CC BY
2
СОВРЕМЕННАЯ ГЕРПЕТОЛОГИЯ. 2024. Т. 24, вып. 3/4. С. 163-170 Current Studies in Herpetology, 2024, vol. 24, iss. 3-4, pp. 163-170
https://sg.sgu.ru
Адаптивные реакции крови средиземноморской черепахи Никольского Testudo graeca nikolskii Ckhikvadze et Tuniyev, 1986 (Testudinidae, Reptilia)
Е. Б. Романова 1H, А. Г. Бакиев 2, Р. А. Горелов 2
'Национальный исследовательский Нижегородский государственный университет
им. Н. И. Лобачевского Россия, 603950, г. Нижний Новгород, проспект Гагарина, д. 23 2 Самарский федеральный исследовательский центр РАН, Институт экологии Волжского бассейна РАН Россия, 445003, г. Тольятти, ул. Комзина, д. '0
Информация о статье
Оригинальная статья
УДК 598.132.4:591.111.1
https://doi.org/10.18500/1814-6090-
2024-24-3-4-163-170
ББ№ Ь80ББУ
Поступила в редакцию 21.08.2024, после доработки 12.09.2024, принята 12.09.2024
Аннотация. С целью проверки здоровья у особей средиземноморской черепахи Никольского Testudo graeca nikolskii Ckhikvadze et Tuniyev, 1986 (22 особи: 6 самцов и 16 самок), собранных в окрестностях г. Анапа (Краснодарский край России), использован гематологический подход для оценки адаптивных реакций крови. У 54.5% особей в мазках крови обнаружены внутриэритроцитарные паразиты Haemogregarina spp. (Adeleorina, Cocci-dia). Высокие показатели экстенсивности инвазии, средней интенсивности инвазии, индекса обилия и долей зараженных клеток самок черепах свидетельствовали об их большей склонности к инфицированию гемогрегаринами по сравнению с самцами. Отдельные стадии развития гемопаразита (гаметоциты и трофозоиты) встречались в эритроцитах крови черепах с равной частотой. По лейкоцитарному составу крови различий между инфицированными и здоровыми самками и самцами не выявлено. В лейкограммах черепах преобладали лимфоциты. Выявлена зависимость между возрастанием числа эозинофилов в периферической крови черепах и содержанием в эритроцитах трофозоитов. Полученные результаты свидетельствуют о влиянии паразитических форм Haemogregarina spp. на иммунный ответ организма черепах и необходимости выявления возможных вредных долгосрочных последствий инфицирования гемогрегаринами черепах T. g. nikolskii из Краснодарского края.
Ключевые слова: черепахи, периферическая кровь, лейкоцитарные индексы, лейкоцитарная формула крови, гемопаразиты
Образец для цитирования: Романова Е. Б., Бакиев А. Г., Горелов Р. А. 2024. Адаптивные Статья опубликована на условиях ли- реакции крови средиземноморской черепахи Никольского Testudo graeca nikolskii Ckhikvadze
цензии Creative Commons Attribution 4.0 International (CC-BY4.0)
et Tuniyev, 1986 (Testudinidae, Reptilia) // Современная герпетология. Т. 24, вып. 3/4. С. 163 170. https://doi.org/10.18500/1814-6090-2024-24-3-4-163-170, EDN: LSGEBV
ВВЕДЕНИЕ
Видовой ареал средиземноморской черепахи - Testudo graeca Linnaeus, 1758 - расположен в Северной Африке, Южной Европе, Передней Азии и на островах Средиземного моря; зарегистрированные на Канарских островах экземпляры, скорее всего, являются сбежавшими домашними животными, которые не образуют жизнеспособных популяций (The Reptile Database, 2024). В Краснодарском крае России, откуда добыты исследованные нами особи, распространена одна подвидовая форма - средиземноморская черепаха Никольского T. g. nikolskii Ckhikvadze et Tuniyev, 1986. Под-
вид описан В. М. Чхиквадзе и Б. С. Туниевым (1986) по экземплярам из Краснодарского края (голо-тип- самка из пос. Небуг Туапсинского района, паратипы - 5 экземпляров из различных пунктов юга Краснодарского края). Еще в конце XX в. средиземноморская черепаха Никольского была довольно многочисленной между Новороссийском и Адлером в Краснодарском крае, но к настоящему времени почти исчезла здесь, поскольку ежегодно сотнями вывозилась отдыхающими. В настоящее время Т. g. тЫзкп - реликтовый эндемичный подвид с прогрессирующим сокращением численности, включенный в Красную книгу Российской
Для корреспонденции. Институт биологии и биомедицины Национального исследовательского Нижегородского государственного университета им. Н. И. Лобачевского.
ORCID и e-mail адреса: Романова Елена Борисовна: https://orcid.org/0000-0002-1925-7864, [email protected]; Бакиев Андрей Геннадьевич: https://orcid.org/0000-0002-0338-2740, [email protected]; Горелов Роман Андреевич: https://orcid.org/0000-0002-0207-2951, [email protected]..
Федерации (2021) с категорией и статусом 1 - «Находящийся под угрозой исчезновения подвид» и Красную книгу Краснодарского края (2017) с категорией таксона 2 ИС - «Исчезающие».
C целью сохранения средиземноморских черепах создаются специализированные питомники (Kirsche, 1998), где черепахи содержатся под контролем и охраной специалистов для последующей реинтродукции в естественные места обитания вида. В пос. Супсех, расположенном в 2 км на юго-восток от центра г. Анапа, находится питомник для содержания средиземноморских черепах Никольского, доставленных сюда из окрестностей г. Анапы. В рамках проверки здоровья у самцов и самок T. g. nikolskii из этого питомника были взяты мазки крови, являющиеся первичным инструментом для цитологиче ской диагно стики.
Цель работы: исследование периферической крови здоровых и зараженных гемопаразитами особей средиземноморской черепахи Никольского.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Исследованные особи T. g. nikolskii (6 самцов и 16 самок) содержались в питомнике и поступили сюда в 2023 - 2024 гг. Забор крови у черепах проведен в один день (19.04.2024 г.) путем прокола яремной вены. Все работы осуществлялись в соответствии с «Международными руководящими принципами для биомедицинских исследований на животных» (International Guiding..., 2012). Мазки крови (по два от каждой особи) готовили с помощью гематологического штапеля, высушивали на воздухе, затем фиксировали в спирто-эфир-ной смеси (1:1). Зафиксированные мазки хранили до окрашивания при комнатной температуре. Мазки окрашивали в течение 20 мин красителем Гимза азур-эозин по Романовскому (10 - 12 кратный раствор, фирма «Биолот», Россия), приготовленном на фосфатном буфере (рН 6.8 - 7.2). Готовые мазки просматривали на микроскопе Meiji Techno серии МТ 4000 с иммерсией (Meiji Techno, Japan), при увеличении *1500, с дифференцированным подсчётом лейкоцитов (Соколина и др., 1997; Alleman et al., 1992). С учетом морфологических особенностей определяли пять типов лейкоцитарных клеток (в %): гранулоциты (гетеро-
Гетерофил / Heterophile
Eosinophil
Базофил / Basophil
Моноцит / Monocyte
Рис. 1. Лейкоцитарный состав крови Testudo graeca nikolskii Fig. 1. Leukocyte composition of the blood of Testudo graeca nikolskii
филы, базофилы, эозинофилы) и агранулоциты (моноциты, лимфоциты) (рис. 1).
Цифровые изображения препаратов выполняли камерой Vision САМ (Vision, Japan) для три-нокулярного микроскопа Meiju Techno (увеличение х 1500).
На основании лейкоцитарной формулы крови рассчитали интегральные лейкоцитарные индексы в относительных единицах:
индекс сдвига лейкоцитов, ИСЛ = £ грану-лоцитов / £ агранулоцитов;
индекс соотношения лимфоцитов и эозино-филов, ИСЛЭ=Л/Э;
индекс соотношения гетерофилов и эозино-филов, ИСГЭ = Г/Э;
лимфоцитарно-гранулоцитарный индекс, ИЛГ= ЛТ0/Э+Г+Б;
индекс соотношения гетерофилов и лимфоцитов, ИСГЛ= Г/Л,
где Л - лимфоциты; Э - эозинофилы; Г - гетеро-филы; Б - базофилы.
Измеряли длину карапакса (в мм) черепах по его прямой средней линии от переднего края загривкового щитка до заднего конца надхвосто-вого щитка штангенциркулем.
Учет гемопаразитов проводили на 500 эритроцитов у каждой особи. Экстенсивность инвазии (Е) - количество особей вида, зараженных ге-мопаразитами, по отношению ко всему числу исследованных особей, рассчитывали по формуле: Е=n /Nх 100%. Среднюю интенсивность инвазии (I) - число паразитов, приходящихся в среднем на одну черепаху, рассчитывали по формуле: I = m / n. Индекс обилия (ИО) - число гемопаразитов, приходящихся на одну исследованную особь (рассчитывали по формуле: ИО = m /N, где n - число зараженных особей, m - число обнаруженных гемопа-разитов, N - число исследованных особей хозяев).
Полученные первичные данные проверяли на нормальность распределения по специальным критериям Шапиро - Уилка и Лиллиефорса. Ввиду несоответствия первичных данных нормальному распределению центральные тенденции и рассеяние показателей описывали медианой (Me) и интерквартильным размахом (IQR). Данные сравнивали методами непараметрической статистики с расчетом критериев: Краскела - Уолли-са (H) (при множественном сравнении независимых групп по одному признаку), Данна (D) (множественный критерий при попарном сравнении групп), Манна - Уитни (u) при сравнении двух групп, критерием z - при сравнении долей с поправкой Холма, при а = 0.007. Анализ связи и зависимости признаков
Лимфоцит / Lymphocyte
проводили ранговым коэффициентом корреляции Спирмена (р) и коэффициентом регрессии в пакете прикладных программ «Statistica» (StatSoft Inc., OK, USA). За величину статистической значимости принимали а = 0.05.
РЕЗУЛЬТАТЫ
В мазках крови средиземноморских черепах у 54.5% особей (10 самок и 2 самца) были обнаружены внутриэритроцитарные паразиты Haemogre-garina spp., которые являются наиболее распространенными паразитами крови черепах (Adl et al., 2012), имеют сложный жизненный цикл, включающий мерогонию и образование гематоцитов в эритроцитах позвоночного хозяина, а также гамо-гоний и спорогоний в кишечнике беспозвоночного переносчика (пиявки) (Siddall, Desser, 2001; Telford, 2008). Остальные особи (4 самца и 6 самок, 45.5% от собранных особей) оказались здоровыми. Экстенсивность инвазии, средняя интенсивность инвазии, индекс обилия, а также доля зараженных клеток у самок была значимо выше по сравнению с самцами (z = 1.85,р = 0.032) (табл. 1), что позволяет прийти к заключению о том, что самки более склонны к инфицированию гемогрегаринами, чем самцы.
У исследованных инфицированных особей наблюдали разные стадии развития апикомплек-совых гемопаразитов, расположенных внутри эритроцитов периферической крови: гаметоциты и трофозоиты (рис. 2). Гаметоциты имели овальную форму с зернистым ядром (см. рис. 2, а). Зрелые трофозоиты были ^-образной формы, с частично сросшимися ответвлениями разного размера, образующими большое овальное тело, заключенное в капсулу, и ядром (см. рис. 2, б).
Интенсивность инфицирования черепах варьировала от 0.2 до 4.2% (процент зараженных эритроцитов) (табл. 2). В образцах крови трофозоиты встречались в 54.2% случаев заражения, достаточно часто встречались и гаметоциты (45.7%). В литературе есть сведения, что чем меньше времени прошло с момента заражения черепах, тем вы-
• в
а / a
щ
б / b
Рис. 2. Паразитические стадии Haemogregarina spp. в эритроцитах Testudo graeca nikolskii: а - гаметоциты, б -трофозоиты
Fig. 2. Parasitic stages of Haemogregarina spp. in erythrocytes Testudo graeca nikolskii: a-gametocytes, b-trophozoites
ше процент трофозоитов, меньше число гаметоцит-ных форм и инфицированных эритроцитов (Mi-halca et al., 2002). Нашим исследованием установлено, что при высокой интенсивности инфицирования гаметоциты (р = 0.77,p = 0.003) и трофозоиты (р = 0.74, p = 0.005) в эритроцитах черепах встречались с равной вероятностью.
Следует отметить отсутствие корреляционной связи между длиной карапакса и паразитарными формами (р = 0.07, p = 0.82), хотя в литературе встречаются сведения о повышенном содержании трофозоитов в крови крупных инфицированных черепах по сравнению с мелкими особями и преобладании гаметоцитов у мелких черепах (Mihalca et al., 2002).
По лейкоцитарному составу крови и лейкоцитарным индексам (лимфоцитарно-гранулоци-
Таблица 1. Зараженность Testudo graeca nikolskii гемогрегаринами Haemogregarina spp. Table 1. Infection of'Testudo graeca nikolskii with Haemogregarina spp.
Число зараженных особей / Number of infected individuals Число паразитов на Доля клеток с I, oth. ед. / I, relative units ИО, oth. ед. / AI, relative units
Пол / Sex 500 эритроцитов / Number of parasites per 500 red blood cells паразитами / Proportion of cells with parasites E, % / II, %
Самки / Females (п = 16) 10 72 0.144 62.5 7.2 4.50
Самцы / Males (п = 6) 2 11 0.022 33.3 5.5 1.83
В целом / Total (п = 22) 12 83 0.166 54.5 6.9 3.77
Примечание. E -экстенсивность инвазии, I - средняя интенсивность инвазии, ИО - индекс обилия. Note. II - invasion intensity, I - average invasion rate, AI - abundance index.
Таблица 2. Пол, размеры и разные стадии гемопаразитов в эритроцитах крови Testudo graeca nikolskii (в расчете на 500 клеток)
Table. 2. Sex, size and stage ofthe blood parasites in erythrocytes of Testudo graeca nikolskii (per 500 cells)
Пол / Sex Длина карапакса, мм / С агарах length, mm Трофозоиты, п / % / Trophozoites, n / % Гаметоциты, n / % / Gametocytes, n / % Все стадии / % / All stages / %
2 201 3/0.6 18/3.6 21/4.2
2 196 2/0.4 0 2/0.4
2 185 0 3/0.6 3/0.6
2 179 6/1.2 2/0.4 8/1.6
2 193 4/0.8 0 4/0.8
2 196 1/0.2 0 1/0.2
2 209 10/2.0 5/1.0 15/3.0
2 180 0 1/0.2 1/0.2
2 214 6/1.2 1/0.2 7/1.4
2 160 3/0.6 7/1.4 10/2.0
â 156 9/1.8 1/0.2 10/2.0
â 185 1/0.2 0 1/0.2
Статистические показатели: сумма / % пора- 45 / 9.0 38 /7.6 83 /16.6
женных эритроцитов в расчете на 500 клеток / Statistical parameters: sum / % of affected
erythrocytes per 500 cells
тарного, сдвига лейкоцитов, отношения лимфоцитов и эозинофилов, отношения гетерофилов и эози-нофилов, отношения гетерофилов и лимфоцитов) различий между инфицированными и здоровыми самками и самцами не выявлено. Относительное
содержание гранулоцитов и агранулоцитов в четырех группах было сопоставимо (табл. 3).
Усредненные значения показателей лейко-граммы для здоровых и инфицированных самцов и самок характеризовались лимфоцитарным про-
Таблица 3. Лейкоцитарный состав периферической крови здоровых и зараженных гемогрегаринами особей Testudo graeca nikolskii
Table 3. Leukocyte composition of peripheral blood of healthy and hemogregarine-infected Testudo graeca nikolskii individuals
Показатель лейкограммы / Leukogram indicator Самцы / Males, n = 6 Самки / Females, n = 16 Статистические показатели / Statistical indicators
Инфицированные / Infected, n = 2 Здорс НеаШг >вые / f,n = 4 Инфицированные / Infected, n = 10 Здорс Health^ >вые / n = 6
Me IQR Me IQR Me IQR Me IQR
Гетерофилы, % / Heterophils, % 11.0 10.0 18.0 20.0 14.5 46.0 9.5 19.0 H= 1.29, p = 0.73
Эозинофилы, % / Eosinophils, % 16.0 2.0 11.5 19.0 12.6 19.0 13.5 10.0 H= 2.22, p = 0.52
Базофилы, % / Basophils, % 6.0 0.0 3.5 5.0 3.5 6.0 4.0 3.0 H= 3.21, p = 0.35
Моноциты, % / Monocytes, % 10.5 1.0 16.0 6.0 15.5 21.0 19.0 17.0 H= 4.39, p = 0.22
Лимфоциты, % / Lymphocytes, % 56.5 11.0 46.5 29.0 54.5 28.0 54.5 12.0 H= 0.38, p = 0.44
Гранулоциты, % / Granulocytes, % 30.0 18.0 30.5 27.0 28.0 37.0 26.5 23.0 H= 1.04, p = 0.79
Агранулоциты, % / Agranulocytes, % 67.0 12.0 64.0 26.0 72.0 37.0 74.0 22.0 H= 1.96, p = 0.58
ИСЛ, oth. ед. / Leukocyte shift index, arb. un. 0.46 0.35 0.49 0.60 0.38 1.15 0.36 0.45 H= 0.87, /7 = 0.83
ИСЛЭ, oth. ед. / Index ofthe lymphocytes and eosinophils ratio, arb. un. 3.5 1.1 4.34 6.39 4.9 17.6 4.21 7.62 H= 1.29, p = 0.72
ИСГЭ, oth. ед. / Index of the heterophils and eosinophils ratio, arb. un. 0.7 0.5 1.48 2.15 1.31 9.92 1.24 2.90 H= 1.13,/> = 0.76
ИЛГ, oth. ед. / Lymphocyte-granulo-cyte index, arb. un. 18.0 9.8 13.6 24.3 19.4 2.4 21.3 20.19 H= 1.20, p = 0.75
ИСГЛ, oth. ед. / Index of the heterophils and lymphocytes ratio, arb. un. 0.2 0.2 0.4 0.61 0.25 1.4 0.18 0.38 H= 1.95,/> = 0.58
Число паразитов, n / Number of parasites, n 5.50 4.50 — — 6.70 1.93 — — H= 0.10,p = 0.91
Примечание. Н- критерий Краскела- Уоллиса,р - достигнутый уровень значимости. Note. H- Kraskell-Wallis test,p - significance level.
Таблица 4. Усредненные показатели (Me / IQR) лейкоцитарного состава крови Testudo graecanikolskii
Table 4. Average performance leukocyte content (Me / IQR) of blood of
Testudo graecanikolskii
Гетерофилы / Heterophils Эозинофилы / Eosinophils Базофилы / Basophils Моноциты / Monocytes Лимфоциты / Lymphocytes
14.5/47.0 13.0/23.0 4.0 / 6.0 16.0/21.0 54.5/31.0
филем, что свидетельствовало о преобладании специфической (лимфоцит-зависимой) составляющей в иммунных реакциях особей (табл. 4).
Регрессионным анализом выявлена зависимость возрастания доли эозинофилов в периферической крови с содержанием в эритроцитах тро-фозоитов (рис. 3), но не гаметоцитных форм гемо-паразита. Уравнение регрессии, аппроксимирующее линейную зависимость между изученными показателями, имело вид: Эозинофилы, % = 8.8484 + 0.996 х (г = 0.614,p = 0.033, R1 = 0.377). Результаты множественной регрессии свидетельствовали о значимости отличий от нуля коэффициента линейной регрессии, в = 0.37, и стандартной ошибки, Бв = 0.15, р = 0.03.
Полученные результаты показывают, что паразитические формы Haemogregarina spp. могут оказывать влияние на лейкоцитарный состав крови и иммунный ответ средиземноморской черепахи.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
Последствия инфицирования гемогрегарина-ми для системы крови рептилий до конца не ясны, но есть сведения, что высокая интенсивность зара-
5? 24п
% 22 &
I 20Н
«а о
W 184
I16 I14"1
о §12"
СП
ет ЮН 8642-
-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1
0 2 4 6 8 10 12
Число трофозоитов на 500 эритроциов, шт. / Number of trophozoites per 500 erythrocytes, pes.
Рис. 3. Зависимость возрастания количества эозинофилов в крови Testudo graecanikolskii, инфицированныхHaemogregarinaspp. Fig. 3. The dependence of the increase in the number of eosinophils in the blood of Testudo graeca nikolskii infected with Haemogregarina spp.
жения у пресноводных черепах вызывает относительный лимфоцитоз и гете-ропению, при этом наличие гаметоцит-ных форм связано с возрастанием числа эозинофилов и снижением количества моноцитов (Mihalca et al., 2002). Другие исследователи сообщают об отсутствии клинических признаков (Mihalca et al., 2008) и различий в дифференциальном количестве клеток крови у рептилий (пресноводных змей) при инфицировании (Salakij et al., 2002).
Связь между иммунитетом и паразитами достаточно сложная. Напомним, что развитию паразита в организме хозяина способствует такой феномен, как иммунологическая индукция, которая заключается в способности паразита изменять процесс синтеза белка с образованием общих белковых антигенов (Малютина, 2008). Поэтому иммунитет при инфицировании бывает неярко выражен, характеризуется слабым напряжением и кратковременным действием, зависит от физиологических и экологических особенностей паразитов (Шевкопляс, Лопатин, 2008), при этом сравнительный анализ крови инфицированных и здоровых особей может не показывать каких-либо различий. Известно, что гемогрегарины влияют на общее состояние животных, вызывая снижение значения ге-матокрита, гемоглобина и количества эритроцитов у инфицированных особей (Thrall et al., 2004; Stacy et al., 2011). При нарастании интенсивности инфекции гемогрегарины, несущие широкий спектр поверхностных антигенов, по всей видимости, распознаются хозяином как нечто генетически чужеродное, вызывая ответные иммунологические реакции и эозинофилию. По своим цитохимическим свойствам эозинофильные гранулоциты являются первичными эффек-торными клетками со специфической антипаразитарной функцией, и возрастание в крови доли этих клеток при инфицировании обеспечивает усиление защитных реакций организма (Шевкопляс, Лопатин, 2008).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Наше исследование является первым, в котором проведена оценка адаптивных реакций системы крови здоровых и зараженных гемопаразитами средиземноморских черепах. Полученные результаты предоставили доказательства влияния интенсивности инфицирования гемопаразитами на иммунный статус черепах. Черепахи как долгожи-вущие, морфологически и экологически консервативные виды на протяжении своей жиз-
ни, вероятно, сталкиваются с самыми разнообразными патогенами, что приводит к развитию более сложной (опосредованной антителами) иммунной защиты, тогда как короткоживущие виды в большей степени полагаются на неспецифическую и воспалительную иммунную защиту. Однако их низкое видовое богатство и высокая степень антропогенной угрозы, а также изменения окружающей среды в пространственном и временном масштабах указывают на необходимость защиты и сохранения видов, подвергающихся серьезному риску исчезновения.
Полагаем, что выявление возможных вредных долгосрочных последствий инфицирования гемогрегаринами, контроль за состоянием здоровья и численностью T. g. т^ЬШ будет способствовать защите и сохранению этого редкого подвида черепах в Краснодарском крае.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Красная книга Краснодарского края. Животные. 3-е издание. 2017. Краснодар : Администрация Краснодарского края. 720 с.
Красная книга Российской Федерации. Т. Животные. 2-е издание. 2021. М. : ФГБУ «ВНИИ Экология». 1128 с.
Малютина Т. А. 2008. Взаимоотношения в системе паразит-хозяин: биохимические и физиологические аспекты адаптации (ретроспективный обзор) // Российский паразитологический журнал. № 1. С. 1 - 17.
Соколина Ф. М, Павлов А. В., Юсупов Р. X. 1997. Гематология пресмыкающихся : методическое пособие по курсу «Герпетология», большому практикуму и спецсеминарам. Казань : Казанский государственный университет. 31 с.
Чхиквадзе В. М, Туниев Б. С. 1986. О систематическом положении современной сухопутной черепахи Западного Закавказья // Сообщения Академии наук Грузинской ССР. Т. 124, № 3. С. 617 - 620.
Шевкопляс В. Н., Лопатин В. Г. 2008. Влияние гельминтозов на течение иммунологических процессов у животных // Российский паразитологический журнал. № 4. С. 94 - 101.
Adl S. M., Simpson A. G. B, Lane C. E., Lukes J., Bass D., Bowser S. S., Brown M. W, Burki F., Dunthorn M, Hampl V., Heiss A., Hoppenrath M, Lara E., le Gall L., Lynn D. H, McManus H, Mitchell E. A. D, Mozley-Stanridge S. E., Parfrey L. W., Pawlowski J., Rueckert S., Shadwick L., Schoch C. L., Smirnov A., Spiegel F. W. 2012. The revised classification of eukaryotes // Journal of Eukaryotic Microbiology. Vol. 59, iss. 5. P. 429 - 514. https://doi.org/10.1111/j.1550-7408.2012.00644.x
Alleman A. R., Jacobson E. R., Raskin R. E. 1992. Morphologic and cytochemical characteristics of blood cells from the desert tortoise (Gopherus agassizii) // American Journal of Veterinary Research. Vol. 53. P. 1645 - 1651.
International Guiding Principles for Biomedical Research Involving Animals. 2012. Geneva, Switzerland : Council for International Organization of Medical Sciences Publ. 4 p.
Kirsche W. 1998. Die Landschildkröten Europas. Biologie, Pflege, Zucht und Schutz. Melle : Mergus Verlag GmbH. 104 p.
Mihalca A., Achelaritei D., Popescu P. 2002. Hae-moparasites of the genus Haemogregarina in a population of European pond turtles (Emys orbicularis) from Drägä§ani, Valcea county, Romania // Scientia Parasitologica. Vol. 2. P. 22 - 27.
Mihalca A., Racka K., Gherman C., Ionescu D. T. 2008. Prevalence and intensity of blood apicomplexan infections in reptiles from Romania // Parasitology Research. Vol. 102, iss. 5. P. 1081 - 1083. https://doi.org/10.1007/ s00436-008-0912-9
Salakij C., Salakij J., Suthunmapinunta P., Chan-home L. 2002. Hematology, mor-phology and ultrastructure of blood cells and blood parasites from puff-faced watersnakes (Homalopsis buccata) // Kasetsart Journal -Natural Science. Vol. 36. P. 35 - 43.
Siddall M. E., Desser S. S. 2001. Transmission of Haemogregarina balli from painted turtles to snapping turtles through the leech Placobdella ornata // Journal of Parasitology. Vol. 87, iss. 5. P. 1217 - 1218. https://doi.org/ 10.1645/0022-3395(2001)087[1217:T0HBFP]2.0.C0;2
Telford Jr. S. R. 2008. Hemoparasites of the Repti-lia : Color Atlas and Text. New York : CRC Press. 376 p.
The Reptile Database / eds. P. Uetz, P. Freed, R. Aguilar, F. Reyes, J. Kudera, J. Hosek. 2024. Available at: https://www.reptile-database.org (accessed May 22, 2024).
Adaptive blood reactions of Testudo graeca nikolskii Ckhikvadze et Tuniyev, 1986
(Testudinidae, Reptilia)
E. B. Romanova ш, A. G. Bakiev 2, R A. Gorelov 2
1 Lobachevsky State University of Nizhni Novgorod 23 Gagarin Avenue, Nizhni Novgorod 603950, Russia 2 Samara Federal Research Center of RAS, Institute of Ecology of the Volga River Basin of Russian Academy of Sciences 10 Komzina St., Togliatti 445003, Russia
Abstract. In order to check the health of individuals of the Mediterranean tortoise Nikolskii Testudo graeca nikolskii Ckhikvadze et Tuniyev, 1986 (22 individuals: 6 males and 16 females) collected in the vicinity of Anapa (Krasnodar region of Russia), a haematological approach was used to assess adaptive blood reactions. Intraerythrocytic parasites Haemogregarina spp. (Ade-leorina, Coccidia) were detected in blood smears of 54.5% of turtles. Female were more prone to infection with hemogrega-rines than males, as evidenced by higher invasion index, mean invasion intensity and proportion of infected cells. Individual stages of hemoparasite development (gametocytes and trophozoites) were found in blood erythrocytes with equal frequency. No differences were found in the leukocyte composition of the blood between infected and healthy female and male. Lymphocytes predominated in the leukogram of turtles. The dependence of the increase in the number of eosinophils in the peripheral blood of turtles on the content of trophozoites in erythrocytes was revealed. Parasitic forms of Haemogregarina spp. affected the host's immune response and it is necessary to identify possible harmful long-term consequences of infection for T. g. nikolskii Ckhikvadze et Tuniyev, 1986 from Krasnodar region.
Keywords: turtles, peripheral blood, leukocytal index, WBC (white blood cells), hemoparasites
For citation: Romanova E. B., Bakiev A. G., Gorelov R. A. Adaptive blood reactions of Testudo graeca nikolskii Ckhikvadze et Tuniyev, 1986 (Testudinidae, Reptilia). Current Studies in Herpetology, 2024, vol. 24, iss. 3-4, pp. 163-170 (in Russian). https://doi.org/10.18500/1814-6090-2024-24-3-4-163-170, EDN: LSGEBV
Article info
Original Article
https://doi.org/10.18500/1814-6090-2024-24-
3-4-163-170
EDN: LSGEBV
Received August 21, 2024, revised September 12, 2024, accepted September 12, 2024
This is an open access article distributed under the terms of Creative Commons Attribution 4.0 International License (CC-BY 4.0)
REFERENCES
Red Book of the Krasnodar Region. Animals. 3 edition. Krasnodar, Krasnodar Krai Administration Publ., 2017. 720 p. (in Russian).
Red Book of the Russian Federation. Vol. Animals. 2nd edition. Moscow, FGBU "VNII Ecology" Publ., 2021. 1128 p. (in Russian).
Malyutina T. A. Mutual relations in the parasite-host system: Biochemical and physiological aspects of adaptation (retrospective review). Russian Parasitologi-cal Journal, 2008, no. 1, pp. 1-17 (in Russian).
Sokolina F. M., Pavlov A. V., Yusupov R. Kh. Gematologiya presmykayushchikhsya. Metodicheskoe posobie po kursu "Gerpetologiya", bol'shomu praktiku-mu i spetsseminaram [Hematology of Reptiles. Methodological Manual for the Course of Herpetology, a Large Workshop and Special Seminars]. Kazan, Kazan State University Publ., 1997. 31 p. (in Russian).
Chkhikvadze V. M., Tuniev B. S. On the systematic position of the modern land tortoise of Western Transcaucasia. Reports of the Academy of Sciences of the
Georgian SSR, 1986, vol. 124, no. 3, pp. 617-620 (in Russian).
Shevkoplyas V. N., Lopatin V. G. Influence of helminthoses on the course of immunological processes in animals. Russian Journal of Parasitology, 2008, no. 4, pp. 94-101 (in Russian).
Adl S. M., Simpson A. G. B., Lane C. E., Lukes J., Bass D., Bowser S. S., Brown M. W., Burki F., Dunthorn M., Hampl V., Heiss A., Hoppenrath M., Lara E., le Gall L., Lynn D. H., McManus H., Mitchell E. A. D., Mozley-Stanridge S. E., Parfrey L. W., Pawlowski J., Rueckert S., Shadwick L., Schoch C. L., Smirnov A., Spiegel F. W. The revised classification of eukaryotes. Journal of Eu-karyotic Microbiology, 2012, vol. 59, iss. 5, pp. 429-514. https://doi.org/10.1111/j.1550-7408.2012.00644.x
Alleman A. R., Jacobson E. R., Raskin R. E. Morphologic and cytochemical characteristics of blood cells from the desert tortoise (Gopherus agassizii). American Journal of Veterinary Research, 1992, vol. 53, pp. 1645-1651.
International Guiding Principles for Biomedical Research Involving Animals. Geneva, Council for International Organization of Medical Sciences Publ., 2012. 4 p.
H Corresponding author. Department of Ecology of Institute of Biology and Biomedicine, Lobachevsky State University of Nizhni Novgorod, Russia.
ORCID and e-mail addresses: Elena B. Romanova: https://orcid.org/0000-0002-1925-7864, [email protected]; Andrey G. Bakiev: https://orcid.org/0000-0002-0338-2740, [email protected]; Roman A. Gorelov: https://orcid.org/0000-0002-0207-2951, [email protected].
E. B. P0MaH0Ba, A. r. EaKneB, P. A. Tope^OB
Kirsche W. Die Landschildkröten Europas. Biologie, Pflege, Zucht und Schutz. Melle, Mergus Verlag GmbH., 1998. 104 S.
Mihalca A., Achelaritei D., Popescu P. Haemo-parasites of the genus Haemogregarina in a population of European pond turtles (Emys orbicularis) from Drägä-çani, Valcea county, Romania. Scientia Parasitologica, 2002, vol. 2, pp. 22-27.
Mihalca A., Racka K., Gherman C., Ionescu D. T. Prevalence and intensity of blood apicomplexan infections in reptiles from Romania. Parasitology Research, 2008, vol. 102, iss. 5, pp. 1081-1083. https://doi.org/10.1007/ s00436-008-0912-9
Salakij C., Salakij J., Suthunmapinunta P., Chanhome L. Hematology, morphology and ultrastruc-
ture of blood cells and blood parasites from puff-faced watersnakes (Homalopsis buccata). Kasetsart Journal -Natural Science, 2002, vol. 36, pp. 35-43.
Siddall M. E., Desser S. S. Transmission of Haemogregarina balli from painted turtles to snapping turtles through the leech Placobdella ornate. Journal of Parasitology,, 2001, vol. 87, iss. 5, pp. 1217-1218. https://doi.org/10.1645/0022-3395(2001)087[1217:TC>HBFP] 2.0.C0;2
Telford Jr. S. R. Hemoparasites of the Reptilia: Color Atlas and Text. New York, CRC Press, 2008. 376 p.
Uetz P., Freed P., Aguilar R., Reyes F., Kudera J., Hosek J., eds. The Reptile Database, 2024. Available at: https:// www.reptile-database.org (accessed May 22, 2024).
170
C0BPEMEHHAM rEPnETOnOTHM 2024 T. 24, Bbm. 3/4
