УДК 615.074-322
Т.С. серебрянская, Г.Г. Николаева
анализ свободных Аминокислот водного извлечения композиции лекарственных растений, обладающей нейропротекторным действием
Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН (Улан-Удэ)
Был проведен качественный и количественный анализ свободных аминокислот в водном извлечении разработанной композиции лекарственных растений, обладающей, нейропротекторной активностью.
Ключевые слова: растительное нейропротекторное средство, свободные аминокислоты, качественный и количественный анализ
THE ANALYsis oF FREE AMiNo AciDs oF wATER ExTRAcTIoN of herbal composition with neuroprotective action
T.S. Serebryanskaya, G.G. Nikolayeva
Institute of general and experimental biology SB RAS, Ulan-Ude
The qualitative and quantitative analysis of free amino acids in water extraction of the developed, herbal composition having neuroprotective activity was carried out.
Key words: vegetative neuroprotective drugs, free amino acids, the qualitative and quantitative analysis
Нами разработана композиция лекарственных растений, обладающая нейропротекторным действием. В качестве основы для ее составления был положен комплексный подход лечения и профилактики острых и хронических нарушений мозгового кровообращения. В состав композиции входят девять растений, семь из которых являются официнальными лекарственными растениями. Это боярышник кроваво-красный Crataegus sanguine Pall., календула лекарственная Calendula officinalis L., облепиха крушиновидная Hippophae rham-noides L., солодка уральская Glycyrrhiza uralensis Fisch., черника обыкновенная Vaccinium myrtil-lus L., шиповник собачий Rosa canina L., шлемник байкальский Scutellaria baicalensis Georgi. На два растения, входящие в состав композиции, имеются технические условия. Это астрагал перепончатый Astragalus membranaceus (Fisch.) Bunge и солянка холмовая Salsola collina Pall. При составлении композиции были использованы части растений различных морфологических групп: соцветия, плоды, трава, побеги, корневища и корни.
По данным литературы, все перечисленные растения содержат в своем составе большое количество биологически активных веществ, в том числе аминокислот [1—5, 7—11].
Аминокислоты являются одной из самых важных групп биологически активных веществ с точки зрения их применения для лечения и профилактики болезней нервной системы, в том числе острых и хронических нарушений мозгового кровообращения [6, 12].
Целью настоящей работы являлось качественное и количественное определение состава свободных аминокислот водного извлечения представленной композиции лекарственных растений.
методика
Анализ на свободные аминокислоты проводили на аминокислотном анализаторе марки ААА-339 (Чехия).
Образец для анализа: 1 г композиции. Извлечение проводилось водой очищенной при температуре 100 °С. Методика определения свободных аминокислот на аминокислотном анализаторе: стандартная.
Подготовка образца для анализа включала: исчерпывающую экстракцию водой очищенной, обработку хлороформом (с целью извлечения липидов и гидрофобных пигментов); осаждение полисахаридов двойным количеством спирта этилового 96%, удаление осадка центрифугированием и концентрирование водного извлечения в вакууме. Сухие остатки (точные навески) растворяли в цитрат-литиевом буфере (рН 2.2) в объеме, определяемом в зависимости от концентрации аминокислот.
результаты
Результаты эксперимента представлены в виде таблицы 1 и рисунка 1.
выводы
В результате проведенной работы установлено, что в водном извлечении разработанной композиции содержатся: аланин, кислота альфа-аминомасляная, кислота гамма-аминомасляная, аргинин, аспарагин, кислота аспарагиновая, валин, гистидин, глицин, глютамин, кислота глютаминовая, лейцин, изолейцин, лизин, метионин, орнитин, серин, таурин, тирозин, треонин, фенилаланин, цистеин, цистин, этаноламин. Не обнаружены: аргинин, бета-
Таблица 1
Результаты анализавлияния водногоизвлечения композиции,обладающей нейропротекторным действием
на содержание свободных аминокислот
Наименование аминокислоты Содержание
нмоль/1 г мг/1 г % от общего количества
цистеиновая кислота 153,85 0,028801 0,590561
таурин 950,81 0,118946 2,438973
фосфоэтаноламин - - -
мочевина - - -
аспарагиновая кислота 211,54 0,028156 0,577335
гидроксипролин - - -
треонин 161,73 0,019262 0,394965
серин 65,14 0,006846 0,140376
аспаргин 3734,81 0,560968 11,502579
глютаминовая кислота 7114,89 1,047312 21,475002
глютамин 3131,09 0,457765 9,386414
альфа-аминоадипиновая кислота - - -
пролин - - -
глицин 1603,64 0,120433 2,469464
аланин 114,24 0,010179 0,208719
цитруллин - - -
альфа-аминомаслянная кислота 2177,08 0,224449 4,602299
валин 937,50 0,109781 2,251046
цистин 568,18 0,136534 2,799613
метионин 642,78 0,095903 1,966479
цистатионин - - -
изолейцин 571,33 0,074958 1,537004
лейцин 256,67 0,033675 0,690502
тирозин 307,69 0,055753 1,143208
фенилаланин 637,07 0,103524 2,122747
бета-аланин - - -
бета-аминоизомаслянная кислота - - -
гамма-аминомаслянная кислота 3096,71 0,319271 6,546612
этаноламин 57,47 0,005609 0,115012
орнитин 66,67 0,011241 0,230495
лизин 482,95 0,088235 1,809248
гистидин 982,14 0,205857 4,221072
триптофан - - -
1-метилгистидин - - -
3-метилгистидин - - -
карнозин - - -
аргинин 5817,63 1,013431 20,780276
аланин, кислота альфа-аминоадипиновая,кис-лотабета-ам иноизомасляная, 1-метилги стидин, 3-метилгистидин, карнозин, мочевина, пролин, гидроксипролин, триптофан, фосфоэтаноламин, цистатионин, цитруллин.
Определяющими биологическоедействие композиции являются: кислота глютаминовая — 21,48 %, аргинин — 20,78 %, аспарагин — 11,50 %, глютамин — 9,39 %, гамма-аминомасляная кислота — 6,55 %, альфа-аминомасляная кислота — 4,60 %, гистидин — 4,22 %.
рис. 1. Содержание свободных аминокислот в водном извлечении композиции.
литература
1. Атлас лекарственных растений России / под общ. ред. В.А. Быкова. — М., 2006. — 351 с.
2. Ладынина Е.А. Фитотерапия / Е.А. Ладынина, Р.С. Морозова. — Л. : Медицина, 1987. — 208 с.
3. Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия: учеб. пособие / под ред. Г.П. Яковлева, К.Ф. Блиновой. — СПб. : СпецЛит, 2004. — 765 с.
4. Лекарственное сырье растительного и животного происхождения. Фармакогнозия: учеб. пособие / под ред. Г.П. Яковлева. — СПб. : СпецЛит, 2006. - 845 с.
5. Лекарственные растения. Справочное пособие / под ред. Н.И. Гринкевич. — М. : Высшая школа, 1991. — 397 с.
6. Намгасараева Г.Т. Фитотерапия начальных форм хронической недостаточности мозгового кровообращения / Г.Т. Намгасараева, С.М. Николаев. — Улан-Удэ, 2003. — 176 с.
7. Почему растения лечат / М.Я. Ловкова [и др.]. — М. : Наука, 1990. — 256 с.
сведения об авторах
8. Растительные лекарственные средства / Н.П. Максютина [и др.] ; под ред. Н.П. Максюти-ной. — Киев: Здоров'я, 1985. — 280 с.
9. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Paeoniaceae — Thymelaeaceae. — Л. : Наука, 1985. - С. 155-156.
10. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Hydrangeaceae — Haloragaceae. — Л. : Наука, 1985. — 336 с.
11. Солодка: биоразнообразие, химия, применение в медицине / Г.А. Толстиков [и др.]; Новосибирский ин-т органической химии им. Н.Н. Ворожцова СО РАН. — Новосибирск : Академическое издательство «Гео», 2007. — 311 с.
12. Федеральный реестр биологически активных добавок к пище. — Министерство здравоохранения Российской Федерации. Департамент государственного санитарно-эпидемиологического надзора. — М., 2000. — С. 141 — 160.
Серебрянская Татьяна Степановна - аспирант лаборатории медико-биологических исследований Института общей и экспериментальной биологии СО РАН (670047, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой 6; тел.: 8 (902) 562-00-91)
Николаева Галина Григорьевна - ведущий научный сотрудник, д.фарм.н., 670047, г. Улан-Удэ, ул. М. Сахьяновой, д. 6, ИОЭБ СО РАН, лаб. мед.-биол. исследований