CC BY
9
дома было установлено, что дети опытной группы, несмотря на меньший возраст, к концу эксперимента по скорости и качеству выполнения психомоторных тестов практически не
отличались от детей подготовительных групп (¿4«б = 1,0,
6 = 1,6), У детей этой группы за 2 мес наблюдений при
обычном двигательном режиме, так же как и в контрольной группе, не произошло изменений в скорости и качестве выполнения психомоторных тестов е =0>6').
Результаты проведенных экспериментальных исследований позволяют сделать вывод, что комплекс специальных дополнительных физических упражнений для развития тонких движений кистей рук оказывает стимулирующее влияние на развитие и коррекцию речевой функции, моторики кистей рук у детей с задержкой развития и двигательных навыков.
На основании проведенных исследований разработаны рекомендации по оптимизации двигательного режима и трудового воспитания детей старших и подготовительных групп дошкольных детских домов.
Литература
1. Жукова Н. С., Мастюкова Е. М., Фомичева Т. В. Преодоление задержки речевого развития у дошкольников.—
М., 1973.
2. Кольцова М. М. // Журн. высш. нервн. деят.— 1973.— № 5. — С. 927—937.
3. Кольцова М. М. Двигательная активность в развитии функций мозга ребенка. — М., 1973.
4. Кольцова М. М. Ребенок учится говорить. — М., 1979.
5. Куинджи Н. И., Сорокина Т. Н. // Психофизиологические исследования в гигиене детей и подростков / Под ред. С. М. Громбаха, Д. Н. Крылова. — М., 1981.— С. 131 — 136.
6. Матвеева Н. А., Леонов А. В., Ульенкова У. В. // Гиг. и сан. — 1981. — № 7. — С. 63—65.
7. Программа воспитания и обучения в детском саду. —
М., 1985.
Поступила 14.04.87
УДК 615.285.7.099:616.36-008.931:577.152.1
Т. М. Шубитидзе, Т. Н. Бусова, Р. А. Рязанова, Г. В. Абдушелишвили
АКТИВНОСТЬ Л ИЗОСОМАЛЬНЫХ ГИДРОЛАЗ В ПЕЧЕНИ КРЫС ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ИНТОКСИКАЦИИ СУЛЬФОКАРБАТИОНОМ
Институт санитарии и гигиены им. Г. М. Натадзе, Тбилиси; Московский НИИ гигиены
им. Ф. Ф. Эрисмана
Интенсивное развитие сельского хозяйства предусматривает широкое использование достижений современной химии в области разработки и производства минеральных удобрений, стимуляторов роста, а также такой обширной группы биологически активных соединений, как пестициды. Последнее обусловливает опасность загрязнения окружающей среды и в конечном счете влияние на организм человека значительного числа чужеродных соединений. Поскольку большинство пестицидов относится к токсичным соединениям политропного действия, очевидна необходимость комплексной медико-биологической оценки их повреждающего действия на различных функциональных уровнях — целом организме, органах, тканях, клегках и ферментных системах. Следует отметить, что повреждающее действие экзогенных Химических веществ опосредуется преждё всего через структурно-метаболические нарушения, возникающие на-субклеточном уровне. При этом характер и специфичность токсического действия определяются влиянием на отдельные звенья обмена веществ [7, 8, 10].
Целью настоящей работы явилось исследование структурно-функционального состояния лизосомального аппарата печени крыс при хроническом воздействии различных доз сульфокарбатиона — одного из перспективных протравителей семян, относящегося к группе дитиокарбаматов и служащего заменителем традиционно используемых в качестве фунгицидов высокотоксичных ртутьорганических соединений и тетраметилтиурамидсульфида ;(ТМТД). В настоящее время известно, что токсическое действие ТМТД выражается в ингибировании окислительного фосфорилирования, монооксигеназной системы, синтеза РНК и ДНК в гепаго-цитах [1, 13], а также в снижении активности протеоли-тической системы лизосом печени и почек [9]. Имеющиеся данные дают основание предполагать, что одной из сторон биологического действия пестицидов группы дитиокарбамд^--тов является нарушение обмена белка как на этапе биосинтеза, так и на этапе катаболизма. Это с учетом значимости динамического равновесия обновления белка для метаболического гомеостаза может лежать в основе и иных, выявленных для дитиокарбаматов биохимических эффектов. С этой точки зрения исследование влияния перспективных для использования в сельском хозяйстве дитиокарбаматов, в частности сульфокарбатиона, на систему внутриклеточного катаболизма белка представляет не только практический
в плане прогнозирования их действия, но и теоретический интерес в аспекте патологии белкового обмена.
В работе использовали крыс-самок линии Вистар, которым в течение 6 мес перорально вводили ежедневно суль-фокарбатион в дозах 75oooLD50 (0,4 мг/кг), V500LD50 (4 мг/кг) и VsoLDso (40 -мг/кг). По окончании экспериментального периода животных декапитировали, извлекали печень, промывали холодным физиологическим раствором, готовили гомогенаты по стандартной методике, используя в качестве суспендирующей среды 0,25 М раствор сахарозы рН 7,4, содержащей 0,001 М ЭДТА [11]. В гомогенатах •печени определяли общую и в полученных на ультрацентрифуге L5-65 фирмы «Spinco» (США) супернатантах (105 000 g; 60 мин) неседиментируемую активность лизосо-мальных протеиназ — катепсинов А (КФ 3.4.12А.1), В (КФ 3.4.22.1), С (КФ 3.4.14.1) и D (КФ 3.4.23.5) спектро-флюориметрическими методами [4] и арилсульфатаз А и В (КФ 3.1.6.1) и (3-галактозидазы (КФ 3.2.1.23) спектрофото-метрическими методами, основанными на применении ультрамикросистемы биохимического анализа [ 11 х^использованием в качестве субстратов 1Ч-карбобензокси-Ь-глута-мил-Ь-тирозина, 1М-бензоил-Е>,Ь-аргинин-р-нафтиламида, гли-цил-Ь-фенилаланин-Р-нафтиламида, гемоглобина, р-нитрофе-нил-Р-Е)-галактоспиранозида и р-нитрокатехолсульфата (фирмы «Sigma» США) соответственно, а также концентрацию белка в печени и содержание SH-групп в сыворотке крови [12, 16].
Масса тела крыс (294—318 г) во всех экспериментальных группах не отличалась от таковой контрольных животных, так же как и абсолютная (8,53—9,43 г) и относительная (2,75—3,04 %) масса печени. Общее состояние животных не позволяло судить о токсическом действии сульфокарбатиона.
Результаты энзимологического исследования лизосомального аппарата печени свидетельствуют, что сульфокар-батион вызывал существенные изменения в общей активности лизосомальных протеиназ. Так, введение пестицида в дозе V5000LD50 приводило к резкому возрастанию активности тиоловых протеиназ — катепсина В в 2,2 раза и катеп-сина С в 3,2 раза. При увеличении дозы пестицида до VsooLDso выявлено умеренное (на 23 %) снижение активности катепсина А. Активность катепсинов В и С в этом случае была также повышена, но не столь значительно (на 46
и 88 % соответственно по сравнению с контролем). Ежедневное введение сульфокарбатиона животным в дозе 75оЬЭ5о вызывало отчетливое снижение активности катепси-на А на 36 % и основной лизосомальной эндопептидазы — катепсина О на 33 %• В свою очередь, хотя у животных данной экспериментальной группы и сохранялась активация гиоловых протеиназ, она была выражена в наименьшей степени по сравнению с таковой у животных, получавших суль-фокарбатион в дозах 1 /'5ооо и ЧъооЬГ>5о. Одновременно следует подчеркнуть, что сульфокарбатион практически не оказывал влияния на общую активность лизосомальных гидролаз другой субстратной специфичности (арилсульфатаз А и В и р-галактозидазы), а также на содержание белка в печени.
Исследование неседиментируемой активности лизосомальных гидролаз позволило установить, что сульфокарбатион в дозе 1/5ооЬ050 не вызывал каких-либо структурных изменений лизосомального аппарата клеток печени. По мере увеличения количества вводимого препарата обнаружена дестабилизация мембран лизосом. наиболее отчетливо выявляемая при максимальной использованной дозе — УбоЬЭзо, о чем можно судить по увеличению на 31—59 % неседиментируемой активности большинства из изученных лизосом (катепсинов В, С, Э и р-галактозидазы).
Полученные результаты позволяют сделать вывод, что хроническая интоксикация сульфокарбатионом в дозах выше '/зооЬОбо приводит к снижению интенсивности внутриклеточного катаболизма белка. Об этом свидетельствует угнетение активности двух лизосомальных протеиназ — катепсинов А и Э, действующих как синергисты и ответственных за процессы тотального протеолиза в клетке [3, 6, 14]. Вместе с тем обнаруженная активация тиоловых протеиназ, наиболее рельефно проявляющаяся при введении минимальных (УбоооЬОбо) доз пестицида, может быть обусловлена тем обстоятельством, что сульфокарбатион способен выступать в качестве своеобразного донора БН-групп, необходимых для проявления каталитических свойств катепсинов В и С [2, 11]. На обоснованность подобного предположения указывает и обнаруженное повышение концентрации БН-групп в сыворотке крови животных всех экспериментальных групп в среднем на 10—15 % (р<0,05). В то же время снижение степени активации катепсинов В и С с увеличением вводимой дозы сульфокарбатиона можно расценивать как результат проявления общего ингибирующего действия данного пестицида на процессы внутрилизосомального протеолиза, что связано, по-видимому, с коротким периодом полужизни протеолитических ферментов лизосом и нарушением их биосинтеза [5, 15].
Таким боразом, представленные результаты свидетельствуют, что одним из компонентов биохимического действия
сульфокарбатиона является нарушение обмена белка на уровне его деградации и повреждение структурной целостности лизосомальных мембран, создающее предпосылки для развития процессов неконтролируемого гидролиза в клетке и как следствие дисрегуляции многочисленных путей метаболизма. В совокупности с имеющимися данными [9] выявленные особенности биохимического действия сульфокарбатиона позволяют рассматривать их как общее свойство пестицидов дитиокарбаматного ряда.
Литература
1. Бадаева Jl. П., Кокшарева Н. В., Овсянникова Л. М. и др. // Гиг. и сан. — 1986. — № 6. — С. 23—26.
2. Баррет А. Д., Хит М. Ф. // Лизосомы: Методы исследования/Под ред. Дж. Дингла: Пер. с англ. — М., 1980.— С. 25—156.
3. Васильев А. В., Звягина О. П. // Вопр. питания. — 1978.— № 5.— С. 31—33.
4. Васильев А. В., Капелевич Т. А., Тутельян В. А. // Вопр. мед. химии.— 1983. — № 3. — С. 127—130.
5. Васильев А. В., Непесова Ш. А., Тутельян В. А.// Бюл. экспер. биол.— 1983. — №7. — С. 39—40.
6. Дин Р. Процессы распада в клетке: Пер. с англ. —' М., 1981.
7. Литвинов Н. Н., Кухта В. КДадыко Т. И. и др. // Гиг. и сан.— 1983. —№ 9. — С. 22—25.
8. Меркурьева Р. В., Судаков К. В., Бонашевская Т. И., Журков В. С. Медико-биологические исследования в гигиене. — М., 1986.
9. Непесова Ш. А., Васильев А. В., Тутельян В. А. // Гиг. и сан. — 1985. — № 1. —С. 89—91.
10. Покровский А. А. // Химические основы процессов жизнедеятельности / Под ред. В. Н. Ореховича. — М., 1962. —С. 311—331.
11. Покровский А. А., Тутельян В. А. Лизосомы. — М., 1976.
12. Рубина X. М., Романчук Л. А.// Вопр. мед. химии.— 1961 . — № 6. — С. 652—655.
13. Сасинович Л. М., Паньшина Т. И., Светлый С. С. // Гиг. и сан. — 1983. — № 3. — С. 30—34.
14. Тутельян В. А. // Вопр. питания. — 1980. — № 5.— С. 56—61.
15. Amenta J. SSargus M. /., Baccino F. M.//J. Cell. Physiol. — 1978. — Vol. 97. — P. 267—284.
16. Lowry О. П., Rosebrough N. JFarr A. L., Randall R. J. //J. biol. Chetn.—1951. —Vol. 193.— P. 265— 275.
Поступила 15.05.87
УДК 611.1/8-06:577.175.122
Л. К. Айвазян
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОЦЕНКА ДЕЙСТВИЯ ПРЕПАРАТА
ГИДРЕЛ ПО МОРФОЛОГИЧЕСКИМ ПОКАЗАТЕЛЯМ
Филиал ВНИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс,
Ереван
Гидрел — регулятор роста растений, производное 2-хлор-этилфосфоновой кислоты; применяется в качестве стимулятора созревания овощных и плодовых культур и дефолиации хлопчатника [6].
Целью настоящей работы явилось морфологическое исследование внутренних органов (печень, почки, селезенка, легкие, сердце, надпочечники, щитовидная железа) и головного мозга белых крыс, подвергнутых воздействию гид-рела.
Помимо окраски препаратов гематоксилином и эозином, в работе использованы гистохимические методы выявления липидов, РНК и гликогена, а в остром эксперименте с пе-роральным введением вещества проведено также изучение
активности кислой и щелочной фосфатаз (по Берстону) в печени. Гистохимические реакции оценивали визуально. На каждый срок наблюдения использована группа из 4— 5 крыс.
В остром эксперименте материал взят через 1, 2, 3 и 5 сут после однократного введения препарата в дозе 2200 мг/кг (1Х>50).
В раннем периоде исследования (1-е сутки) обнаружены дисциркуляторные изменения, проявившиеся расширением и полнокровием центральных вен, междольковых разветвлений воротной вены и частично синусов в печени, межкаль-цевых капилляров и капилляров гломерул, мелких вен в корковом и мозговом веществе почек, венозных синусов в
\
