CC BY
171
УДК 619:616.981.48-08 А.Ш. Алимарданов
АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ И АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ ШТАММОВ ЭШЕРИХИЙ, ЦИРКУЛИРИРУЮЩИХ НА ПТИЦЕФАБРИКАХ
Введение
Систематическое применение антибактериальных препаратов в ветеринарии, часто с профилактической целью, привело в последние годы к распространению антибиотикорезистентных штаммов микроорганизмов. Терапевтическая эффективность антибиотиков, таких как пенициллин, эритромицин, синтомицин и других, резко снизилась, поэтому остро встал вопрос об антибиоти-корезистентности при лечении желудочно-кишечных заболеваний птиц (Бель-ский В.В., 1959; Матвиенко Б.А., Руденко Т.П., 1975; Ежов В.Е., 1978; Ниязов Ф.А., Маркова С.И., 1998; Ния-
зов Ф.А. и др., 2000).
По вопросу о биологическом механизме возникновения лекарственноустойчивых форм микробов в литературе существуют разные мнения. П.Н. Кошкин (1952) рассматривает резистентность к антибактериальным веществам как результат приспособительной изменчивости бактериальных клеток, а Е.Н. Колесова (1981) трактует лекарственную устойчивость как следствие отбора «предшествующих» в каждой микробной популяции спонтанно образовавшихся мутантов.
Материалы и методы
Чувствительность культур кишечной палочки к антибиотикам определяли методом диффузии в агар с использованием бумажных дисков (Меньшиков В.В., 1987), изготовленных Московским заводом медицинских препаратов им.
А.Я. Карпова.
Чтобы определить чувствительность бактерий к антибиотикам, в чашки Петри разливали по 20 мл расплавленного мя-со-пептонного агара (МПА), рН — 7,27,4 и после застывания среды и подсушивания в термостате (1-2 часа) на ее поверхность наслаивали испытуемые культуры — плотностью 1 млрд/1 мл, которые получали путем смыва сте-
рильным физиологическим раствором с твердой питательной среды.
Взвесь бактерий равномерно распределяли при помощи шпателя по всей поверхности среды в чашке. Затем на нее стерильным пинцетом накладывали бумажные диски, пропитанные различными лекарственными препаратами. В каждую чашку вносили по 9 дисков, размещая их примерно на равном расстоянии друг от друга, после чего чашки оставляли на 3 часа при комнатной температуре для преддиффузии антибиотика. После выдерживания в термостате при температуре 37°С, чашки Петри помешали агаром вверх в течение 16-24 часов и учитывали результаты.
Степень чувствительности культур к препаратам определяли по зоне задержки роста микроорганизмов. При наличии зоны задержки роста диаметром более 20 мм культуры относили к высокочувствительным, до 15 мм — к малочувствительным, при отсутствии зоны задержки роста — к устойчивым.
Результаты
В связи с вышеизложенным нами была изучена антибиотикочувствительность выделенных от птиц из Галляаральской птицефабрики 24 патогенных штаммов эше-рихий к следующим антибиотикам: лево-мицетину, полимиксину, гентамицину, не-омицину, тетрациклину, стрептомицину канамицину и мономицину. Все выделенные штаммы Escherichia coli оказались чувствительными к гентамицину, полимик-сину, большинство — к канамицину.
Наименее эффективными были широко используемые в хозяйстве левомице-тин и тетрациклин. Отбор и использование антимикробных препаратов в данном хозяйстве мы проводили после определения чувствительности к ним возбудителя колибактериоза.
Наиболее эффективным методом применения препаратов явился ингаляционный. Для этого использовали струйный аэрозольный генератор (САГ-1),
доза препарата составила 300-500 тыс. ед. на кубический метр объема помещения. Экспозиция — 40-50 минут на протяжении 3 дней подряд, несколько раз с перерывами до прекращения заболевания.
Помимо антибиотиков для лечения колибактериоза птиц применяли сульфаниламидные препараты — фталазол, сульфадимезин и другие. Эффективным также было применение нитрофурано-вых веществ, таких как фуразолидон и фурагин.
Интересным, на наш взгляд, было узнать и изучить степень распространения антибиотикорезистентных штаммов
эшерихий на различных птицефабриках Узбекистана, где регистрируется коли-бактериоз птиц.
Нами были изучены культуры кишечной палочки, отнесенных к серотипам 026, 055,078 и 0111, выделенных от разных объектов — цыплят, эмбрионов-задохликов, животных кормов и кормо-добавок (мясо-костной муки).
Предварительно в лаборатории Уз-НИИВ каждый выделенный штамм-изолят высевался на обычные питательные среды. Для определения патогенности в виварии были заражены белые мыши весом 18-20 г и 15-дневные цыплята. Через 18 и 48 часов зараженные животные пали. От них были реизолиро-ваны исходные культуры. При патологоанатомическом вскрытии цыплят отмечали истощение, бледность и некоторую желтушность слизистых оболочек. На эпикарде и эндокарде — точечные или полосчатые кровоизлияния, в тонком отделе кишечника наблюдали катаральное воспаление. Печень была глинистого цвета и имела серовато-желтые фокусы на поверхности и в разрезе.
Края селезенки были сглажены, реже — закругленные.
Антигенную принадлежность изучаемых штаммов эшерихий устанавливали серологически — постановкой реакции агглютинации с поливалентными и со специфическими ОК-сыворотками. Выделенные на этой птицефабрике штаммы являлись патогенными и относились к серотипам 026, 055, 078 и 0111.
Морфологические, культуральные и биохимические свойства выделенных культур кишечной палочки были типичными для этого вида бактерий.
На Агалыкской птицефабрике у всех выделенных штаммов была определена антибиограмма к следующим препаратам: хлортетрациклину, левомицетину, неомицину, канамицину, полимиксину, гентамицину.
Наиболее эффективно воздействовали на штаммы препараты гентамицин, по-лимиксин и неомицин, а левомицетин и хлортетрациклин практически не оказывали на штаммы никакого воздействия.
Аналогичным образом выделяли штаммы и их всесторонне изучали на других птицефабриках — Каршинской, Касанской и Галляаральской.
На Каршинской и Касанской птицефабриках были проведены исследования для последующего отбора перспективных лекарственных препаратов с целью лечения колибактериоза птиц.
Диагноз на колибактериоз устанавливали на основании эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных и результатов бактериологических исследований. Бактериологические исследования проводили в соответствии с «Наставлением по бактериологической диагностике колибактериоза сельскохозяйственных животных и птиц» (1979 г.).
Для выделения культур кишечной палочки бактериологически исследовали паренхиматозные органы и костный мозг убитых с диагностической целью цыплят 15-25-дневного возраста с симптомами диареи, а также павших в этот период птиц с изменениями, характерными для поражения желудочно-кишечного тракта.
Серогрупповую принадлежность
штаммов определяли в реакции агглютинации, используя набор диагностических агглютинирующих ОК-сывороток, содержащих 5 поливалентных и 24 типоспецифических сывороток (производство Армавирской биофабрики).
При бактериологическом исследовании 126 голов цыплят, павших с присущими колибактериозу признаками, возбудитель болезни был выделен из 21 тушки птиц. Наиболее часто культуры E.coli изолировались из костного мозга и сердца.
Все штаммы изучались по культурально-морфологическим, биохимическим и патогенным свойствам, а также отпределялась их антибиотикочувстви-тельность и антибиотикорезистентность к 11 видам лекарственных препаратов, используемых в этих хозяйствах.
Таблица
Резистентность штаммов эшерихий к лекарственным препаратам, применяемым в птицехозяйствах республики
Название хозяйств - м а т ш ? о S г и о л с и X Хлор- тетрациклин н и т е ц X о в е Л Канамицин Полимиксин Неомицин м а к и т о - и VO т н а к К К 2 к анти-биотикам м а к и т - о и VO X т н а к 3 К
Галляаральская п/ф 12 9 4 0 2 3 10 6 3
Агалыкская п/ф 12 2 3 6 0 1 8 6 3
Каршинская п/ф 16 8 12 4 2 1 12 5 3
Касанская п/ф 10 6 8 6 3 1 8 4 4
Было установлено, что на этих птицефабриках циркулируют штаммы эшерихий, обладающих резистентностью к двум и даже трем препаратам.
В таблице представлены результаты изучения резистентности штаммов эшерихий к антибиотикам.
Исследование чувствительности к антибиотикам штаммов Escherichia coli, выделенных от больных или павших цыплят в птицефабриках, неблагополучных по колибактериозу, показало широкое распространение устойчивых культур.
Выводы
1. Проведенные исследования на 4 птицефабриках по выделению штаммов эшерихий и определению их резистентности к антибиотикам показали, что число резистентных и полирезистентных штаммов продолжает увеличиваться.
2. Малоэффективными становятся давно применяющиеся в хозяйствах препараты: тетрациклин, стрептомицин, не-омицин, фуразолидон.
3. Ни у одного из изученных 50 штаммов эшерихий не выявлена устойчивость к новым препаратам класса це-фалоспоринов.
4. Целесообразно на птицефабриках перед применением лекарственных препаратов проводить определение анти-
биотикочувствительности штаммов- изо-лятов.
5. Не применять в хозяйствах препараты, к которым малочувствительны или устойчивы к возбудителям инфекции.
6. Наиболее перспективным, на наш взгляд, является сочетанное применение препаратов.
Библиографический список
1. Бельский В.В. К вопросу о формировании синтомицинорезистентных вариантов возбудителей дизентерии в органах больных / В.В. Бельский // ЖМЭИ. 1959. № 10. С. 112-117.
2. Ежов В.И. Изучение резистентности к антибиотикам у штаммов E.coli /
B.И. Ежов // Ветеринария. 1978. № 8.
C. 46-47.
3. Исхакова Т.И. Устойчивость к лекарственным веществам у бактерий / Т.И. Исхакова // Ветеринария. 1975. № 6. С. 58-59.
4. Кашкин П.Н. Антибиотики и их
практическое использование /
П.Н. Кашкин. Л., 1952.
5. Колесова Е.Н. Устойчивость к антибактериальным препаратам кишечной палочки, выделенной от больной птицы / Е.Н. Колесова // Промышленное птицеводство и профилактика болезней птиц: сб. науч. тр. Западно-Сибирской ЗОСП. Загорск, 1981. Т. 3. С. 68-70.
6. Коляков Я.Е. Вопросы антибиоти-кочувствительности микробов в ветеринарии / Я.Е. Коляков / / Тр. МВА. Т. 43. С. 21-26.
7. Матвиченко Б.А. Чувствительность кишечной палочки разных серотипов к антибиотикам / Б.А. Матвиченко,
Т.П. Руденко // Ветеринария. 1964. № 1. С. 22-24.
8. Лабораторные методы исследования в клинике: справочник / под ред. проф. В.В. Меньшикова. М., 1987.
9. Ниязов Ф.А. Свойства эшерихий коли птиц / Ф.А. Ниязов, С.И. Маркова // Ветеринария. 1998. № 1. С. 15.
+ + +
