УДК 582.949.2/579.61
Л. А. Котюк
АНТИМ1КРОБНА АКТИВН1СТЬ ЕТАНОЛЬНОГО ЕКСТРАКТУ SATUREJA HORTENSIS L. ПРОТИ ПАТОГЕННИХ ШТАМ1В М1КРООРГАН1ЗМ1В
Житомирський нацюнальнш azpoeKOAOziuHuü утверситет e-mail: kotyukl@mail.ru
У статп наведено вЦомосп про компонентний склад ефiрноi оли Satureja hortensis, культивовано1 в умовах Житомирського Полiсся. У ефiршй оли чаберу садового було Центифшовано 19 компоненгiв: карвакрол (89,07 %), у-тертнен (3,53 %), а-туйон (1,7 %), камфора (1,48 %), герпiнен-4-ол (0,91 %), ß-бкаболен (0,56 %), ß-карiофiлен (0,45 %), бiциклогермакрен (0,38 %), пара-цимен (0,34 %), 1,8-цинеол (0,33 %), гранс-сабiненгiдраг (0,25 %), 1-октен-3-ол (0,20 %), спатуленол (0,18 %), ß-туйон (0,14 %), евгенол (0,11 %), геранiлацегаг (0,11 %), гумулен (0,09 %), а-терпшен (0,09 %), октанол-3 (0,07 %). Високий вмет карваркролу зумовлюе ангимiкробнi властивосп чаберу садового.
Дослiджено бiологiчну актившсть 40 % етанольного екстракту Satureja hortensis, вирощеного в умовах Полшся Украши, щодо золотистого сгафiлокока (Staphylococcus aureus), кишковоi палички (Escherichia coli), сииьогншно' палички (Pseudomonas aeruginosam) та кандЦи бьлшчо'1 (Candida albicans), яи е патогенними стосовно iнших органiзмiв.
Показано, що екстракт S. hortensis характеризувався антимiкробною акгивнiсгю, оскiльки екстраговаш речовини у 32 рази пЦвишували показники мшмально1 бактерiостатичноi та у 16 - мшмально1 бактерицидно! концентрацiй щодо S. aureus. Менш виражений ефект було в^дмчено щодо C. albicans. В даному випадку спостеркалось лише двократне тдвищення показникiв MIC та MFC. По вЦношенню до E. coli компоненти екстракту чаберу садового посилювали удвiчi бактерюстатичний i бактерицидний ефект 40 % етанолу, щодо P. aeruginosa антимшробного впливу в^д^чено не було.
Вiдмiчено перспектившсть подальшого детальшшого вивчення етанольних екстрактiв трави чаберу садового з метою виготовлення антибактерiальних та антифунгальних рослинних препарата.
Ключовi слова: Satureja hortensis, етанольний екстракт, мШмальна бактерюстатична концентрац1я, мтмальна бактерицидна концентраця.
Л. А. Котюк
АНТИМИКРОБНАЯ АКТИВНОСТЬ ЭКСТРАКТА SATUREJA HORTENSIS L. ОТНОСИТЕЛЬНО ПАТОГЕННЫХ ШТАММОВ МИКРООРГАНИЗМОВ
Житомирский национальный агроэкологический университет e-mail: kotyukl@mail.ru
В статье приведены сведения о компонентном составе эфирного масла Satureja hortensis, культивируемого в условиях Житомирского Полесья. В эфирном масле чабера садового было идентифицировано 19 компонентов: карвакрол (89,07%), у-терпинен ISSN 2225-5486 (Print), ISSN 2226-9010 (Online). Бiологiчний тсникМДПУ. 2014. №3
(3,53%), а-туйон (1,7%), камфора (1,48%), терпинен-4 ол (0,91%), р-бисаболен (0,56%), р-кариофиллен (0,45%), бициклогермакрен (0,38%), пара-цимен (0,34%), 1,8- цинеол (0,33%), транс-сабиненгидрат (0,25%), 1-октен-3-ол (0,20%), спатуленол (0,18%), р-туйон (0,14%), эвгенол (0,11%), геранилацетат (0,11%), гумулен (0,09%), а-терпинен (0,09%), октанол-3 (0,07%). Высокое содержание карваркрола обуславливает антимикробные свойства чабера садового.
Исследовано биологическую активность 40% этанольного экстракта Satureja hortensis, выращенного в условиях Полесья Украины, относительно золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus), кишечной палочки (Escherichia coli), синегнойной палочки (Pseudomonas aeruginosa) и кандиды белеющей (Candida albicans), которые являются патогенными по отношению к другим организмам.
Показано, что экстракт S. hortensis характеризовался антимикробной активностью, поскольку экстрагированные вещества в 32 раза повышали показатели минимальной бактериостатической и в 16 - минимальной бактерицидной концентрации относительно S. aureus. Менее выраженный эффект был отмечен относительно C. albicans. В данном случае наблюдалось только двукратное повышение показателей MIC и MFC. По отношению к E. coli компоненты экстракта чабера садового усиливали в два раза бактериостатический и бактерицидный эффект 40% этанола, относительно P. aeruginosa антимикробное воздействие не установлено.
Отмечено перспективности дальнейшего изучения этанольных экстрактов травы чабера садового с целью изготовления антибактериальных и антифунгальних растительных препаратов.
Ключевые слова: Satureja hortensis, этанольный экстракт, минимальная бактериостатическая концентрация, минимальная бактерицидная концентрация.
L. A. Kotyuk
ANTIMICROBIAL ACTIVITY OF ETHANOL EXTRACT OF SATUREJA HORTENSIS L. TOWARDS PATHOGENIC MICROBIAL STRAINS
Zhytomyr National Agroecological University e-mail: kotyukl@mail.ru
The paper provides the information on the component composition of ethereal oil of Satureja hortensis cultivated in Zhytomyr Polissya. In the ethereal oil of summer savory, 19 components were identified: carvacrol (89,07%), y-terpinene (3,53%), а-thujone (1,7%), camphora (1,48%), terpinen-4 ol 4 (0,91%), p-bisabolen (0,56%), p-caryophyllene (0,45%), bitsiklogermakren (0,38%) para-cymene (0,34%), 1,8-cineole (0,33%), trans-sabinengidrat (0.25%), 1-octen-3-ol (0.20%), spatulenol (0,18%), p-thujone (0,14%), eugenol (0,11%), geranylacetate (0,11%), humulene (0,09%), а-terpinene (0,09%), octanol-3 (0,07%). A high carvacrol content determines antimicrobial properties of summer savory.
The antimicrobial activity of S. hortensis extract was studied in accordance with the common methodology of determining the sensitivity of microorganisms to antibacterial preparations. The aboveground part of plants harvested in the last ten-day period of August, in the flowering phase, was used in the experiments. The raw material was reduced to fragments of 1-1.5mm according to the requirements of pharmacopoeia. The extract of S. hortensis was obtained by the method of maceration in 40% ethyl alcohol at a ratio of 1:5 and = ISSN 2225-5486 (Print), ISSN 2226-9010 (Online). Бiологiчний вкникМДПУ. 2014. №3
-a
the concentration of 200mg/ml. The availability of antimicrobial activity of extracted substances in the structure of the substances studied was determined by the way of comparison of their minimum inhibiting concentrations (MIC) and minimum bacteriddal/fungicidal concentrations (MBC/MFC) with those in 40% ethyl alcohol.
The paper investigates the biological activity of 40 % ethanol extract of Satureja hortensis herb grown under the conditions of Ukrainian Polissya as to golden staphylococcus (Staphylococcus aureus), coliform bacillus Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa and Candida albicans which are pathogenic in reference to other organisms.
It has been shown that S. hortensis extract was characterized by antimicrobial activity since extracted substances increased 32 times the indices of minimum bacteriostatic concentration and 16 times those of minimum bactericidal concentration as to S. aureus. The less marked effect was registered concerning C. albicans. In this case twofold increase of MIC and MFC indices was only observed. In relation to E. coli the components of savory extract intensified two times the bacteriostatic and bacteriocidal effect of 40% ethanol. As to P. aerugionosa the antimicrobial effect was not registered.
The paper draws attention to the prospects of the further more detailed study of ethanol extracts of summer savory with the aim of producing antibacterial and antifungal herbal preparations.
Key words: Satureja hortensis, ethanol extract, minimal bacteriostatic concentration, minimal bactericidal concentration.
ВСТУП
Досить щнною лшарською, пряно-ароматичною, ефiроолiйною рослиною е чабер садовий (Satureja hortensis L.), який належить до родини Губоцвт (Lamiaceae Lindl.). Це однорiчна трав'яна рослина, яка у природi зус^чаеться у Причорномор'1 та Сходному Середземномор'1. В даний час ii вирощують у багатьох кра'шах £вропи, в США, Росп". На Укра'М чабер садовий поширений у Криму, на Придншров% де вш зростае на сухих кам'янистих i щебенистих схилах, скелях, у садах, на городах (Мшарченко, 2005).
За повЦомленням багатьох дослЦниюв (Танская, 2008; Mihajilov-Krstev, 2009), сировина S. hortensis метить комплекс бюлопчно активних речовин досить широкого спектру фармаколопчно! активность £ вЦомосл, що надземна частина чаберу садового метить 0,1-3,2 % ефiрноl олп, у складi яко1 12,8-52,5 % карваркролу, 0,2-18,4 % тимолу, 6,8-35,8 % п-цимолу, 0,6-1,5 % а-тнену, 0,2-0,9 % ]3-тнен, 0,2 % сабшену; 0,1 % камфену, 1-2,3 % мюцену та ш. У стеблах i листках виявлено урсолову кислоту (0,17- 0,4 %), фенолкарбоновi кислоти та 1х похЦнк хлорогенову, розмаринову, ферулову (0,012 %), кофейну 0,074-0,49, п-кумарову (0,0032-0,0034 %) та ш.( Растительные ресурсы, 2000).
Дослiдження M. Mohammadhosseini i M. Beiranvand (Mohammadhosseini et al, 2013) щодо бiохiмiчного складу чаберу садового, вирощеного в 1раш, дали можливiсть виявити у ефiрнiй олй' рослин наступнi сполуки: у-терпшен (27,4
%), карвакрол (23,7 %), р-цимол (11,1 %), а-тертнен (10,2 %), а-тнен (5,1 %) та мiрцен (5,1 %), а-туйон (3,9 %), ]3-шнен (3,0 %), а-феландрен (1,2 %) .
T. Mihajilov-Krstev та D. Radnovic (Mihajilov-Krstev et al, 2009) виявили токсичш властивостi ефiрно'í олп чаберу садового щодо грам-позитивних (Bacillus subtilis, Clostridium perfringens, Micrococcus flavus, Staphylococcus aureus, Sarcina lutea) та грам-негативних (Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enteritidis and Erwinia amylovora) бактерш, а також проти патогешв грибкового походження (Aspergillus niger, Candida albicans, Saccharomyces cerevisiae).
M. Abolfazl i3 ствавторами (Abolfazl et al, 2013) дослЦили дда ефiрно'í олп' та екстраклв рослинно! сировини S. hortensis щодо грам-негативних: Pseudomonas aeruginosa (PTCC: 1430), K. pneumoniae (PTCC: 1053), Escherichia coli (PTCC: 1329), Salmonella typhi (PTCC: 1609) та грам-позитиних бактерш: Staphylococcus aureus (PTCC: 1431), Listeria monocytogenes (PTCC: 1163), Streptococcus pneumonia (PTCC: 1240). Було виявлено бактерицидний ефект S. hortensis проти патогешв S. pneumonia, S. aureus and P. aeruginosa, що може бути використано для отримання еколопчно чистих рослинних бактерицидних лшарських препаратав.
S. Rezvanpanah i3 ствавторами (Rezvanpanah et al, 2011) вiдмiчають пригшчуючий вплив ефiрноí олй' чаберу садового на штами грам-позитивних (Staphylococcus aureus) та грам-негативних бактерш (Escherchia coli). ДослЦження J. Novak i L. Bahoo (Novak et al, 2006) показали, що ефiрна ол1я чаберу садового (М1С/МБС - 40,0 мкг/мл) була активною щодо Helicobacter pylori, тому стало можливим використати li як харчову добавку додатково до основно! терапп.
A. Lahooji, M. Mirabolfathy (Lahooji et al, 2010) вiдмiчали фунгiциднi властивостi ефiрноí олй' чаберу садового. Котюк Л. А. та 1ващенко I. В. (Котюк, 2013) виявили фунпстатичний вплив водного екстракту Satureja hortensis вiдносно фiтопатогенного гриба Fusarium oxysporum при концентращях 70 та 100 мг/мл i фунгщидний - при концентрацп 200 мг/мл.
Протимшробш властивостi чаберу садового свЦчать про доцiльнiсть !х використання для лiкування багатьох хвороб, тому метою наших дослЦжень була оцiнка бюлопчно! активностi його 40 % етанольного екстракту щодо золотистого стаф1локока (Staphylococcus aureus), кишково! палички (Escherichia coli), синьогншно! палички (Pseudomonas aeruginosam) та кандЦи бiлiючоí (Candida albicans), як е патогенними стосовно iнших органiзмiв.
МАТЕР1АЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛ1ДЖЕНЬ
Надземна частина чаберу садового, вирощена в умовах боташчного саду Житомирського нащонального агроекологiчного унiверситету, була вихiдною сировиною для дослiджень. У екпериментах використовували фгтомасу рослин, зiбрану у останню декаду серпня, у фазу цвтння. Сировину подрiбнювали згiдно фармакопейних вимог до розмiрiв 1-1,5 мм. Екстракт S. hortensis був отриманий методом мацерацп повiтряно сухо! трави у 40 % етиловому спирт! у ISSN 2225-5486 (Print), ISSN 2226-9010 (Online). Бiологiчний вкникМДПУ. 2014. №3
-а
й
спiввiдношеннi 1:5, концентращя - 200 мг/мл. Настоювали траву чаберу садового упродовж 7 дiб при TeMnepaTypi 25 оС (Сидоров, 2008).
Нaявнiсть антимтробноИ активносп екстрагованих речовин у склaдi дослЦжуваних речовин визначали шляхом поpiвняння ix М1С ^шмально'^' пригшчуючо! - бактерюстатично!" концентрацй) та МВС/MFC ^шмально'^' бактерицидно']Уфунгщидно1 концентрацй") i3 такими у 40 % етиловому спирта (Методичш вкaзiвки, 2007). Вивчення aнтимiкpобноi aктивностi екстракту S. hortensis здiйснювaли на отриманих i3 Укра1нсько1 колекцп мiкpооpгaнiзмiв (УКМ, 1нститут мiкpобiологii i вipyсологii НАН Украши) тест-культурах мiкpооpгaнiзмiв: Escherichia coli УКМ В-906 (ATCC 25922); Staphylococcus aureus УКМ В-904 (ATCC 25923); Pseudomonas aeruginosa УКМ В-900 (ATCC 9027); Candida albicans УКМ Y-1918 (ATCC 885-653). Вище назван мшрооргашзми е тестовими штамами для визначення антимшробно! дп лiкapськиx зaсобiв (Украинская коллекция, 2010).
Встановлення антимшробно! aктивностi екстракту S. hortensis стосовно тест-культур мiкpооpгaнiзмiв здшснювали згiдно методики щодо визначення чутливосп мiкpооpгaнiзмiв до aнтибaктepiaльниx пpeпapaтiв (Методичш вкaзiвки, 2007). Антимiкpобнy aктивнiсть дослЦжуваних речовин вивчали методом послiдовниx сершних розведень, який передбачае визначення мшмально!" бaктepiостaтичноi (М1С) та мiнiмaльноi бактерицидно! концeнтpaцiй (МВС). Для визначення МВС готували послiдовнi двокpaтнi розведення речовини у редкому поживному сepeдовищi, яку згодом визначали за найменшою концентращею речовини, в присутносп яко! не спостерйали росту культури. Бактерицидну концентращю дослiджyвaниx речовин встановлювали за результатом виаву пpобipок з розведенням на шдльш поживнi середовища.
Отримання добових культур мiкpооpгaнiзмiв здiйснювaли на шдльному поживному сepeдовишi LB (Luria-Bertani medium, Merck, Germany) (Миллер, 1976); приготування робочих суспензш мiкpооpгaнiзмiв, визначення мшмальних iнгiбyючиx концeнтpaцiй (MIC) розведень зразюв дослiджyвaниx eкстpaктiв проводили у рЦкому сepeдовишi LB (Luria-Bertani broth, Merck, Germany). Виав aлiквот дослiдниx i контрольних суспензш для встановлення мшмальних бaктepицидниx/фyнгiцидниx концeнтpaцiй (MBC/MFC) пpeпapaтiв здшснювали на шдльне поживне середовище LB (Luria-Bertani medium, Merck, Germany) у чашки Петрь
Добовi культури мiкpооpгaнiзмiв отримували шляхом ix культивування на шальному поживному сepeдовишi LB протягом 18-24 годин при 37°С. 1з добових культур у 0,9 % розчиш хлориду нaтpiю готували вихдт бaктepiaльнi суспензй за стандартом мутносл 0,5 Од по МакФарланду (титр 1,5*108 КУО/мл). Остaннi розводили редким середовищем LB у спiввiдношeннi 1:100 (по об'ему) i отримували pобочi суспензй мiкpооpгaнiзмiв (Мeтодичнi вкaзiвки, 2007).
114 Бюлопчний eicHHK Щ2 -fe
Хроматографiчний аналiз компонентного складу ефiрноi олп виконували на газорiдинному хроматографi Agilent Technologies 6890 i3 мас-спектрометричним детектором 5973. Умови аналiзу: хроматографiчна колонка - капiлярна DB-5, дiаметром 0,25 мм i завдовжки 30 м. Швидюсть газу-нос1я (гелда) - 2 мл/хв, температура на^вача при введеннi проби - 250°С. Температура термостата з програмуванням вЦ 50 до 320°С 3i швидюстю 4 °/хв. Для Центифшацп компоненпв використовували бiблiотеку мас-спектрiв NIST05 и WILEY 2007 i3 загальною юлькктю спектрiв б1льше 470000 в комплека з програмами для iдентифiкацii AMDIS i NIST (Черногород, Виноградов, 2006).
Результати та ix Обговорення
ДослЦження показали, що внесення до суспензш використаних тест-культур мiкроорганiзмiв 40 % етанолу проявлялось бактерюстатичною актившстю лише у розведеннi 1:2 (табл. 1, Рис. 1, 2). При подальшому розведенш 40 % етанолу пригшчення росту мiкроорганiзмiв у рЦкш культурi не спостерiгали.
Показано, що виав суспензiй навiть iз пробiрок з розведенням 40 % етилового спирту у стввЦношенш 1:2 проявлявся на шальному середовищi ростом мiкроорганiзмiв. Очевидно, що в даному випадку по вiдношенню до вказаних тест-культур мiкроорганiзмiв 40 % етанол характеризуемся лише бактерiостатичною дiею (див. табл. 1).
Таблиця 1. Визначення м^мально!" пригшчуючо!" концентрацН (MIC) 40 % етилового спирту вЦносно тест-культур MiKpOOpraHi3MiB
Тест-культури Наявнiсть росту тест-культури в Наявшсть росту
мiкроорганiзмiв дослiдних варiантах при тест-культури в
вiдповiдному розведенш зразка контрольних
варiантах
1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 +К -К Кс Кз
Escherichia coli УКМ В-- + ++ + + + + -- -906
Staphylococcus aureus - + + + + + + + - - -УКМ В-904
Pseudomonas aeruginosa - + + + + + + + - - -УКМ В-900
Candida albicans УКМ - + + + + + + + - - -Y-1918
Примика: «+» - наявшсть росту культури; «-» - вЦсутшсть росту культури; «+К» -позитивний контроль росту тест-культури; «-К» -негативний контроль росту тест-культури; «Кс» - контроль чистоти середовища; «Кз» -контроль чистоти зразка (у розведеннi 1:2).
А
к, мс 1.-м <чн
fft rV fr «I
ж «<*
J r s* £k S"1" Sr Tfii
f ! ä i ä й a i
3
^ he a
г.?
Я i!
4>
к
■
Б
fM
"SA
■ ■
jbHB-
s
?f
1 - m
-i is
-r
w
i г
i
5
ff i ff а
Рис. 1. Визначення мшмально!" пригшчуючо!" концентрацп (MIC) 40 %
етилового спирту по вЦношенню до тест-культур MiKpoopraHi3MiB: А -Escherichia coli УКМ В-906; Б - Staphylococcus aureus УКМ В-904; В - Pseudomonas aeruginosa УКМ В-900; Г - Candida albicans УКМ Y-1918.
Рис. 2. Визначення мшмально!" бактерицидно1'/фунгщидно1 концентраций (MBC/MFC) 40 % етилового спирту по вЦношенню до тест-культур MiKpoopram3MiB. А - вид ззовш, Б - вид зсередини.
Бактерицидна/фунгiцидна концентрацiя етилового спирту у випадку P. aeruginosa i C. albicans вiдповiдала бактерюстатичнш (табл. 2). Так, при нанесенн зразкiв рЦко'1 культури iз вЦсутшстю видимого росту на шiльне середовище, ркт також був вiдсутнiм. По вЦношенню до E. coli i S. aureus жодне iз використаних розведень спирту не характеризувалось бактерицидним ефектом.
Таблиця 2. Визначення м^мально! бактерицидно1/фунгщидно! концентрацп (MBC/MFC) 40 % етилового спирту вЦносно тест-культур мiкроорганiзмiв_
Тест-культури Наявшсть росту тест-культури на
мiкроорганiзмiв щыьному середовишi при нанесенш
вiдповiдного розведення зразка
1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128
Escherichia coli YKM B-906 + + + + + + +
Staphylococcus aureus YKM B-904 + + + + + + +
Pseudomonas aeruginosa YKM B- - + + + + + +
900
Candida albicans YKM Y-1918 - + + + + + +
Примiтка: «+» - наявнiсть росту культури; «-» - вЦсутшсть росту культури.
Дослiдження довели що чабер садовий характеризувався вираженою антимiкробною актившстю щодо S. aureus (табл. 3, 4; рис. 3, 4). Таблиця 3. Визначення м^мально! пригшчуючо! концентрацп (MIC) Satureja hortensis по вЦношенню до тест-культур мiкроорганiзмiв_
Тест-культури мiкроорганiзмiв
Наявнiсть росту тест-культури в дослЦних варiантах при вiдповiдному розведенш зразка
Наявшсть росту тест-культури в контрольних варiантах
1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 128 +К -К Кс Кз
Escherichia coli YKM B-906 -Staphylococcus aureus -
YKM B-904
Pseudomonas aeruginosa -YKM B-900
Candida albicans YKM Y- -1918
+ + + + + + - - - - + +
+ +
+ + + + + +
+ + + + +
Примика: «+» - наявнiсть росту культури; «-» - вЦсутшсть росту культури; «+К» -позитивний контроль росту тест-культури; «-К» - негативний контроль росту тест-культури; «Кс» - контроль чистоти середовища; «Кз» - контроль чистоти зразка (у розведенш 1:2).
+
+
Екстраговаш речовини у 32 рази пЦвишували показники мшмально!" бактерюстатично!" та у 16 - мшмально!" бактерицидно!" концентрацiй щодо S. aureus. Менш виражений ефект було B^Mi4eHO щодо C. albicans. В даному випадку спостерiгалось лише двократне тдвищення показникiв MIC та MFC. Таблиця 4. Визначення м^мально! бактерицидно1/фунгщидно! концентращ! (MBC/MFC) Satureja hortensis по вЦношенню до тест-культур
MiKpoopraHi3MiB_
Тест-культури мiкроорганiзмiв
Наявнiсть росту тест-культури на щ1льному середовишi при нанесенш
1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128
Escherichia coli YKM B-906 - + + + + + +
Staphylococcus aureus YKM B-904 - - - - + + +
Pseudomonas aeruginosa YKM B- + + + + + + +
900
Candida albicans YKM Y-1918 - - + + + + +
Прим1тка: «+» - наявн1сть росту культури; «-» - вЦсутшсть росту культури.
ill
ш
■
А
I ■<« « i:tt в»|
£ ? ^ г> ( я
Ш W ш -i *1Э £ 1Щ \f\ L г 'Г
Г I
11 ■
11
i
J
Б
1.1 1:«
1,r
<л
1 i i h к jf .-л *
л i I ' * I I *
i 1 1
M
■ И 1 'fcMiLJ
- - • 4
В
-о
Ж
к* t
ИИ n
•81
* -
■ -».
I
с
fl
Ж Я V ä
—^
'-tr-nl
PMC. 3. BM3HaneHH^ MimMa^bHoi npumwyroTOi концентрацГi (MIC) eTaHO^bHoro eKCTpaKTy Satureja hortensis no BigHorneHHro go TecT-Ky^biyp MiKpoopraHi3MiB: A - Escherichia coli YKM B-906; B - Staphylococcus aureus YKM B-904; B - Pseudomonas aeruginosa YKM B-900; r - Candida albicans YKM Y-1918.
По вiдношенню до E. coli компоненти екстракту чаберу садового посилювали y4BÏ4i бактерiостатичний i бактерицидний ефект 40 % етанолу, щодо P. aeruginosa антимшробного впливу вiдмiчено не було.
Рис. 4. Визначення мшмально'1 бактерицидно1Уфунгщидно'1 концентраций (MBC/MFC) Satureja hortensis по вЦношенню до тест-культур мiкроорганiзмiв: Escherichia coli УКМ В-906 i Staphylococcus aureus УКМ В-904 (А - вид ззовш, Б - вид зсередини); Pseudomonas aeruginosa УКМ В-900 i Candida albicans УКМ Y-1918 (В -
вид ззовш, Г - вид зсередини).
Дослiдженнями було встановлено, що 0CH0BHi компоненти ефiрноl олй чаберу садового при культивуванш в умовах Полiсся Украши - це: карвакрол ( 89,07 %), у-тертнен (3,53 %), а-туйон (1,7 %), камфора (1,48 %) (рис.5). Очевидно, високий вмкт карваркролу зумовлюе антимiкробнi властивостi чаберу садового. СлЦ вiдмiтити, що дослiдження сербських учених (Mihajilov-Krstev, 2009) свiдчать про високу антимiкробну активнiсть S. hortensis при 67 % вмкта карвакролу у рослиннш сировинi, що доведено також нашими дослЦженнями (Рис. 5.)
1-октен-3-ол октанол-3 a-тершнен пара-цимен 1,8-цинеол у-тершнен транc-cабiненгiдрат a-туйон ß-туйон камфора тершнен-4-ол карвакрол I евгенол
1,88
89,07
.1,48 .0,91
0,45 0,09 0,38
0,56 0,18
Рис. 5. Компонентний склад ефiрноí олп S. hortensis
Висновки
Таким чином, встановлено антимшробну дда 40 % етанольного екстракту трави чаберу садового стосовно тест-культур мiкроорганiзмiв - Escherichia coli, Staphylococcus aureus та Candida albicans. Стосовно Pseudomonas aeruginosa пригшчуючу дiю екстракту не виявлено.
Ефiрна ол1я S. hortensis, вирощеного в умовах Полкся Укра!ни, характеризуеться високим вмiстом карваркролу ( 89,07 %), що зумовлюе антимшробш властивостi рослини.
Враховуючи результати дослЦжень, бачимо перспективним подальше детальшше вивчення етанольних екстрактiв iз чаберу садового з метою розширення асортименту антибактерiальних та антифунгальних рослинних препаратав.
ISSN 2225-5486 (Print), ISSN 2226-9010 (Online). Бiологiчний вкникМДПУ. 2014. №3
Список Використано! Л1тератури
Котюк, Л.А., 1ващенко, 1.В. (2013). Фунгщидна активнiсть екстраклв ефiроолiйних рослин родини Lamiaceae Lindl. вiдносно Fusarium oxysporum. Бюлопчний вкник МДПУ. Т.3. - №3 (9). - С.70-82.
Методичнi вказiвки «Визначення чутливостi мiкроорганiзмiв до антибактерiальних препаратав» (2007). Наказ МОЗ Украши №167. - [Чинний вЦ 2007-04-05]. К.: МОЗ Украши. 63 с.
Миллер, Д. Эксперименты в молекулярной генетике (1976). Под ред. С. И. Алиханяна. Москва: Мир. - С. 394-395.
Мшарченко, В.М. (2005). Лшарсью судинш рослини Украши (медичне та ресурсне значення). Ки1в: Фiтосоцiоцентр. - С.210.
Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Hippuridaceae-Lobeliaceae. (1991). Отв. ред.П. Д. Соколов. СПб: Наука. - С.83-84.
Сидоров, Ю. I., Губицька, I. I., Конечна, Р. Т., Новшов, В. П. (2008). Екстракщя рослинно! сировини. Навчальний поабник. Львiв: Видавництво Львiвськоi полiтехнiки. - 336 с.
Танская, Ю.В., Клишина, И. И., Попова, О. И.(2008). Исследование антимикробного действия эфирного масла, водного и водно-спиртового извлечений из травы чабера садового (Satureja hortensis L.). Науч. обозрение. №1. - С. 40-43.
Танская, Ю. В., Попова, О.И. (2008). Изучение биологически активных веществ травы чабера садового, культивируемого в условиях Ставропольского края. Фармация из века в век : сб. науч. тр. Часть III. Анализ и стандартизация лекарственных средств. СПб.: Изд-во СПХФА. - С. 151-156.
Украинская коллекция микроорганизмов: Каталог культур (2007). Под ред. В. С. Подгорского, О. И. Коцофляк, Е. А. Киприановой, О. Р. Гвоздяк. К.: Наукова думка. - 270 с.
Черногород, Л.Б., Виноградов, Б.А. (2006). Эфирные масла некоторых видов рода Achillea L., содержащие фрагранол. Растительные ресурсы. Санкт-Петербург. Т.42. Вып. 2. - С. 61 - 68.
Abolfazl, M., Hadi, A., Frhad, M., Hossein, N. (2014). In vitro antibacterial activity and phytochemical analysis of some medicinal plants. Journal of Medicinal Plants Research. Vol. 8(3): 186-194.
Lahooji, A., Mirabolfathy, M., Karami-Osboo, R. (2010). Effect of Zataria multiflora AND Satureja hortensis essential oils, thymol and carvacrol on growth of Fusarium gramineum isolates and deoxynivalenol production. Iran. J. Plant Path. Vol. 46, No. 1,: 11-13.
Mihajilov-Krstev, T., Radnovic, D., Kitic D., Stojanovic-Radic, Z., and Zlatkovic, B. (2009). Antimicrobial activiti of Satureja hortensis L. essential oil against pathogenic microbial strains. Biotechnol. & Biotechnol. Eq., 23(4), 1492-1496.
ISSN 2225-5486 (Print), ISSN 2226-9010 (Online). Бiологiчний вСникМДПУ. 2014. №3
-a
Mohammadhosseini, M., Beiranvand, M. (2013). Chemical Composition of the Essential Oil from the Aerial Parts of Satureja hortensis As a Potent Medical Plant Using Traditional Hydrodistillation. Journal of Chemical Health Risks. 3( 4): 43 - 54. Novak, J., Bahoo, L., Mitteregger, U., Franz C. (2006).Composition of individual essential oil glands of savory (Satureja hortensis L., Lamiaceae) from Syria. Flavour and Fragrance Journal. Volume 21, Issue 4, p. 731-734.
Reichling, J, Schnitzler, P, Suschke, U, Saller, R. (2009). Essential oils of aromatic plants with antibacterial, antifungal, antiviral, and cytotoxic properties-an overview. Forsch Komplementmed. Apr;16(2):79-90.
Rezvanpanah, S., Rezaei, K, Golmakani, M.-T., and Razavi, S. H. (2011). Antibacterial properties and chemical characterization of the essential oils from summer savory extracted by microwave-assisted hydrodistillation. Braz J Microbiol. 42(4): 1453-1462.
References
Kotyuk, L. A., Ivashchenko, I. V. (2013). The fungicidal activity f extracts from oil bearing Lamiaceae Lindl towards Fusarim oxysporum. Biological Bulletin of Bogdan Chmelnitskiy Melitopol State Pedagogical University, 3 (3), 70-82. Methodical instructions 'Determination of the sensibility of microorganisms to antibacterial preparations'(2007). The Order of the Ministry of Health of Ukraine No 167. - [Valid from 2007-04-05]. Kyiv: Ministry of Health of Ukraine.
Miller, D. Experiments in molecular genetics (1976). S.I. Alikhanyan (Ed). Moscow:
Mir Publishers, 394-395. Minarchenko. V.M. (2005). Medicinal vascular plants of Ukraine (medical and resource significance). Kyiv: Phytosociocenter.
122 Бюлопчний в1сник
Plant resources of the USSR: Flowering plants, their chemical composition, utilization; Hippuridaceae-Lobeliaceae families. (1991). P.D. Sokolov (Ed.). St.-Petersburg: Nauka Publishers, 83-84.
Sydorov, Yu.I., Gubytska, I.I., Konechna, R.T., Novikov, V.P. (2008). Extraction of plant raw material. Manual. Lviv: Lviv Politekhnika Publishers.
Tanskaya, Yu.V. ,Klishina, I.I., Popova, O.I. (2008). The study of antimicrobial effect of ethereal oil, water and alcoholic water extraction from the herb of summer savory (Satureja hortensis L.).Scientific Review, 1, 40-43
Tanskaya, Yu.V., Popova, O.I. (2008). The study of biologically active substances of the herb of summer savory cultivated in the Stavropol Territory. Pharmacy from century to century: Proceedings. Part 3. Analysis and standardization of remedies. St.-Petersburg. SPHFA Publishers, 151-156.
The Ukrainian collection of microorganisms: Crop catalogue. (2007). V.S. Podgorsky, O.I. Kotsoflyak, Ye. I. Kiprianova, O.R. Gvozdyak (Eds.). Kyiv: Naukova Dumka Publishers.
Chernogorod L.B., Vinogradov B.A. (2006). Essential oils of some species of the genus Achillea L., containing fragranol. Plant resources. St. Petersburg, 42 (2), 61 - 68.
Abolfazl, M., Hadi, A., Frhad, M., Hossein, N. (2014). In vitro antibacterial activity and phytochemical analysis of some medicinal plants. Journal of Medicinal
Plants Research, 8(3), 186-194.
ISSN 2225-5486 (Print), ISSN 2226-9010 (Online). Бiологiчний вСникМДПУ. 2014. №3
-a
Lahooji, A., Mirabolfathy, M., Karami-Osboo, R. (2010). Effect of Zataria multiflora and Satureja hortensis essential oils, thymol and carvacrol on growth of Fusarium gramineum isolates and deoxynivalenol production. Iran. J. Plant Path., 46 (1), 11-13.
Mihajilov-Krstev, T., Radnovic, D., Kitic D., Stojanovic-Radic, Z., and Zlatkovic, B. (2009). Antimicrobial activiti of Satureja hortensis L. essential oil against pathogenic microbial strains. Biotechnol. & Biotechnol. Eq., 23(4), 1492-1496. Mohammadhosseini, M., Beiranvand, M. (2013). Chemical Composition of the Essential Oil from the Aerial Parts of Satureja hortensis As a Potent Medical Plant Using Traditional Hydrodistillation. Journal of Chemical Health Risks, 3( 4), 43 - 54.
Novak, J., Bahoo, L., Mitteregger, U., Franz C. (2006).Composition of individual essential oil glands of savory (Satureja hortensis L., Lamiaceae) from Syria. Flavour and Fragrance Journal, 21(4), 731-734. Reichling, J, Schnitzler, P, Suschke, U, Saller, R. (2009). Essential oils of aromatic plants with antibacterial, antifungal, antiviral, and cytotoxic properties-an overview. Forsch Komplementmed, 16(2), 79-90. Rezvanpanah, S., Rezaei, K, Golmakani, M.-T., and Razavi, S. H. (2011). Antibacterial properties and chemical characterization of the essential oils from summer savory extracted by microwave-assisted hydrodistillation. Braz J
Microbiol., 42(4), 1453-1462.
ISSN 2225-5486 (Print), ISSN 2226-9010 (Online). BwnoàuHuù eicHUKMffnY. 2014. №3
-fi>
Поступила в редакцию 02.12.2014
Как цитировать:
Котюк, Л. А. (2014). Антимшробна активнiсть етанольного екстракту Satureja hortensis L. проти патогенних штамiв MÍKpoopram3MÍB. Биологический вестник Мелитопольского государственного педагогического университета имени Богдана Хмельницкого, 4 (3), 109-124. cross™* http://dx.doi.org/10.7905/bbmspu.v4i3.898
© Котюк, 2014
Users are permitted to copy, use, distribute, transmit, and display the work publicly and to make and distribute derivative works, in any digital medium for any responsible purpose, subject to proper attribution of authorship.
[mh^m
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 3.0 License.