Н
щр
УДК: 582.949.27
АМИНОКИСЛОТНЫЙ И МИНЕРАЛЬНЫЙ СОСТАВ ТРАВЫ ГАЛИНЗОГИ РЕСТНИТЧАТОЙ
(GAUNSOGACILIATA (BAFIN.) В LAKE)
') Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко
Введение. Растения способны синтезировать огромное количество самых разнообразных химических соединений, относящихся к различным классам, которым присуща биологическая активность. Оказывая на организм то или иное фармакологическое действие, такие биологически активные вещества способны остановить или предотвратить патологические состояния и вернуть больного к нормальной жизнедеятельности. Также немаловажно знать, какие элементы накапливает растение, т.к. многие макро- и микроэлементы способны предупредить развитие некоторых болезней, а другие (тяжелые металлы, радионуклиды) наоборот проявляют токсические и канцерогенные свойства. Аминокислоты, входящие в состав растений, участвуют в биосинтезе специфических тканевых белков, ферментов, гормонов и других физиологически активных соединений [з, 4].
Цель нашей работы заключалась в исследовании аминокислотного и минерального состава травы галинзоги реснитчатой.
Материалы и методы. Объектом исследований служила воздушно-сухая измельченная трава галинзоги реснитчатой (Galinsogaciliata (Rafin.) Blake), заготовленная на территории Воронежской области в 2011 г. в период массового цветения растений.
Качественное обнаружение аминокислот проводили в водном извлечении с помощью нингидриновой реакции и хроматографии в тонком слое сорбента [l, 2].
Для этого 5,0 г воздушно-сухого измельченного сырья заливали 50 мл воды очищенной и нагревали с обратным холодильником на кипящей водяной бане в течение 1 часа. Извлечение фильтровали, сырье заливали снова 50 мл воды, и операцию повторяли. Водные извлечения, полученные после трехкратной экстракции, объединяли, упаривали под вакуумом до 25 мл и использовали для проведения качественной реакции и хроматографического анализа. При качественном анализе смешивали равные объемы исследуемого извлечения и 0,1% свежеприготовленного раствора нингидрина и осторожно нагревали.
Хроматографический анализ проводили в тонком слое сорбента. 0,03-0,05 мл полученных извлечений наносили на подготовленные хроматографические пластинки «Силуфол» и хромато-графировали в системе растворителей: 96% спирт этиловый: концентрированный аммиак в соотношении (16:4,5) параллельно с достоверными образцами аминокислот. Хроматограммы высушивали на воздухе, обрабатывали их 0,2% спиртовым раствором нингидрина и нагревали в сушильном шкафу при температуре Ю0-Ю5°С в течение нескольких минут.
Для более детального изучения содержания аминокислот использовали аминокислотный-анализатор марки AAA 339М (Чехия).
Для определения общего содержания аминокислот сырье галинзоги реснитчатой исчерпывающе экстрагировали и гидролизовали горячей водой очищенной в присутствии кислоты хлористоводородной концентрированной. Полученный гидролизат фильтровали, упаривали в вакууме до объема 0,5-1 мл, доводили рН полученной пробы до 2,2. Для определения общего содержания аминокислот к 1 мм пробы прибавляли 1 мл натриево-цитратного буфера (рН 2,2) и проводили анализ на аминокислотном анализаторе. Анализ аминокислот проводили в стандартных условиях, обычно используемых для разделения белковых гидролизатов [1].
Для количественной оценки определяли (автоматически) площади пиков идентифицированных аминокислот. Количество каждой идентифицированной аминокислоты определяли в на-номолях и нанограммах в аликвоте, непосредственно использованной для анализа. Затем было рассчитано общее содержание аминокислот в мг/юо мг.
B.Н. БУБЕНЧИКОВА1
C.Д. БОЕВА2
Изучен качественный и количественный аминокислотный и минеральный состав травы галинзоги рест-нитчатой.
Курский государственный медицинский университет
Ключевые слова: галинзога реснитчатая, аминокислоты, минеральные элементы.
Для определения связанных аминокислот навеску сухого сырья предварительно экстрагируют 8о% спиртом этиловым, а затем пробу заливают водой очищенной и концентрированной хлористоводородной кислотой, гидролизуют и далее определяют содержания аминокислот по описанной выше методике.
Концентрацию свободных аминокислот рассчитывали как разность между концентрацией общего содержания аминокислот и концентрацией связанных аминокислот.
Качественный состав и количественное содержание минеральных элементов определяли методом эмиссионного спектрального анализа. Образцы сырья измельчали, подвергали озолению в муфельной печи при температуре 450-500°С при доступе воздуха в течение 2 часов. Полученную золу после охлаждения в эксикаторе взвешивали на аналитических весах и анализировали на спектрографе ДФС-8-1 (Россия). Фотометрирование спектрограмм проводили с помощью атласа спектральных линий и спектров-стандартов с погрешностью не более 2% в пересчете на золу [1-2].
Результаты и их обсуждение. Результаты качественного анализа аминокислот позволили установить их наличие в траве галинзоги реснитчатой. При хроматографическом анализе аминокислоты проявлялись в виде красно-фиолетовых пятен.
В траве галинзоги реснитчатой в свободном и связанном состоянии обнаружено 15 аминокислот, 7 из которых являются незаменимыми: треонин, валин, метионин, лейцин, изолейцин, фенилаланин, лизин (см. табл.).
Таблица
Содержание аминокислот в траве галинзоги реснитчатой
№ п/п Название аминокислоты Концентрация свободных аминокислот мг/юо мг Концентрация связанных аминокислот мг/юо мг
1 2 3 4
1 Аспарагиновая кислота 0,02 0,17
2 Треонин* 0,02 0,16
3 Серии 0,02 0,24
4 Цистин 0,17 о,55
5 Глицин 0,05 о,33
6 Алании 0,09 0,96
7 Валин* 0,06 0,12
8 Метионин* 0,02 0,10
9 Лейцин* 0,03 0,28
10 Изолейцин* 0,04 0,37
и Тирозин 0,02 0,18
12 Фенилаланин* 0,04 0,22
13 Гистидин 0,06 0,17
14 Лизин* 0,10 0,84
15 Аргинин 0,15 1,00
Сумма аминокислот 0,89 5,69
Сумма незаменимых аминокислот 0,31 2,09
Примечание: * - незаменимые аминокислоты.
Из данных таблицы видно, что в траве галинзоги реснитчатой содержание суммы свободных аминокислот составляет 0,89 мг/юо мг, в том числе сумма незаменимых аминокислот составляет 0,31 мг/юо мг. Содержание суммы связанных аминокислот в траве галинзоги реснитчатой составляет 5,69 мг/юо мг, среди них сумма незаменимых аминокислот составляет 2,09 мг/юо мг.
Проведенный анализ минерального состава показал, что наибольшая концентрация среди биоэлементов в траве галинзоги реснитчатой наблюдается у калия (2500 мг/юог), натрия (1750 мг/юо г), кальция (2100 мг/юо г), кремния (4000 мг/юо г), а наименьшая у никеля (1,2 мг/юо г), меди (6,2 мг/юо г).
Полученные данные позволяют отметить, что трава галинзоги реснитчатой содержит аминокислоты (в том числе 7 незаменимых), а также значительные количества многих важнейших минеральных элементов. В комплексе с другими БАВ (полисахаридами, фенольными соединениями, органическими кислотами) это подчеркивает терапевтическую значимость и дает возможность создания новых ценных препаратов комбинированного действия на основе сырья галинзоги реснитчатой.
Выводы:
1. Изучен компонентный состав аминокислот травы галинзоги реснитчатой. Всего обнаружено 15 аминокислот, из них 7 - незаменимых. Суммарное содержание свободных аминокислот составляет 0,89 мг/мг%, связанных аминокислот - 5,69 мг/юо мг.
2. Анализ минерального состава показал наличие 15 минеральных элементов.
Литература
1. Бубенчиков, Р.А. Аминокислотный и минеральный состав травы фиалки удивительной / Р.А. Бубенчиков // Вестн. Воронеж, гос. ун-та. Сер. Химия. Биология, Фармация. - 2006. - № 1. - С. 186-188.
2. Лукманова, К.А. Аминокислотный и минеральный состав фитопрепарата люцерон / К.А. Лукма-нова, В.А. Рябчук, Н.Х. Салихова // Фармация. - 2000. - № 1. - С. 25-27.
3. Пилат, Т.Л., Иванов, А.А. Биологические активные добавки к пище (теория, пр-во, применение). / Т.Л. Пилат, А.А. Ивано. - М. : Аввалон, 2002. - 710 с.
4. Davies, J.S. Aminoacids, peptides and proteins / J.S. Davies // Cambridge: The Royal Society of Chemistry. - 2006. - 472 p.
AMINOACID AND MINERAL COMPOSITION OF HERB OF GAUNSOGA СI LI ATA [RAFIN.) BLAKE
The aim of the investigation is to study arninoacid and mineral composition of herba of Galinsoga ciliata (Rafin.) Blake. The object of investigation was air-dried cut herb of Galinsoga ciliata (Rafin.) Blake. The methods of investigation are: chemical, chromatographic, spectroscopic methods of research. The results: the qualitative and quantitative amino acid and mineral composition of Galinsoga ci lia La (Rafin.) Blake herb has been investigated.
Keywords: Galinsoga ciliata (Rafin.) Blake, arninoacid and mineral composition
V.N. BUBENCHICOVA SABOEVA
Kursk State Medical University
*> Voronezh State Medical Academy Named After N.N. Burdenko
e-mail: [email protected]