CC BY
49
Активность трансфераз в тканях легких у крольчат в раннем постнатальном периоде
Е.Б. Чеплашкина, аспирант, Н.Г. Игнатьев, доктор биологических наук Чувашская государственная сельскохозяйственная академия (Чебоксары).
Ключевые слова: аланинаминотрансфераза, аспар-татаминотрансфераза, активность ферментов, у -глутамилтрансфераза, кролики, легкие Сокращения: АлАТ — аланинаминотрансфераза, АсАТ — аспартатаминотрансфераза, ГГТ — у-глу-тамилтрансфераза
Введение
Легкие представляют собой губчатый, очень эластичный орган, расположенный в грудной полости и служащий для газообмена между организмом и внешней средой. Легкие кролика небольшие, укороченные, имеют типичную долевую структуру. Правое легкое состоит из четырех долей, левое — из трех, причем верхушечная доля в левом легком развита очень слабо и часто совсем отсутствует [1].
Трансферазы — группа ферментов, ускоряющих реакции переноса атомных групп и молекулярных остатков к другим органическим соединениям. Из них ами-нотрансферазы (АлАТ, АсАТ) ускоряют реакцию пере-аминирования, или трансаминирования, то есть переноса аминогрупп с аминокислоты на кетокислоту, а ГГТ катализирует перенос гамма-глутамилового остатка с пептида или пептиноподобного вещества, содержащего концевой глутаматный остаток, на аминокислоту или другой пептид.
Цель исследования
Определить характер возрастных изменений активности ферментов в тканях разных долей легких у крольчат в раннем постнатальном периоде.
Материалы и методы
Для исследования отобрали крольчат породы серый великан в возрасте 1, 6, 12 и 18 суток. Крольчат вводили в состояние общего наркоза. Эвтаназию и все манипуляции выполняли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» [6]. Патолого-анатомичес-кое вскрытие проводили по методу Шора [2]. Легкие взвешивали, из каждой доли легкого брали пробы тканей. Их промывали холодным физиологическим раствором и для дальнейших исследований замораживали в жидком азоте. Активность ферментов АлАТ и АсАТ определяли по методу Райтмана и Френкеля (1957), ГГТ определяли унифицированным колориметрическим методом по «конечной точке» [5]. При определении активности ферментов использовали набор реактивов «Витал Диагностик» (Россия). Активность ферментов в тканях выражали в мкмоль/г*ч.
Цифровой материал исследований обработан методом вариационной статистики [7], с использованием программного комплекта «Microsoft Excel-2007».
Результаты
Полученные результаты обобщены в таблице.
Активность трансфераз, мкмоль/г*ч, в тканях разных долей легких у разновозрастных крольчат
Возраст Правая Правая Правая Правая Левая Левая
сутки верхушечная сердечная диафрагменная добавочная сердечная диафрагменная
АлАТ
1 27,0±1,53 35,1±2,32 32,5±2,86 29,9±1,41 29,7±1,29 34,5±2,78
6 37,3±2,84* 40,1±2,73 40,2±2,69 40,7±2,98* 25,4±2,55 30,9±2,79
2 43,7±3,78 17,1±1,2*** 9,9±0,62*** 12,6±0,36*** 57,9±4,41*** 35,8±1,78
8 24,8±0,91** 38,1±2,74*** 44,5±3,63*** 19,2±0,73*** 48,3±3,59 36,7±0,58
АсАТ
1 16,0±0,26 24,4±0,59 25,1±0,93 21,1±1,48 21,1±1,39 11,1±0,18
6 44,3±3,72*** 44,6±3,49*** 40,1±2,75*** 40,5±2,39** 44,0±3,21*** 39,2±2,52***
12 42,8±2,38 41,4±2,14 39,5±2,47 51,9±3,36* 42,6±2,13 39,1±2,64
18 40,4±3,25 54,2±3,53* 57,2±4,32* 40,4±2,34* 55,9±4,57* 63,5±4,87***
ГГТ
1 16,0±0,53 24,4±0,95 25,1±0,93 21,0±0,83 21,0±1,29 11,1±0,21
6 44,5±2,28*** 44,8±1,53*** 40,2±0,89*** 40,5±1,21*** 44,0±3,13*** 39,3±2,24***
12 42,8±3,74 41,3±1,36 39,5±2,71 38,9±3,28 42,7±2,53 39,1±3,35
18 40,4±3,26 44,1±2.37 47,2±2,21 40,4±1,32 46,0±3,24 43,6±2,1
Примечание. р<0,05* , р<0,01**, р<0,001*** — достоверность между возрастами
Активность АлАТ в тканях правой верхушечной доли у крольчат в возрасте 6 суток выше в 1,4 раза (р<0,01), чем у суточных. К 12-м суткам активность фермента возрастает на 16,1 %, в течение последующей недели снижается в 2 раза (р<0,01). Характер возрастных изменений активности АлАТ в тканях правой сердечной доли несколько иной. У 1-, 6- и 18-суточных крольчат уровень фермента примерно одинаковый. В отличие от других возрастных групп, у крольчат в возрасте 12 суток активность исследуемого фермента значительно ниже — более чем в 2,0 раза (р<0,001). Активность АлАТ в тканях правой диафрагменной доли с возрастом изменяется следующим образом: у 1- и 6-суточных крольчат она примерно на одном уровне. Так же как и в тканях правой сердечной доли, у 12-суточных крольчат активность на самом низком уровне, что на 75,4 % (р<0,001) ниже, чем у 6-суточных. У 18-суточных крольчат активность в тканях правой диафрагменной доли определяется на максимальном уровне, что выше в 4,5 раза (р<0,001), чем у 12-суточных. В тканях правой добавочной доли к 6-м суткам активность повышается на 36,1 % (р<0,05). В тканях этой доли к 12-м суткам активность фермента значительно уменьшается — на 69,0 % (р<0,001). В последующие 6 суток жизни крольчат она возрастает на 47,64 % (р<0,001). В тканях левой сердечной доли активность АлАТ у крольчат в возрасте 1 и 6 суток определяется примерно на одном уровне. К 12-м суткам она возрастает в 2 раза (р<0,001) и в дальнейшем достоверные возрастные изменения
Активность трансфераз в тканях легких у крольчат в раннем постнатальном периоде
не выявлены. В отличие от тканей других долей, в тканях левой диафрагменной доли легких активность исследуемого фермента в изучаемые возрастные сроки крольчат определяется примерно на одинаковом уровне.
Активность АсАТ в тканях правой верхушечной доли легких у суточных крольчат наименьшая. В последующие 6 суток она увеличивается в 2,5 раза (р<0,001), и в дальнейшем отмечены ее стабильные значения. В тканях правой сердечной доли активность исследуемого фермента с возрастом увеличивается. У суточных крольчат активность наименьшая, у 6- и 12-суточных активность фермента примерно одинаковая. К 18-м суткам активность достигает максимального значения, что выше, чем в возрасте 12 суток, на 30,92 % (р<0,05). В тканях правой диафрагменной доли к возрасту 6 и 12 суток активность АсАТ возрастает, по сравнению с активностью в возрасте 1 суток, в 1,6 раза (р<0,001). У 18-суточных крольчат активность фермента выше, чем у 12-суточных, на 34,58% (р<0,05). В тканях правой добавочной доли активность АсАТ в первые 6 суток жизни крольчат возрастает в 2 раза (р<0,001). К 12-м суткам она достоверно увеличивается в 1,3 раза (р<0,05). Повторное достоверное снижение выявляется к 18-суточному возрасту на 22,2 % (р<0,05). В тканях левой сердечной доли наименьшая активность фермента обнаружена у суточных крольчат. Более высокие и одинаковые значения показателя определяются у 6- и 12-суточных крольчат. У 18-суточных крольчат активность АсАТ наибольшая: выше в 1,3 раза (р<0,05), чем у крольчат предыдущих возрастов. В тканях левой диафрагмен-ной доли активность фермента, как и в тканях левой сердечной доли постепенно увеличивается. Как и в тканях левой сердечной доли, активность АсАТ у 18-суточных крольчат достигает максимальных значений.
Активность ГГТ в тканях правой верхушечной доли к 6-суточному возрасту увеличивается, по сравнению с суточным возрастом, в 2,8 раза (р<0,001). У 12- и 18-суточных крольчат остается примерно на уровне 6-суточных. Такая же закономерность изменений активности ГГТ с возрастом крольчат выявляется и в тканях других долей легких.
Библиография
1. Анохин П.К. Узловые вопросы теории функциональной системы. — М.: Наука, 1980.
2. Вскрытие и патологоанатомическая диагностика болезней сельскохозяйственных животных/ Под ред. В.П. Шишкова, А.В. Жарова. — М.: Колос, 1999.
3. Игнатьев Н.Г., Максимова О.П., Петрова Т.В. Темпы изменения активности аланин- и аспартатаминотрансфераз в тонком кишечнике у кроликов в постнатальном онтогенезе / Труды Чувашской ГСХА, 2004; 19: 169.
4. Лысов В.Ф., Максимов В.И. Особенности функциональных
Обсуждение
Полученные результаты исследований свидетельствуют о том, что активность трансфераз, обеспечивающих переаминирование заменимых аминокислот и являющихся индикаторами белкового обмена в тканях органов, с возрастом крольчат изменяется с разной интенсивностью. Крольчата рождаются с относительно низкой активностью ферментов АлАТ, АсАТ и ГГТ. С возрастом активность исследуемых ферментов в тканях разных долей легких изменяется неравномерно.
Наиболее интенсивные возрастные изменения активности АлАТ выявляются возрасте с 6 до 12 суток в тканях правой сердечной, правой добавочной, левой диафраг-менной и левой сердечной долей. В тканях правой верхушечной и правой диафрагменной долей она наиболее интенсивно изменяется с 12- до 18-суточного возраста.
Существенные изменения активности фермента АсАТ в возрасте с 1-х по 6-е сутки выявляются во всех тканях долей легких, кроме правой диафрагменной, где наибольшие изменения определяются с 12- х по 18-е сутки.
Интенсивность возрастных изменений активности фермента ГГТ в тканях исследуемых долей легких у крольчат, в отличие от других трансаминаз, имеет особенность: активность ГГТ наименьшая в суточном возрасте, а с 6-суточного она стабилизируется.
Выводы
Полученные результаты исследований по определению активности трансаминаз в тканях разных долей легких у крольчат разного возраста свидетельствуют о неравномерном характере возрастных изменений активности изучаемых ферментов в разных долях легких у крольчат, что вполне согласуется с теорией о систе-могенезе П.К. Анохина, дополненной и расширенной относительно продуктивных животных В.Ф. Лысовым и его учениками. Согласно теории о системогенезе, разнообразные структуры органов и организма в целом объединяются в функциональные системы и эти системы с возрастом животных развиваются гетерохрон-но и с разной интенсивностью [1, 4].
систем и основ этологии сельскохозяйственной птицы. — М.: Аг-роконсалт, 2003.
5. Методы биохимического анализа: справочное пособие// Под. ред. Б.Д. Кальницкого. — Боровск: BIFIP, 1997.
6. Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных // Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР № 755 от 12.03.1977 г.
7. Тукшаитов Р.Х. Основы динамической метрологии и анализа результатов статистической обработки. — Казань: Мастер Лайн, 2001.
Summary
E.B. Cheplashkina, N.G. Ignatev. Activity of Transferases in Rabbits Tissues of Lungs in the Early Post-Natal Period.
The nature and intensity of age changes of activity of transaminaz in the tissues of various tranches of bunnis is determined. It is found out, that bunnies are born with the relatively low activity of enzymes alaninetransaminase, aspartateaminotransferase, gamma glutaminetransferase. With the age of the animals the activity of studied enzymes in the tissues of various tranches increases.
РВЖ • СХЖ • № 4/2013
