После гипотенизации клеток в термостате с помощью 0,5% раствора калия хлорида и фиксации смесью этанола и ледяной уксусной кислоты (3:1) готовили цитогенетические препараты. Аберрации хромосом аназизировали путем визуального просмотра метафазных пластинок при увеличении микроскопа х1000. От каждой особи исследовали по 100 метафазных пластинок, удовлетворяющих необходимым требованиям. Повреждения хромосом учитывали согласно рекомендациям, изложенным в методических работах [12].
Состояние антиоксидантной системы оценивали по активности каталазы в сыворотке крови [13], активности супероксиддисмутазы (СОД) [14] и по концентрации восстановленного глутатиона в крови [15]. Интенсивность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) определяли по концентрации ТБК-активных продуктов в сыворотке крови [17].
Экспериментальный материал обрабатывали с использованием пакетов статистических программ Microsoft Ехсе1 2010 и Statists 13. Результаты исследований представлены в виде средней величины (М) и ошибки среднего (m). Достоверность найденных отличий средних величин между группами оценивали с помощью непараметрического U-критерия Манна-Уитни (для независимых групп, различия считали статистически значимыми при р<0,05).
Результаты и обсуждение
Для подтверждения целесообразности применения облепихового порошка из листьев Hippophae rhamnoi-des L. в производстве мучных кондитерских изделий была проведена выпечка и оценка потребительских достоинств кекса с добавкой облепихового порошка. На основе органолептической оценки и анализа физико-химических свойств изделия были обоснованы объемы ввода порошка из листьев облепихи в рецептуру кекса. Оценку проводили по органолептическим и физико-химическим показателям качества изделий.
Установлена целесообразность внесения добавки в пределах 15,0%. При этом происходят изменения пищевой ценности изделия, обогащение БАВ (табл. 1).
Цитогенетический анализ костного мозга белых крыс показал (табл. 2), что однократное внутрибрюшинное введение цитостатика достоверно увеличивало количество клеток с хромосомными аберрациями до 12,1±0,7%, тогда как уровень спонтанных аберраций у интактных животных не отличался от данных литературы и составил в среднем 1,0% [12]. Среди структурных нарушений хромосом наблюдались одиночные и парные фраг-
менты, а также обмены. В контрольной группе количество ахроматических пробелов в клетках костного мозга увеличилось в 7,6 раза по сравнению с показателями животных интактной группы.
Скармливание животным кондитерского изделия, содержащего порошок из листьев облепихи, способствовало снижению количества поврежденных клеток на 45%, доли клеток с множественными разрывами хромосом - на 50% по сравнению с показателями животных контрольной группы. Число ахроматических пробелов у животных опытной группы на 52% ниже такового у крыс контрольной группы.
Установлено, что однократная инъекция животным циклофосфана вызывает интенсификацию процессов свободнорадикального окисления биомакромолекул, с последующим дисбалансом клеточного редокс-ста-туса (табл. 3). Так, в контрольной группе животных отмечалось угнетение антиоксидантной системы организма, выражающееся в снижении активности каталазы и СОД в 1,5 и 2,1 раза соответственно, а также в уменьшении
содержания восстановленного глутатиона на 40% по сравнению с показателями интактной группы. Следствием нарушения активности антиоксидантной системы стало повышение содержания ТБК-активных продуктов в сыворотке крови на 31% по сравнению с таковым у интактных животных. Интенсификация процессов ПОЛ в контрольной группе животных, вероятно, связана с истощением глутатионовой системы организма, активацией микросомальных окислительных процессов, участвующих в метаболизме циклофосфана, угнетением процессов энергообеспечения клетки в результате прямого повреждения молекул энергетического обмена метаболитами цитостатика и, как следствие, нарушением процессов их биосинтеза [17].
Употребление животными кондитерского продукта, содержащего облепиховый порошок из листьев, на фоне однократного введения циклофосфана оказало защитное влияние на состояние эндогенной антиокси-дантной системы, снижая содержание конечных продуктов ПОЛ и способствуя уменьшению выраженности
Таблица 1. Пищевая ценность кекса (в 100 г)
Показатель Без добавки С добавкой порошка из листьев облепихи
Белок, г 6,2 6,0
Жиры, г 13,6 13,5
Углеводы, г 34,4 33,2
Зола, г 13,8 13,9
Дубильные вещества, мг - 1,6
Танины, мг - 225,0
Каротиноиды, мг - 1,3
Флавоноиды, мг - 60,0
Хлорофилл, мг - 3,6
Минеральные вещества, мг:
Са 40,4 363,0
Мд 10,8 77,2
Ре 1,0 7,5
Мп 0,2 3,0
Энергетическая ценность, ккал 284,8 298,3
П р и м е ч а н и е. Приведены средние из трех определений.
Таблица 2. Влияние кондитерского изделия, содержащего порошок из листьев облепихи, на количество хромосомных аберраций в клетках костного мозга белых крыс при действии циклофосфана
Показатель Группа животных
интактная(Н2О) контрольная (ЦФ + КИ) опытная (ЦФ + КИЛО)
Число метафаз 600 600 600
Количество аберраций, %
Одиночные фрагменты 0,50 12,17 6,83
Парные фрагменты 0,17 2,83 1,83
Обмены 0 0,67 0,50
Клетки с множественными аберрациями 0 0,67 0,33
Пробелы, % 0,33 2,5 1,2
Доля поврежденных клеток, % 1,0±0,2 12,1 ±0,7* 6,7±0,7*, #
П р и м е ч а н и е. Здесь и в табл. 3: * - различия значимы (р^0,05) по сравнению с данными животных интактной группы; # - различия значимы (р40,05) по сравнению с данными животных контрольной группы; ЦФ - циклофосфан; КИЛО - кондитерское изделие, содержащее порошок из листьев облепихи; КИ - кондитерское изделие без добавок.
Таблица 3. Влияние кондитерского изделия, содержащего порошок из листьев облепихи, на состояние антиоксидантной системы организма при действии циклофосфана
Показатель Группа животных
интактная(Н2О) контрольная (ЦФ + КИ) опытная (ЦФ + КИЛО)
Каталаза, мкат/л 17,9±0,6 12,1 ±0,8* 18,4±1,3#
Супероксиддисмутаза, усл. ед. 2,5±0,1 1,2±0,1 * 1,6±0,1*, #
Восстановленный глутатион, мкмоль/л 1248,5±76,9 743,3±21,0* 936,4±21,5*, #
ТБК-активные продукты, мкмоль/мл 4,9±0,2 6,4±0,3* 5,9±0,4
окислительного стресса. В опытной группе у животных статистически значимо повышались активность ката-лазы и СОД, а также уровень восстановленного глутати-она соответственно на 52, 33 и 26% по сравнению с контролем (табл. 3). На фоне употребления исследуемого кондитерского изделия у животных отмечена тенденция к снижению уровня ТБК-активных продуктов.
Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что кекс с добавкой порошка из листьев
облепихи Hippophae rhamnoides L. обладает антимутагенными и антиоксидантными свойствами. Под его влиянием восстанавливается редокс-статус организма и ограничивается развитие более глубоких повреждений клеточных структур, индуцированных реакционно-способными продуктами метаболизма циклофосфана, что обусловлено содержанием в нем широкого спектра БАВ, в том числе флавоноидов и каротиноидов, оказывающих выраженное антиоксидантное действие [18, 19].
Сведения об авторах
Цыбикова Галина Цыреновна - доктор технических наук, профессор кафедры технологии продуктов из растительного сырья ФГБОУ ВО «Восточно-Сибирский государственный университет технологий и управления» (Улан-Удэ) E-mail: [email protected]
Разуваева Янина Геннадьевна - доктор биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории безопасности биологически активных веществ ФГБУН «Институт общей и экспериментальной биологии» СО РАН (Улан-Удэ) E-mail: [email protected]
Торопова Анюта Алексеевна - кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории безопасности биологически активных веществ ФГБУН «Институт общей и экспериментальной биологии» СО РАН (Улан-Удэ) E-mail: [email protected]
Николаев Сергей Матвеевич - доктор медицинских наук, профессор, главный научный сотрудник лаборатории экспериментальной фармакологии ФГБУН «Институт общей и экспериментальной биологии» СО РАН (Улан-Удэ), профессор кафедры клинической фармакологии Иркутской государственной медицинской академии последипломного образования - филиала ФГБОУ ДПО «Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования» Минздрава России E-mail: [email protected]
Литература
1. Тутельян В.А., Киселева Т.Л., Кочеткова А. А. и др. Перспек- 7. тивные источники фитонутриентов для специализированных пищевых продуктов с модифицированным углеводным профи- 8. лем: опыт традиционной медицины // Вопр. питания. 2016. Т. 85,
№ 4. С. 46-60. 9.
2. Бакиров А.Б., Бадамшина Г.Г., Тимашева Г.В. и др. Применение анти-оксидантного напитка у здоровых лиц, работающих в условиях 10. химической нагрузки // Вопр. питания. 2016. Т. 85, № 4. С. 82-86.
3. Цыбикова Д.Ц. Биологически активные вещества облепихи 11. крушиновидной и перспективы их использования в медицине
и пищевых отраслях. Улан-Удэ : Изд-во ВСГТУ, 2007. 280 с. 12.
4. ГОСТ 10846-91. Зерно и продукты его переработки. Метод определения белка.
5. ГОСТ 31902-2012. Изделия кондитерские. Методы определения 13. массовой доли жира.
6. ГОСТ 5901-87. Изделия кондитерские. Методы определения 14. массовой доли золы и металломагнитной примеси.
ГОСТ 5903-89. Изделия кондитерские. Методы определения сахара.
Гринкевич Н.И., Сафронич Л.Н. Химический анализ лекарственных растений. М. : Высшая школа, 1983. 176 с. Методы биохимического исследования растений / под ред. Ермакова А.И. Л. : Агропромиздат, 1987. 428 с. Государственная фармакопея СССР. XI изд. М.: Медицина, 1990. 350 с.
Ринькис Г.Я., Римакс Х.К, Кушницкая Т.А. Методы анализа почв и растений. Рига, 1987. 95 с.
Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / под ред. А.Н. Миронова, Н.Д. Бунятяна и др. М. : Гриф и К, 2012. 944 с.
Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г. и др. Метод определения активности каталазы // Лаб. дело. 1988. № 1. С. 16-19. Макаренко Е.В. Комплексное определение активности суперок-сиддисмутазы и глутатионредуктазы в эритроцитах у больных
с хроническими заболеваниями печени // Лаб. дело. 1988. № 11. С. 48-50.
15. Akerboom T.P.M., Sies H. Assay of glutathione, glutathione disulfide
and glutathione mixed disulfides in biological samples // Methods 18. Enzymol. 1981. Vol. 77. P. 373-382.
16. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современ- 19. ные методы в биохимии. М., 1977. С. 67-69.
17. Кашуро В.А., Глушков С.И., Минаева Л.В., Новикова Т.М. Фармакологическая коррекция цитофлавином циклофосфан-
индуцированного токсического поражения тканей печени и почек в эксперименте // Антибиотики и химиотер. 2010. № 9. С. 29-32.
Дадали В.А., Тутельян В.А., Дадали Ю.В., Кравченко Л.В. Кароти-ноиды. Биодоступность, биотрансформация, антиоксидантные свойства // Вопр. питания. 2010. № 2. С. 4-18. Тутельян В.А., Лашнева Н.В. Биологически активные вещества растительного происхождения. флаваноны: пищевые источники, биодоступность, влияние на ферменты метаболизма ксенобиотиков // Вопр. питания. 2011. № 5. С. 4-7.
References
1. Tutelyan V.A., Kiseleva T.L., Kochetkova A.A., et al. Promising sourc- 12. es of phytonutrients for specialized food products with modified carbohydrate profile: the experience of traditional medicine. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2016; 85 (4): 46-60. (in Russian) 13.
2. Bakirov A.B., Badamshina G.G., Timasheva G.V., et al. The use of antioxidant drink in healthy individuals, working in conditions
of chemical load. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2016; 14. 85 (4): 82-6. (in Russian)
3. Tsybikova D.Ts. Biologically active substances of Hippophae rham-noides and the prospects for their use in medicine and food industries. Ulan-Ude: Izd-vo VSGTU, 2007: 280. (in Russian) 15.
4. GOST 10846-91. Grain and its products. Method for determination of protein. (in Russian)
5. GOST 31902-2012. Confectionery. Methods for determination of fat. 16. (in Russian)
6. GOST 5901 -87. Confectionery. Methods for determination of ash and metallomagnetic impurities. (in Russian) 17.
7. GOST 5903-89. Confectionery. Methods for determination of sugar. (in Russian)
8. Grinkevich N.I., Safronich L.N. Chemical analysis of medicinal plants. Moscow: Visshaya Shkola, 1983: 176 p. (in Russian) 18.
9. Ermakova A.I. (ed.). Methods of biochemical studies of plant. Leningrad: Agropromizdat, 1987: 428 p. (in Russian)
10. The State Pharmacopoeia of the USSR. XI ed. Moscow: Meditsina, 19. 1990: 350 p. (in Russian)
11. Rin'kis G.Ya., Rimaks Kh.K., Kushnitskaya T.A. Methods of soil and plant analysis methods. Riga, 1987: 95 p. (in Russian)
Mironova A.N., Bunyatyana N.D., et al. (ed.). Manual on the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances. Moscow: Grif i K, 2012: 944. (in Russian) Korolyuk M.A., Ivanova L.I., Mayorova I.G., et al. The method for determining the activity of catalase. Laboratornoe delo [Laboratory Work]. 1988; (1): 16-9. (in Russian)
Makarenko E.V. A comprehensive definition of the activity of superoxide dismutase and glutathione reductase in red blood cells in patients with chronic liver disease. Laboratornoe delo [Laboratory Work]. 1988; (11): 48-50. (in Russian)
Akerboom T.P.M., Sies H. Assay of glutathione, glutathione disulfide and glutathione mixed disulfides in biological samples. Methods Enzymol. 1981; 77: 373-82.
Stal'naya I.D., Garishvili T.G. Method for determination of malondial-dehyde via thiobarbituric acid. In: Modern Methods in Biochemistry. Moscow, 1977: 67-9. (in Russian)
Kashuro V.A., Glushkov S.I., Minaeva L.V., Novikova T.M. Pharmacological correction cytoflavin cyclophosphamide-induced liver toxic-ity and kidney tissues in experiment. Antibiotiki i khimioterapiya [Antibiotics and Chemotherapy]. 2010; 9: 29-32. (in Russian) Dadali V.A., Tutelyan V.A., Dadali Yu.V., Kravchenko L.V. Carotenoids. Bioavailability, biotransformation, antioxidant properties. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2010; 79 (2): 4-18. (in Russian) Tutelyan V.A., Lashneva N.V. Biological active substances of plant origin. Flavanones: dietary sources, biovailability, the influence on xenobiotic metabolizing enzymes. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2011; 80 (5): 4-7. (in Russian)
