CC BY
43
УДК 618.1+616.6-002-022: 576
АНАЛИЗ КЛИНИЧЕСКИХ ПРОЯВЛЕНИЙ И ПОКАЗАТЕЛЕЙ ИММУНИТЕТА ВАГИНАЛЬНОГО СЕКРЕТА ПРИ ГЕНИТАЛЬНОЙ МИКОПЛАЗМЕННОЙ ИНФЕКЦИИ У ЖЕНЩИН
Т.В. Кузнеченкова, С.Н. Теплова, О.В. Лысенко ЧелГМА, г. Челябинск
Обследовано 68 женщин с верифицированной генитальной микоплазмен-ной инфекцией. У 26,4 % пациенток выявлен кольпит, у 22,0 % - цервицит, у 7,3 % - уретрит и у 4,4 % - сальпингит, отсутствие признаков воспаления обнаружено у 22,0 %. Локальный иммунный ответ на персистенцию микоплазм проявлялся стимуляцией механизмов защиты против внеклеточных патогенов в виде роста уровня 1Ь-17 в вагинальном отделяемом, снижением показателей иммуноглобулинов (01-04) вторичного иммунного ответа со значительным ростом количества анафилотоксина С5а.
Ключевые слова: генитальные микоплазмы, С5а, 1Ь-17, оксид азота, субклассы /,§ (7.
В настоящее время все большее значение в воспалительных процессах органов малого таза приобретают генитальные микоплазмы [2, 5, 11, 12]. При этом нередко данные микроорганизмы являются этиологическим фактором нарушений репродуктивной функции как у мужчин, так и у женщин [12].
Общепризнанно, что длительная персистен-ция микоплазм в органах мочеполового тракта оказывает негативное действие на репродуктивную функцию, вызывая вторичное бесплодие, прерывание беременности на разных сроках, привычное невынашивание беременности и др. [7].
Среди клинически значимых микоплазм генитальной локализации в основном рассматривают три вида: Mycoplasma hominis, Ureaplasma urea-lyticum и Mycoplasma genitalium. При этом только Mycoplasma genitalium относится к облигатным патогенам мочеполового тракта [4]. Другие два вида считаются условно-патогенными микроорганизмами, способными вызывать воспалительные процессы в органах мочеполовой системы при определенных условиях [12]. Факторами, при которых микоплазмы приобретают способность вызывать воспалительные процессы, являются изменения гормонального фона, ассоциация с патогенными (С.trachomatis, N.gonorrhoeae, T.vaginalis) и/или условно-патогенными микроорганизмами, а также изменения организма иммуносупрессивного характера. Так, например, по данным [3, 6] в условиях физиологической иммуносупрессии во время беременности частота обнаружения микоплазм увеличивается в 1,5-2 раза.
При анализе характера инфекционного процесса большое значение имеет ответная реакция организма на микробное инфицирование. В настоящее время большинство литературных данных связано с изучением изменений иммунологиче-
ских показателей крови при микоплазменной инфекции. Значительно меньше сведений о локальных нарушениях иммунитета непосредственно в местах персистенции микоплазм, т. е. в органах мочеполовой системы. Между тем характер топического ответа иммунной системы на развитие инфекционного процесса имеет в ряде случаев ключевое значение в исходе заболевания.
Целью настоящего исследования явилось выявление характера изменений иммунологических показателей вагинального отделяемого у женщин с верифицированной генитальной микоплазменной инфекцией.
Материалы и методы. В работу включены 68 больных женщин (средний возраст 31,5 ± 1,7), инфицированных генитальными микоплазмами, и 17 практически здоровых женщин - контрольная группа (средний возраст 33,3 ± 2,8). Условием включения в исследование было наличие добровольного согласия на обследование и участие в анкетировании.
В работе использовались общепринятые в венерологии клинико-анамнестические методы: выявлялись жалобы больных, собирался акушерско-гинекологический и половой анамнез (возраст начала половой жизни, число половых партнеров, наличие одновременно нескольких половых партнеров, число беременностей, родов, абортов, наличие в анамнезе ИППП, а также воспалительных заболеваний мочеполовой системы), осуществлялся осмотр пациенток дерматовенерологом, проводилось стандартное лабораторное исследование отделяемого половых путей. Индикация и идентификация М.hominis, U. urealyticum осуществлялись культуральным методом с помощью тест-системы MYCOPLASMA DUO (Франция) с определением числа колониеобразующих единиц (КОЕ).
Таблица 1
Характеристика тест-систем
Показатель, ед. изм. Название Фирма производитель Чувствительность Длина волны
ЛФ, нг/мл Лактоферрин - ИФА - Бест ВЕКТОР-БЕСТ, Новосибирск 20 нг/мл 450 нм
81§ А, мг/мл Секреторный - ИФА - БЕСТ ВЕКТОР-БЕСТ, Новосибирск 0,35 мг/мл 450 нм
Ч с, мг/мл ]£ О общий - ИФА - БЕСТ ВЕКТОР-БЕСТ, Новосибирск 0,2 мг/мл 450 нм
1ё01-1§04, мг/мл Подклассы ^ в - ИФА -БЕСТ ВЕКТОР-БЕСТ, Новосибирск 1§ в1 - 0,36 мг/мл ^ 02 - 0,24 мг/мл І§ ЄЗ - 0,06 мг/мл ^ Є4 - 0,04 мг/мл 450 нм
1Ь-8, пг/мл ИЛ-8-ИФА-БЕСТ ВЕКТОР-БЕСТ, Новосибирск 2 пг/мл 450 нм
ІЬ-17, пг/мл Интерлейкин-17 - ИФА -БЕСТ ВЕКТОР-БЕСТ, Новосибирск 2 пг/мл 450 нм
С5а, нг/мл Анафилотоксин С5а комплемента человека «ИФА - С5а» Цитокин, Санкт-Петербург 2 нг/мл 450 нм
СЗа, нг/мл Анафилотоксин СЗа комплемента человека «ИФА - СЗа» Цитокин, Санкт-Петербург 2 нг/мл 450 нм
Содержание иммунных белков определяли с помощью иммуноферментного метода. Характеристика используемых тест-систем представлена в табл.1.
Оценку нитроксидергических процессов проводили по методу Н.И. Емченко в модификации Т.В. Ковалевской [1] по уровню конечных стабильных метаболитов оксида азота.
Полученные данные обрабатывали с помощью статистической программы БРББ 6.0. Достоверность различий оценивалась по критерию Манна-Уитни. Критерием статистической достоверности был уровень р < 0,05.
Результаты и обсуждение. При анализе жалоб у обследованных пациенток первой группы выявлено, что основными были жалобы на выделения белого цвета из половых путей - у 18 больных (26,4 %), боли внизу живота, жжение и дискомфорт при мочеиспускании - у 8 женщин (11,7 %), отсутствие беременности - в 5 случаях, т. е. 7,3 % (при регулярной половой жизни в течение 2 лет без применения методов контрацепции). Около половины больных жалоб не предъявляло.
В контрольной группе только 5 человек (29,4 %) предъявляли жалобы на беловатые выделения из половых путей. Обследованные женщины считали себя здоровыми.
Объективно установлено, что у женщин контрольной группы признаки воспаления органов малого таза отсутствовали. У пациенток, инфицированных генитальными микоплазмами, диагностирован кольпит - у 18 обследованных (26,4 %), цервицит - в 22,0 % случаев, т. е. у 15 человек; сочетание кольпита и цервицита - у 10 больных (14,7 %); значительно реже выявлялись уретрит - у 5 женщин и сальпингит - у 3, соответственно. При
этом признаков воспаления не выявлено у 15 обследованных (22,0 %).
При изучении иммунологических показателей установлено, что общая активность системы комплемента у пациенток, инфицированных микоплазмами, не изменятся, но уровень анафилоток-сина С5а был достоверно выше в группе инфицированных женщин. Компонент комплемента С5а отщепляется от молекул-предшественников в процессе его активации и выполняют ряд важных функций. Он действуют как мощный хемоаттрак-тант на фагоциты, особенно на нейтрофилы, вызывает образование активных форм кислорода, а при контакте с тучными клетками и базофилами, циркулирующими в крови, способствует выбросу медиаторов. Анафилотоксин С5а способен воздействовать на клетки эндотелия капилляров, вызывая расширение сосудов и повышая проницаемость сосудистой стенки [10]. Повышение уровня С5а в отделяемом из половых путей при генитальной микоплазменной инфекции свидетельствует об активации системы комплемента непосредственно в очаге персистенции микроорганизмов и, следовательно, об участии этой системы в развитии воспалительного процесса во влагалище.
Анализ содержания уровней иммуноглобулинов класса в в вагинальном отделяемом женщин, инфицированных генитальными микоплазмами, показал существенное снижение субклассов 01, в2, вЗ, 04, при отсутствии различий с контрольной группой по суммарному содержанию иммуноглобулинов класса О. Иммуноглобулины Б (1§ в) участвуют во вторичном иммунном ответе и в активации системы комплемента, опсонизации объектов фагоцитоза, обеспечении противобактери-альной защиты. Снижение уровней субклассов
Проблемы здравоохранения
иммуноглобулинов О отражает дефект специфического иммунного ответа на локальном уровне у пациенток с генитальными микоплазмами.
Оценка возможной патогенетической значимости локальных иммунологических изменений невозможна без анализа уровней интерлейкинов в вагинальном секрете женщин. Содержание 1Ь-8, 1Ь-17 представлено в табл. 2. Показатели 1Ь-8 в обеих группах не имели отличий. Уровень 1Ь-17 в исследуемом материале у пациенток, колонизи-
Оксид азота является универсальным медиатором в человеческом организме [8, 9], синтезируемым множеством клеток - эндотелиоцитами, эпителиоцитами, мезангиоцитами, миоцитами, лимфоцитами, нейтрофилами, тромбоцитами, макрофагами, моноцитами, фибробластами, нейронами, гепатоцитами, тучными клетками. В зависимости от стадии иммунного ответа при инфекционной патологии оксид азота может выполнять как регуляторное, так и эффекторное действие.
Таблица 2
Иммунные показатели влагалищного секрета у женщин с микоплазменной генитальной инфекцией
Показатель, 1-я группа 2-я группа Критерий
ед. изм. п = 68 п = 17 Манна-Уитни
Ме 025-075 Ме 025-075 и^мп Р*
СН 50, у.е. 44,25 40,9-47,5 42,5 38,7^3,8 311,5 0,1007
Белок, г/л 0,26 0,2-0,34 0,28 0,18-0,36 413 0,906
СЗа, мг/мл 1,145 0,5-1,58 0,98 0,3-1,3 265,5 0,7784
С5а, мг/мл 1,26 0,6-2,25 0,36 0,05-1,3 159,5 0,0089
І£ в, мг/мл 2,775 1,99-3,44 3,8 2,3-5,62 218 0,0945
^ 01, мг/мл 1,17 0,84-1,26 1,94 1,235-2,49 46 0,008
02, мг/мл 0,77 0,42-1,07 1,435 0,82-1,955 60 0,0317
1§ 03, мг/мл 0,1 0,06-0,4 0,895 0,35-1,215 36,5 0,0028
1» 04, мг/мл 0,02 0,01-0,04 0,25 0,13-0,6 23 0,0005
А, мг/л 94,6 78,6-114,5 96,4 85,3-128,4 265,5 0,363
Лактоферрин, нг/мл 1013,5 698-1458 1230 968-1940 223 0,1156
1Ь-17, пг/мл 0,6015 0,29-1,5 0,21 0,16-0,562 203 0,0472
1Ь-8, пг/мл 11,3 4,66-41,3 9,6 2,37-35,2 286,5 0,594
N0 2, мкмоль/л 3,9 2,3-12 2,825 1,2-5,3 277,5 0,036
N0 х, мкмоль/л 14,7 10,4-24,6 12 9,6-13,2 287,5 0,0496
N0 3, мкмоль/л 9,15 4,67-14,2 7,855 7-9,3 378,5 0,457
* - критерий статистической достоверности при р < 0,05.
рованных микоплазмами, был в 3 раза выше такового у практически здоровых женщин (контрольная группа).
Интерлейкин-17 (1Ь-17) представляет собой провоспалительный цитокин, продуцируемый ТЬ 17 [0, 0]. Несмотря на то, что он выполняет важную защитную функцию против бактериальных агентов, доказана его способность вызывать повреждающее действие на ткани за счет инициации воспалительного процесса [13, 14]. Интерлейкин-17 (1Ь-17) действует на эпителиоциты, стимулируя продукцию хемокина (1Ь-8), участвующего в развитии эндогенного воспаления.
Повышение продукции 1Ь-17 в группе женщин, инфицированных генитальными микоплазмами, инициирует воспалительный процесс в колонизированных органах, что влечет за собой деструкцию эпителиальных клеток влагалища.
Анализ нитроксидергических процессов в вагинальном секрете женщин показал достоверное повышение уровня оксида азота (N0) и нитратов (N02) - конечного продукта метаболизма N0 у пациенток с генитальными микоплазмами по сравнению с объектами контрольной группы.
Синтез N0 способствует подавлению и элиминации патогена, а в повышенной концентрации вызывает повреждение тканей и транслокации микроорганизмов [8].
Таким образом, повышение уровней оксида азота и продуктов его метаболизма в вагинальном секрете женщин, инфицированных генитальными микоплазмами, свидетельствует о наличии патологического процесса в колонизированных органах, что, вероятно, сопровождается развитием локального воспаления и деструкцией эпителиальных клеток влагалища.
Заключение. Стимуляция ТИ 17 при микоплазменной инфекции отражает усиление иммунного ответа организма против внеклеточно расположенных патогенов.
Анализ показателей местных иммунологических факторов вагинального секрета выявил воспалительный характер ответа иммунных механизмов на персистенцию микоплазм, что проявлялось ростом уровня анафилотоксина (С5а), увеличением количества конечных стабильных метаболитов оксида азота, а также существенным повышением уровня 1Ь-17.
Литература
1. Емченко, Н.И. Универсальный метод определения нитратов в биосредах организма / Н.И. Емченко, ОМ. Цыганенко, Т.В. Ковалевская // Клинич. лаб. диагностика. —1994. — № 6. — С. 19—20.
2. Иммунологические показатели инфицированных урогенитальными микоплазмами обезьян / ИМ. Аршаба, Э.К. Джикидзе, И.В. Раковская и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - 2007. -№ 5. - С. 87-90.
3. Инфекции, передаваемые половым путем / под ред. В.А. Молочков, О.Л. Иванов, В.В. Чеботарева. -М., 2006. -632 с.
4. К вопросу о специфичности влияния Mycoplasma genitalium на течение беременности / С.Ю. Юрьев, В.И. Аббасова, Л.Л. Девятьярова, А.Е. Гущин //Гинекология. - 2009. - Т. 11, № 4. -
С. 44^47.
5. Кисина, В.И. Существует ли связь генитальных микоплазм с патологией органов мочеполовой системы? /В.И. Кисина, Е.В. Ширшова // Consilium Medicит. — 2007. — Т. 7, №7. - С. 533—541.
6. Козлова, В.И. Вирусные, хламидийные и ми-коплазменные заболевания гениталий: руководство для врачей /В.И. Козлова, А.Ф. Пухнер. — М., 2003. -440 с.
7. Кулаков, В.И. Гинекология: нац. руководство / В.И. Кулаков, И.Б. Манухин, Г.М. Савельева. -М., 2007. -1072 с.
8. Сепиашвили, Р.И. Оксид азота при астме и различных формах иммунопатологии / Р.И. Сепиашвили, М.Г. Шубич, В.Б. Карпюк //Астма. -2001. -Т. 2, № 2. - С. 5-14.
9. Синяченко, О.В. Оксид азота в терапевтической практике / О.В. Синяченко, Т.В. Звягина. — Донецк: Юго-Восток Лтд., 2001. - 258 с.
10. Теплова, С.Н. Секреторный иммунитет /
C.Н. Теплова, Д. А. Алексеев. - Челябинск, 2002. -200 с.
11. Торчинов, А.М. Смешанные урогенитальные инфекции у женщин: диагностика и комплексная терапия / А.М. Торчинов, М.В. Мазуркевич // Гинекология. - 2008. - Т. 10, N° 6. - С. 38-42.
12. Халдин, А.А. К вопросу терапии сочетанных урогенитальных инфекций, передаваемых половым путем / А.А. Халдин, В. С. Новоселов, А.В. Новоселов // Рос. журн. кожных и венерических болезней. - 2009. -№ 2.- С. 76-79.
13. IL-23 drives a pathogenic Т cell population that induces autoimmune inflammation / C.L. Lang-rish, Y. Chen, W. M. Blumenschein et al. // J. Exp. Med. - 2005. - Vol. 201. - P. 233-240.
14. Requirement of interleukin 17 receptor signaling for lung CXC chemokine and granulocyte colony-stimulating factor expression, neutrophil recruitment, and host defense / P. Ye, F.H. Rodriguez,
S. Kanaly et al. // J. Exp. Med. - 2001. - Vol. 194, № 4. - P. 519-527.
15. Thl7: an effector CD4 T cell lineage with regulatory T cell ties / C.T. Weaver, L.E. Harrington, P.R. Mangan et al. // Immunity. — 2006. — Vol. 24, N° 6. - P. 677-688.
16. McKenzie, B.S. Understanding the 1L-23-IL-17 immune pathway / B.S. McKenzie, R.A. Kastelein,
D.J. Cua // Trends Immunol. — 2006. — Vol. 27, № 1. — P. 17-23.
Поступила в редакцию 29 марта 2010 г.
