CC BY
34
315 нм* А 355 нм О ~405нм ^^^455 нм 505 нм ^<~555нм |
Рис 1. Динамика оптической плотности глаза в зависимости от давности наступления смерти
видного тела, соответственно сопровождаются изменениями его биофизических свойств.
Нами проведено исследование оптической плотности стекловидного тела на фотометре КФК-3. Для этого изымались глазные яблоки трупов обоих полов всех возрастных групп. Во всех случаях точно фиксировалось время смерти и
условия хранения трупов, в частности температура окружающей среды. Забор глазных яблок проводился в сроки от 12 до 24 часов с момента наступления смерти.
В среднем общее количество стекловидного тела в глазном яблоке составляет 2-2,5 мл. Жидкость получали в объеме 0,3 мл путем пункции глазного яблока. Полученную жидкость помещали в кювету 1,040. Оптическую плотность оценивали по отношению к изотоническому раствору №010,9%.
Повторные исследования проводились через каждые 24 часа в течении 5 суток при диапазоне волн от 315 до 555 нм. Предварительные результаты исследования представлены на рисунке 1.
Как следует из представленного на рисунке 1 графика, на протяжении первых двух суток после смерти происходит значительное изменение оптической плотности стекловидного тела, с относительной стабилизацией показателей на 3-й день.
В дальнейшем изменение оптической плотности фиксируется только на волнах большей длины (455, 505 и 555 нм). Таким образом, выявленные нами закономерности позволяют считать метод измерения оптической плотности стекловидного тела глаза перспективным в плане решения вопроса установления давности смерти.
Литература
1.Витер В.И., Куликов В.А. Современные состояния и направления развития теплового метода определения давности наступления смерти // Проблемы экспертизы в медицине. "Экспертиза", 2001,№ 3 - С.3-9.
2.КилъдюшовЕ.И, Буромский И.В. О путях дальнейшего повышения точности установления давности наступления смерти по результатам ректальной термометрии //Проблемы экспертизы в медицине. "Экспертиза", 2002,№2 - С.20-22.
© И.А. Казакова, 2004 УДК 616.6
И.А. Казакова
АНАЛИЗ СОСТОЯНИЯ ЭРИТРОЦИТАРНЫХ МЕМБРАН У БОЛЬНЫХХРОНИЧЕСКОЙ ПОЧЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТЬЮ ПРИ СИНДРОМЕ ИНСУЛИНОРЕЗИСТЕНТНОСТИ
Кафедра внутренних болезней (зав. кафедрой - профессор В.В. Трусов)
Ижевской государственной медицинской академии
С целью расшифровки причин развития инсулинорезистентности, которая выражена в терминальную стадию ХПН, у вольный, с измененным пероральным тестом толерантности к глюкозе и гиперинсулинемией изучено состояние инсулиновых рецепторов (радиоиммунологический метод). В качестве модели использованы плазматические мембраны эритроцитов (здоровых лиц и больных ХПН).
Ключевые слова: хроническая почечная недостаточность, инсулиновые рецепторы.
I. A. Kazakova
ANALYSIS OF THE ERYTHROCYTE MEMBRANE CONDITION IN PATIENTS WITH CHRONIC RENAL INSUFFICIENCYAND SYNDROME OF INSULINRESISTANCE
Izhevsk
To give interpretation of causes of the insulinresistance development inpatients with the terminal stage of chronic renal insufficiency (CRI),defective oral test of glucose tolerance and hyperinsulinaemia we studied insulin receptors condition (radioimmuno-logical method). The model of our investigation was the erythrocyte membrane.
Key words: chronic renal insufficiency,insulin receptors.
В современной литературе под инсулинорезистентно- лили ИР при неэндокринных заболеваниях, и в частности
стью (ИР) понимают снижение реакции инсулинчувстви- при хронической почечной недостаточности (ХПН).
тельных тканей на инсулин при его достаточной концент- В настоящее время, преимущественно экспериментальны-
рации [1,5,6]. Проблема ИР в контексте нарушения угле- ми исследованиями, установлено,чтоосновнаялокализация ИР
водного обмена у больных хронической почечной недо- при уремии отмечается на периферии, ауровень локализации
статочностью практически не изучена. Этому вопросу дефектаинсулиновые рецепторы тканей [10,11,16,18]. Так,по
посвящены отдельные исследования и сообщения мнению ряда авторов уменьшение числа инсулиновых ре-
[4,8,10,16,20]. Вместе с тем, М.И. Балаболкин и соавт. [2,3] цепторов при уремии ответственно за резистентность ткав этиологической классификации ИР при заболеваниях, ней к инсулину, что приводит к одновременному увеличе-
сопровождающимся нарушением обмена веществ, выде- нию уровня инсулина и сахара в крови [13,14,19,20]. Другие
Таблица 1
Динамика перорального теста толерантности к глюкозе, секреции ИРИ у больныхтерминальной уремией, получающих заместительное лечение программным гемодиализом
Клиническая группа Содержание сахара в крови ммоль/л
Концентрация ИРИ в крови (МКЕд/мл)
Натощак После приема глюкозы
60 минг 120 мин
Здоровые лица п=30 3.95±0.05 8,50±0,31 5.4±0.12 23,80±1,3 3.8±0.06 12,54±0,25
ХПН терминальная стадия до лечения гемодиализом п=48 5.82±0.20*** 14,80±1,42*** 7.67±0.30*** 64,40±46,5*** 7.11±0.35*** 60,88±6,22***
ХПН терминальная стадия, лечение гемодиализом в течение 6 месяцев п=48 *5.06±0.22 *18,87±1,48 *6.77±0.24 56,62±3,38 6.33±0.21 *47,00±3,08
Примечание: *** - р<0.01; *р<0,05; знак* справа- р посравнению со здоровыми лицами, слева - по сравнению с исходными данными
высказываются только о снижении «сродства - аффинитета» рецепторов инсулина при неизмененном общем числе [12,18]. В связи с этим, целью настоящего исследованияяви-лось изучение параметров инсулин-рецепторного взаимодей-ствияу больных хронической почечной недостаточностью при синдроме ИР, а также влияние программного гемодиализа на соответствующие показатели.
Всего обследовано 48 больных с впервые выявленной терминальной стадией XПH (СКФ по пробе Реберга-Тарее-ва 10,2±0,5 мл/мин, креатинин крови 0,82±0,03 ммоль/л), в возрасте от 20 до 42 лет (мужчин - 36, женщин - 12). XПH явилась следствием различных клинико-мофрологических вариантах хронического гломерулонефрита. Всем пациентам кроме стандартного нефрологического обследования в условиях стационара проводился пероральный тест толерантности к глюкозе (ПТТГ), с определением уровня глюкозы в капиллярнойкровииплазме натощак. Уровень иммуноре-активного инсулина определяли радиологическим методом с помощью стандартных тест наборов (Белорусия). Индекс инсулинорезистентности определяли по данным расчетного показателя (HOMA) по формуле:
IR HOMA(у.е.) = инсулин плазмы крови натощак(мкед / мл) x глюкоза плазмы крови натощак(ммоль/ л) 22,5
За пороговое значение ИР принимали IR HOMA ?2,77 [7,17]. Рецепторное связывание инсулина исследовали методом [13,15], используя в качестве модели плазматические мембраны эритроцитов. Расчет характеристик мембранных рецепторов эритроцитов производили с помощью графика Скэтчарда. Данные скэтчардовского анализа интерпретировались по теории гетерогенных рецепторных связей, определяли значения размерности - количества рецепторов (R0), аффинитета сродства (Кс), а также максимальный процент связывания инсулина эритроцитами. Вариационно-статистическая обработка включала определение средней арифметической и ее ошибки (M, m), среднего квадратичного отклонения межгрупповых различий по критерию Стьюден-та. Статическая обработка данных проводилась с использованием программы Microsoft Exsel 2000.
При анализе результатов исследования было выявлено изменение ПТТГ у 29 (60,4%) больных. Это проявлялось "изогликемическими - плоскими сахарными кривых"
Таблица 2
Уровень инсулина, глюкозы индекса инсулинорезистентности, параметров инсулинрецепторного взаимодействия у больных с уремией с нарушенным тестом толерантности к глюкозе (М±ш)
^Показатели Группа \ Глюкоза плазмы крови натощак (ммоль/ л) Инсулин натощак МКЕд/мл Индекс НОМА IR у.е. Максимальный % специфического связывания 125-1 инсулина эритроцитами Концентрация рецепторов на клетку Сродство аф-фин-ность рецепторов Ксх107 м
Здоровые лица п=10 <6,1 8,5±0,31 <2,77 8,73±1,03 564,0±27,7 4,40±0,85
ХПН терминальная стадия стадия до лечения гемодиализом п=15 Р1 6,96±0,15 22,56±1,83 *** 6,96±0,62 4,77±0,81 325,0±36,6 3,83±0,40 Н.Д.
ХПН терминальная стадия, лечение гемодиализом в течение 6 месяцев п=15 Р2 6,31±0,11 ** 17,68±1,08 * 5,24±0,42 * 7,51±0,97 * 457,5±38,0 * 4,03±0,31 Н.Д.
Примечание: Р1 - статистически достоверная разница по сравнению с здоровыми лицами, Р2 - по сравнению с исходными данными (* - р<0,05, ** - р<0,01,*** - р<0,001).
(29,1%), нарушенной гликемией натощак и нарушенной толерантностью к глюкозе (27,1%), "псевдодиабетически-ми сахарными кривыми" (4,2%). Установлен преимущественно торпидный тип секреции инсулина (68,7%), у 11 (22,9%) больных кривая ИРИ имела гипесекреторный тип, у 2 (4,2%) нормальный и у 2 (4,2%) извращенный.
Проанализировав в совокупности значения индексов ИР, показателейтощаковой инсулинемииигликемии тестом толерантности к глюкозе у больных с нарушениями, выявлялась гиперинсулинемия с высокой ИР и гипергликемией табл. № 2.
С целью расшифровки причин развития ИР в этой группе больных исследованы параметры инсулин-резис-торного взаимодействия (табл № 2).
Как следует из представленной таблицы №2, процент специфично связанного инсулина с мембранами эритроцитов у больных с терминальной стадией ХПН был в 1,8 раза меньше данных контрольной группы (р<0,01). Количество рецепторных связывающих мест инсулина на одну клетку было на 42,4% ниже, чем в контроле (р<0,001). Константа сродства значительно не отличалась от данных контрольной группы (р>0,05).
Проанализирована динамика углеводного обмена, синдромов гиперинсулинемии, ИР и параметров инсулин-ре-цепторного взаимодействия через 6 месяцев от начала диализной терапии. Заместительное лечение программным гемодиализом (аппараты "искусственная почка", фирмы "Бгезешш- 2008А, 4008 В") в течение первых 6 месяцев у большинства больных (62,5%) приводило к снижению уровня сахара натощак, постнагрузочной гипергликемии и реактивной гиперинсулинемии (табл. №2). Выраженная динамика определялась по индексу ГО. - НОМА, который уменьшился в 1,3 раза (р<0,05). Процент специфично связанного инсулина со своими связывающими местами на
мембране эритроцитов увеличился более чем в 1,5 раза (р<0,05), концентрация рецепторов возросла на 40,8%
(р<0,05). Константа сродства-аффиности не имела достоверных изменений (табл. ).
Таким образом, полученные нами данные позволяют утверждать, что ХПН отчетливо и достоверно изменяет углеводный обмен (нарушенная гликемия натощак, нарушенная толерантность к глюкозе). Наиболее типичными для терминальной стадии ХПН являются синдромы гиперинсулинемии и ИР. Одна из основных причин развития ИР - нарушениеинсулин-рецепторного взаимодействия, за счет уменьшения количества инсулиновых рецепторов и максимального процента специфического связывания инсулина мембранами эритроцитов. Программный Литература
1. Аметов А.С. Инсулиносекреция и инсулинорезистентность: две стороны одной медали/ АС. Аметов // Пробл. Эндокринологии. - 2002. - № 3. - С. 31-37.
2. Балаболкин М.И. Дифференциальная диагностика и лечение эндокринных заболеваний/М. И. Балаболкин, Е.М Клебанова, В.М. Кременская.
- М: Медицина, 2002. - С. 345-460.
3. Балаболкин М.И. Этиология и патогенез сахарного диабета 2 типа/М.И. Балаболкин, Клебанова Е.М, Майоров АЮ, Анциферова М.Б. // Сахарный диабет. М.: Универсум Паблишинг, 2003. - С. 133-150.
4. Бреннер Б.М. Хроническая почечная недостаточность/Барри М. Бреннер, ДжМайкл Лазарус// Внутренние болезни. - М.: Медицина, 1995. -т. 6,- С. 247-261.
5. Бутрова С.А Метаболический синдром // СА. Бутрова // Сахарный диабет. - М.: Универсум Паблишинг, 2003. - С. 304-318.
6. Дедов И.И. Введение в диабетологию /И.И. Дедов, В.В. Фадеев. - М.: Издательство Берег, 1998. - С. 31-40.
7. Кабалава Ж.Д. Метаболический синдром: современные представления/Ж.Д. Кабалава // Современные проблемы артериальной гипертонии.
- Solvay Pharma, 2003 - Выпуск 3. - С. 6-23.
8. Николаев АЮ. Лечениепочечнойнедостаточности/А.Ю. Николаев, Ю.С. Милованов. - М.: Медицинское информационное агентство, 1999.
- С. 69-79.
9. Смирнов АВ. Нарушения липидного и углеводного обмена при нефрологическом синдроме/ А.В. Смирнов, АД. Кожевников //Нефрологический синдром. - Санкт-Петербург: Гиппократ, 1992. - С. 196-215.
10. Смит Д. Инсулин, глюкагон, тиреоидные гормоны / Д. Смит, Р.А Де Фронцо // Почечная эндокринология. - М.: Медицина, 1987. - С. 481-559.
11. CovianM. Molecular mechanisms of insulin resistance/MiquelR Covian // Bras. J. Med. And Biol. - 1999. - Vol. 27. - N4. - C. 941-957.
12. Davidson M.B. Clinical implications of insulin resistante syndromes / M.B. Davidson // Am. J. Med. -1995. - Vol. 99. -N 5. - P. 420-426.
13. Decreased Erythcocyte Insul in receptor Binding in Diabetic man with chronic renal failure // Gamhir K.K.Nerurkar S. G,Cruz J.A,Hosten A O. // Horm. Metab. Res. -1980. - Vol. 12 -N8.-P. 414-415.
14. Дзинкотосэкикэнкюсайкайси/Nahamura Yoshio,NishiokaHitoshi,KanatsumaTokakiroetal/J.Jap. Soc.Dialysis Therm. -1983. - Vol. 16. -N5.-P. 273-279.
15. Erythcocyte insulin receptors in chronic renal failure / K.K. GambhirJ.A ArcherS.Y. Nerurkar et al // Nephron -1981. - Vol. 28. -N. 1. - P. 4-10.
16. Ferranini E. Insulin resistance versus insulin deficiency in non-insulin dependent diabetes meUitus phoblems and prospects / E Ferranini // Endocrine Rev. -1998. - Vol. 19. -N.4.- P. 477-490/
17. HOMA. - estimated insul in resistance is an independent predictor of cardiovascular disease in type 2 diabetc subjects / E. Bonora,G. FormentiniE. Calcaterra et al // Dioabetes Care. - 2002. - V. 25. - N. 6. - P. 1135-1141.
18. Hoshiyma Sh. Effect of hemodialysis on insulin recetor binding of erythrocytes in diabetic or non-diabetic renal failure patientns/ Sh. Hoshiyma // J. Jap. Diabet Soc. -1989. - Vol. 32. - N. 12. - P. 892-894.
19. Insulin resistance in adult PKD / K. Varee Sangthip,Thomas T.H.,TongP. et al. // Kidney International. -1997. - Vol. 53. - N. 3. - P. 505-507.
20. MollerD.E. Insulin resistance - mechanismsyndromes,and implications /D.E. MollerJ. Flier//N. Engl. J. Med. -1991. - V. 26. - N. 5. - P. 938-948.
гемодиализ в течение первых 6 месяцев у большинства больных способствовал улучшению углеводного обмена, уменьшению степени ИР. Специфический механизм коррекции ИР - это улучшение параметров гормон-рецепторного взаимодействия. Одной из главных причин положительной динамики параметров инсулин-рецепторного взаимодействия можно предположить "очистку" эритроцитарных мембран от уремических субстанций, токсически воздействую-щихна мембрану, которые препятствовали связыванию гормонов с рецепторами, уменьшали количество и угнетали сродство инсулиновых рецепторов. Программный качественный гемодиализ создает благоприятные условия для эритроци-тарно-мембраного инсулин-рецепторного взаимодействия, транспорта и проявления эффекта гормона.
