CC BY
18
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XV, № 2, 2019
визуализируются лишь для пациентов № 3 и № 5, имеющих крупные делеции. На дорожках пациентов № 1, № 2, №4 и №6 таковые полосы отсутствуют, что, по-видимому, обусловлено типом мутации, то есть, во всех этих четырех вариантах мутантный аллель отличается от аллеля дикого типа инсерцией 5-ти нуклеоти-дов. Важно отметить, что во всех шести случаях также визуализируются дополнительные полосы выше фрагмента дикого типа, соответствующие гетеродуплексам, образованным сочетанием фрагментов дикого и мутантного типов аллелей. Таким образом, использование
метода гетеродуплексного анализа с последующим электрофорезом в ПААГ позволило выявить мутации в 9 экзоне гена CALR во всех выбранных образцах ДНК.
Выводы. Предлагаемый вариант гетеродуплексного анализа с детекцией в ПААГ может быть рекомендован к использованию как скри-нинговый тест, предшествующий секвенирова-нию. Двухэтапный подход позволяет оптимизировать алгоритм и повысить эффективность тестирования пациентов с подозрением на мутации в 9 экзоне гена CALR.
С. А. Таирова, О. В. Березина, В. С. Овчинников, Т. И. Поспелова
Федеральное государственное образовательное учреждение высшего образования «Новосибирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Новосибирск Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Городская клиническая больница № 2, Новосибирск.
АНАЛИЗ ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ВАРИАНТАХ ОСТРОГО МИЕЛОБЛАСТНОГО ЛЕЙКОЗА
Введение. Генетические аномалии играют основную роль в патогенезе острых лейкозов, а также определяют морфологические и иммунологические особенности опухолевых клеток.
Цель. Изучить структуру хромосомных аберраций (ХА) при различных морфологических вариантах острого миелобластного лейкоза (ОМЛ) у больных г. Новосибирска и Новосибирской области.
Материалы и методы. В лаборатории Городского гематологического центра г. Новосибирска за период с 2014 по 2018 гг. обследовано 111 пациентов города и области с впервые выявленным ОМЛ. Средний возраст больных составил 47 лет (от 16 до 78). Из них 48 мужчин (43,2 %), 63 женщины (56,8 %). Всем пациентам проведены стандартные цитогенетические исследования (СЦИ), изучены данные морфологического исследования и проточной цитометрии. У 104 больных (93,7 %) СЦИ были дополнены флюоресцентной гибридизацией in situ (FISH). Использовались следующие ДНК-пробы: Break Apart Probe — MLL(11q23.3), EVI1(3q26.2), E2A(19q13.3) (Cytocell), RARA(17q21), JAK2(9p24) (Kreatech), Translocation Probe — BCR/ABL t(9;22), AML1/ETO t(8;21), CBFB/ MYH11 t(16;16), PML/RARa t(15;17) (Cytocell), KMT2A/MLLT3 t(9;11), DEK/NUP214 t(6;9) (Kreatech), Deletion Probe — Del(5q), Del(7q),
P53 (Cytocell), Satellite Ennumeration Probe — Yq12, D8Z1 (Kreatech).
Результаты. Самую многочисленную группу составили ОМЛ с минимальными признаками миелоидной дифференцировки бластов — 24 человека (21,6 %). ХА выявлены у 9 человек (37,5 %): i(17q) в 2-х случаях, inv(16), +8, t(8;21) (q21; q22), add(9q),—7/del(7q), del(5q) у 2 пациентов в составе комплексного кариотипа, гипер-диплоидия, дополнительные локусы генов MLL, EVI1, BCR, ABL1, TAS2R1, EGR1 (выявлены только при FISH-исследовании). Больных с ОМЛ с миелоидной линейной направленностью без признаков созревания бластов — 17 человек (15,3 %). Из них аномалии выявлены у 10 пациентов (58,8%): inv(16),—17/del(17p) у 2 больных, t(8;21)(q21; q22), +11/11q по 2 случая,—7/del(7q), del(5q) по 4 случая, дополнительные локусы гена MLL, комплексный кариотип у 3 человек. У одного пациента делеция длинного плеча хромосомы 5 выявлена только при FISH-исследовании. В группе ОМЛ с созреванием 16 человек (14,4 %). Аберрации выявлены у 10 больных (62,5 %): +8 (4 случая, в одном из них выявлена только при FISH-исследовании), -X, inv(3)(q21q26), t(8;21) (q21; q22) у двоих пациентов, del(2q), del(9) (q22), +22,—7, del(7q), комплексный кариотип у 2 человек. С промиелоцитарным вариантом ОМЛ обследовано 15 больных (13,5 %). При СЦИ t(15;17)(q24; q21) обнаружена у 13 пациентов,
VВсероссийская научно-практическая конференция с международным участием «ГЕНЕТИКА ОПУХОЛЕЙ КРОВЕТВОРНОЙ СИСТЕМЫ -ОТ ДИАГНОСТИКИ К ТЕРАПИИ»
в двух случаях поломка выявлена только при FISH-исследовании. У одного больного в транслокации участвует изохромосома 17, другие дополнительные аберрации обнаружены у 4 человек: +8 (2 случая), +21,—22. В группу с ми-еломонобластным вариантом острого лейкоза вошли 17 человек (15,3 %). ХА выявлены у 11 пациентов (64,7%): t(8;21)(q21; q22) в сочетании с другими поломками (-Y и del(9)(q22)), 4 сверхчисленных хромосомы 8, inv(3)(q21q26), del(5q) в 2-х случаях, del(16)(q22), del(17p), перестройки MLL у 3 человек (в одном случае подтверждена FISH t(9;11)(q21-22; q23)), дополнительные локусы гена MLL у 2 пациентов, отсутствие локуса гена E2A(19q13.3), у одного человека комплексный гиподиплоидный кариотип. В трех случаях поломки выявлены только при FISH-исследовании. В группе ОМЛ с моноцитарной линейной направленностью 19 человек (17,1 %). Аберрации выявлены у 12 пациентов: t(9;11)(q21-22; q23) в 2-х случаях, у 3 больных перестройки локуса гена MLL, выявленные только при FISH-исследовании, del(11)(q23), +8 в сочетании с другими аберрациями, del(5q) в составе комплексного кариотипа. В группе ОМЛ с мегакариоцитарной направленностью бластов 3 пациента (2,7 %). У всех комплекс-
Санкт-Петербург 26-27 апреля 2019 г.
ные изменения кариотипа с гиподиплоидией (del(5q),—17/del(17p) и другие ХА).
Выводы. Распределение некоторых наиболее значимых хромосомных аберраций среди морфологических вариантов ОМЛ отличается от среднестатистического. Так, транслокация t(8;21)(q21; q22), наиболее характерная для ОМЛ с созреванием, была выявлена с одинаковой частотой среди пациентов с миелоидной направленностью без созревания, с созреванием и с миеломонобластным вариантом. inv(16) обнаружена в группе с минимальными признаками миелоидной дифференцировки, с миелоидной направленностью без созревания, хотя считается наиболее специфичной для миело-монобластного варианта. Перестройки 11q23 чаще всего были выявлены в группе пациентов с моноцитарной линейной направленностью, что соответствует среднестатистическим показателям. Трисомия 8 чаще встречалась у пациентов с миелоидной направленностью с созреванием. Делеции 5q, 7q, 17p с наибольшей частотой обнаружены при ОМЛ без созревания. Комбинация стандартного цитогенетического исследования и флюоресцентной гибридизации in situ (FISH) позволяет чаще выявлять цитогенетические аберрации.
Е. В. Трегубова, В. А. Овсепян, М. В. Сарпова, А. С. Лучинин
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства», г. Киров
АССОЦИАЦИЯ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА CYP1B1 С РИСКОМ РАЗВИТИЯ ХРОНИЧЕСКОГО МИЕЛОИДНОГО ЛЕЙКОЗА
Введение. Известно, что некоторые структурные варианты генов ферментов надсемей-ства цитохрома Р450 играют роль в развитии ряда опухолевых заболеваний, в том числе ге-мобластозов. Одним из ключевых ферментов указанного надсемейства, участвующих в первой фазе метаболизма многих ксенобиотиков, является CYP1B1. При окислении ксенобиотиков в данной фазе образуются активные промежуточные метаболиты, некоторые из которых могут оказаться мутагенами и канцерогенами, способными вызвать повреждение ДНК. Кроме того, CYP1B1 может действовать как опухоль-су-прессорная (антилейкемическая) гидроксилаза путем биоактивации нетоксичных пищевых компонентов (например, таких как ресвера-трол), превращая их в вещества, ингибирующих
рост клеток. Известно, что полиморфный локус Leu432Val гена CYP1B1, расположенный в экзоне 3 и кодирующий гем-связывающий домен одноименного фермента, связан с изменением его каталитической активности: замена Leu на Val в положении 432 повышает активность данного фермента. В настоящее время обсуждается прогностическое значение полиморфного статуса гена CYP1B1 в развитии и течении хронического миелоидного лейкоза (ХМЛ), однако роль отдельных аллельных вариантов этого гена при данном заболевании изучена недостаточно.
Цель. Изучение возможности ассоциации полиморфного локуса Leu432Val гена CYP1B1 с риском развития ХМЛ.
Материалы и методы. В исследование включены 64 больных ХМЛ (35 (54,7 %) мужчин и 29
