CC BY
93
УДК 612.0171-615.099.97-614.876
М.Р. Мадиева, А.К. Мусайнова, Б.А. Жетписбаев, А.С. Сайдахметова, Х.С. Жетписбаева
Государственный медицинский университет города Семей
АДАПТАЦИЯ ГУМОРАЛЬНОГО ЗВЕНА ИММУНИТЕТА, В ОТДАЛЕННОМ ПЕРИОДЕ, ПОСЛЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ ФРАКЦИОНИРОВАННОГО ГАММА-ИЗЛУЧЕНИЯ
Аннотация
В отдаленном периоде, после фракционированного гамма-излучения, как в раннем, так и в позднем периодах адаптационного синдрома, происходит дальнейшее углубление депрессии в гуморальном звене иммунитета.
Ключевые слова: фракционированное гамма-излучение, депрессия, гуморальный иммунитет, адаптационный синдром.
Большой объем клинических и экспериментальных исследований был уделен проблемам высокой дозы ионизирующего облучения. Показано, что высокие дозы радиации могут разрушать не только клетки, но и повреждать ткани и органы, приводящие в конечном итоге к гибели целого организма [1,2,3].
Данные по исследованию гуморального иммунитета в условиях воздействия на организм ионизирующих излучений является предметом многочисленных дискуссий.
Известно, что иммунологические реакции, в основе которых лежит ответ В-лимфоцитов (образование антител), сильнее страдают от радиации, чем ответ Т-лимфоцитов. Более уязвимой оказывается антибактериальная защита, связанная с продукцией антител и менее - противовирусная, зависящая от Т-лимфоцитов [4].
Причиной ослабления иммунитета является поражение клеток, приводящее к их гибели или снижению функциональной активности всей системы. Лимфоциты являются более чувствительными к ионизирующим излучениям, чем другие клетки крови. Среди популяций и субпопуляций лимфоцитов существуют внутренние различия. Считается, что чувствительными являются В-лимфоциты, чем Т-лимфоциты [5]. По данным литературы, недостаточно изучено влияние фракционированного гамма-излучения на иммунологическую реактивность организма.
После радиационного поражения в отдаленном периоде, имеет значение не только интенсивность и длительность воздействия, сколько наступившая дезадаптация гомеостаза и состоятельность адаптационных механизмов [6]
Мало изучена роль иммунной системы в развитии отдаленной лучевой патологии, особенно при фракционированном облучении. В экспериментальных исследованиях явно недостаточное было уделено внимания гуморальному иммунитету при воздействии облучения на организм несколькими отдельными фракциями через различные промежутки времени.
В литературе есть единичные работы по изучению влияния фракционированного гамма-излучения на гуморальное звено иммунитета в ближайшем и отдаленном периодах [7-9]. В то же время представляет большой интерес адаптация гуморального звена иммунной системы в отдаленном периоде после воздействия фракционированной дозы гамма-излучения
на эмоциональный стресс, что и побудило нас к реализации данной работы.
Материалы и методы исследования
Для решения поставленной цели нами выполнены 4 серии опытов на 85 беспородных половозрелых крысах преимущественно самцах. 1 - серия интактные (п=15), 2-я - (п=20) облученные через 1 месяц, 3-я серия - облученные через 3 месяца (п=20), 4-я -эмоциональный стресс + отдаленный период (п=30). У всех подопытных животных изучали показатели, характеризующие количественные и качественные показатели гуморального звена иммунитета. Облучение животных 2,3 и 4 серий производилось на российском радиотерапевтическом устройстве «Агат-РМ» гамма-лучами 60Со с топометрическо-дозиметрической подготовки экспериментальных животных, который способствует к проведению животным запланированной фракционированной дозы гамма-излучения по 2х3 раза, суммарно 6 Гр в течение 3 недель. При облучении каждое животное содержалось в изолированных ячейках, сконструированных из органического стекла.
Эмоциональный стресс вызывали по методу [10]. Оценку иммунного статуса проводили в соответствии с рекомендациями Института иммунологии МЗ с СР РФ (Р.В. Петров и соавт., 1982). Кровь для исследования забирали в пробирки с гепарином (25 ЕД/мл). Выделение лимфоцитов из венозной крови осуществляли по общепринятому методу [11] в градиенте плотности фиколла-верографина (1,077).
Состояние гуморального иммунитета оценивалось по количеству В-лимфоцитов (СД19+) - определяли с соответствующими моноклональными антителами, методом проточной цитометрии, концентрацию циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) - по методу [12], в модификации [13].
Для исследования антителообразующих клеток (АОК) использовали метод локального гемолиза по [14]. Индекс супрессии определялся расчетным путем в процентах.
Полученные цифровые данные обрабатывались общепринятыми методами вариационной статистики по методике [15].
Результаты исследования и обсуждение
Из вышеописанного следует необходимость экспериментального изучения состояния гуморального звена иммунитета при общем фракционированном
воздействии гамма-излучения в ближайшем и отда- жайшем и отдаленном периодах представлены в ленном периодах. таблице 1.
Результаты влияния фракционированного гамма -излучения на гуморальное звено иммунитета в бли-
Таблица 1.
Влияние фракционированного гамма-излучения на гуморальное звено иммунитета в ближайшем и отдаленном периодах.__
Исследуемые группы
Показатели интактные (п=15) облученные + 1 месяц (п=20) облученные + 3 месяца (п=20)
СД20+ В 1 мкл 1. 318±16,5 2. 7,0±2,1 1. 145,0±9,9** 2. 14,2±1,0 ** 1. 514±42*00 2. 12,3±0,7*
АОК в % 52±4,9 22±1,3 ** 45±2,60
ИС ( %) - 57,6±1,2* 13±0,3800
ЦИК (г/л) 1,3±0,03 0,7±0,01** 0,05±0,001*00
Примечание: 1 - абс. ч., 2 - относительное в %, * - достоверность к интактному (Р<0,05), ** - достоверность (Р<0,001), 0 - достоверность к контрольному (Р<0,05), 00 - достоверность (Р<0,001)
Из представленного цифрового материала видно, сто состояние гуморального иммунитета через месяц после фракционированного облучения представляло следующую картину: относительное число СД20+ лимфоцитов увеличились в 2 раза при сниженном во столько же раз абсолютном его показателе. В этот период концентрация ЦИК в сыворотке крови снизилась с 1,3±0,03 г/л до 0,7±0,01 г/л (Р<0,001), количество АОК в селезенке уменьшилось в 2,3 раза по сравнению с контрольными показателями. Индекс супрессии повысился до 57,6±1,2%
В отдаленном периоде после фракционированного облучения абсолютное количество СД20+ увеличилось в 3,5 раза, что достоверно превышало показатели как контрольных, так и интактных животных. Процентное количество данного пула клеток превышало данные интактных в 1,7 раза. В исследуемом отрезке времени повышалась антителопродуцирую-щая способность в селезенке с 22±1,3 до 45±2,6, не достигнув, однако, уровня интактных животных. При этом происходило достоверное снижение индекса супрессии в 4,4 раза (Р<0,001) и концентрации ЦИК в 14 раз (Р<0,001) в сыворотке крови.
Показатели I - группа II - группа Стресс воздействие (в сутках)
(1 мкл) (исходное) (через 3 месяца) 1 3
СД20+ В 1 мкл 1. 318±16,5 2. 7,0±2,1 1. 514±42*00 2. 12,3±0,7* 739±55*° 9,3±2,4 1260±40,5**оо 17,6±3,7*о
АОК в % 52±4,9 45±2,6 40±1,2* 38±2,4* о
ИС ( %) - 13±0,38 11,5±0,25 10,7±0,14
ЦИК (г/л) 1,3±0,03 0,05±0,001*00 0,02±0,001*00 0,18±0,007*00
Примечание: 1 - абс. ч.,
2 - относительное в %,
* - достоверность к интактному (Р<0,05), ** - достоверность (Р<0,001), 0 - достоверно ко 2 серии (Р<0,05), 00 - достоверность (Р<0,001)
Таблица 2.
Показатели гуморального звена иммунитета, в отдаленном периоде, после фракционированного воздействия гамма-излучения и эмоционального стресса.
Из таблицы 2 видно, что через 1 сутки после стресс-воздействия в отдаленном периоде после фракционированного гамма-излучения достоверно повышается число СД20+лимфоцитов в 1,4 раза превышая интактные и контрольные показатели (таблица 1). При этом относительное его число соответствует интактному показателю. В этот временной период отмечается уменьшение антителообразова-ния в селезенке, что проявляется в снижении числа АОК в селезенке, концентрации ЦИК в сыворотке крови и повышении индекса супрессии.
На 3 сутки после стрессорного воздействия продолжает нарастать абсолютное и относительное количество СД20+лимфоцтиоов. Статистической значимости достигает уменьшение числа АОК в селезенке, повышается в 3,5 раза концентрация ЦИК в сыво-
ротке крови, индекс супрессии на 10,7±0,14% превышает интактный уровень.
Нарушения гуморального иммунитета происходят за счет повреждения различных популяций лимфоцитов, участвующих в формировании иммунного ответа.
Из множества факторов, негативно влияющих на здоровье человека, ионизирующая радиация занимает особое место, так как даже однократное ее воздействие может вызвать необратимые изменения в организме.
Изменения В-системы иммунитета, по-видимому, обусловлены также наличием внутреннего дефекта клеток за счет нарушения субпопуляционного состава В-лимфоцитов, вследствие поражения стволовых кроветворных клеток и рассогласованности межсистемных взаимодействий.
Вывод. В отдаленном периоде после фракционированного гамма-излучения, как в раннем, так и в позднем периодах адаптационного синдрома, происходит дальнейшее углубление депрессии в гуморальном звене иммунитета.
Литература:
1. Жетписбаев БА, Хамитова Л.К. Иммунные дисфункции облученного организма. - Aлматы, - 2000. -215 с.
2. Жетписбаев БА, Шабдарбаева ДЖ, Самарова У.С. Aдаптация облученного организма. - Семипалатинск, - 2000. - 212 с.
3. Loftus C.M., Biller V.N., Cornell S.Y. Management of radiation-induced accelerated carotid atherosclerosis. Arch Neorol. - 1987; 44(7), - Р. 11-14.
4. Жиляев И.Б., Нишаков С.К., Солдатов Г.С. и со-авт. Ближайшие и отдаленные нестохастические гематологические последствия при воздействии малых доз ионизирующих излучений // Военно-мед. журнал. -1992. - №11. - С. 44-47.
5. Дубовик В.В., Верховный Ю.Г., Гюгамадов С.Д. и др. Изучение роли гуморальных и клеточных факторов в патогенезе первичной реакции организма на облучение // Сборник "Радиация и организм", Обнинск. - 1982. - С. 39-52.
6. Савина Н.П. Поздний пострадиационный иммунодефицит как нарушение эндокринного контроля и функции тимуса; роль межсистемных взаимодействий // Mед. радиология и радиационная безопасность. -1999. - №1. - С. 44-63.
7. Жетписбаев БА., Утегенова A.M., Узбекова С.Е. Aдаптация Т-системы иммунитета при действии фракционированной дозы гамма-излучения и эмоционального стресса в отдаленном периоде // Наука и здравоохранение. - 2013. - №5. - С.34-35.
8. Жетписбаев БА., Mусайнова A.K. Гуморальное звено иммунитета и активность 51 - нуклеотидазы в
отдаленном периоде после действия фракционированного гамма-излучения на эмоциональный стресс // Мат. YII Международной научно-практической конференции «Экология, Радиация. Здоровье». 27 августа 2011. Семей. - 2011. - С. 79-79.
9. Жетписбаев Б.А., Мусайнова А.К., Ван О.Т., Кы-дырмолдина А.Ш. Состояние гуморального звена иммунитета в позднем периоде у облученных животных и их потомков 1 поколения после воздействия фракционированной дозы гамма-излучения. // МатТШ Международной научно-практической конференции «Экология. Радиация. Здоровье» имени Б. Атчабарова. 28-29 августа 2012. Семей. - 2012. - С. 231.
10. Жетписбаев Б.А, Нурмухамбетов Ж.Н., Шабдарбаева Д.М.. Авторское свидетельство №25907 «Способ воспроизведения стрессового состояния у мелких лабораторных животных» // Б.А. Жетписбаев, Ж.Н. Нурмухамбетов, Д.М. Шабдарбаева. Опубл. 2.04. 1999.
11. Doyum A. Separation of leucocytes from blood and done marrov // Scand. J. Clin. Lab. Ivest. -1968. -Vol. 21. -P. 77-82.
12. Дigeon M., Laver M. Detection of circulating immune complex in human sera by simplified assays with polyethylene glucos. - J. Immunol. Methods. -1977. - №1. -Р.165-183.
13. Гринкевич Ю.Я., Алферов А.Н. Определение иммунных комплексов в крови онкологических больных // Лаб. дело. - 1981., №8. -С.493-495.
14. Jerne N., Nordin A. Plague formation in agar by single font body producing cells. || Science. - 1963. - 140. -P.336-406.
15. Монцевичюте-Эрингене Е.В. Упрощенные ма-тематико-статистические методы в медицинской исследовательской работе // Пат. физиол. и эксперим. терапия, - 1961, - №1, - С. 71-76.
Тужырым
ФРАКЦИОНАЛДЫК ГАММА-СЭУЛЕНЩ ЭСЕР1НЕН АЛШАК КЕЗЕНДЕ ИММУНДЫК ЖУИЕНЩ ГУМОРАЛЬДЫ БЕЙ1МДЕЛУ1 М.Р. Мадиева, А.К. Мусайнова, Б.А. Жетписбаев, А.С. Сайдахметова, Х.С. Жетписбаева Семей каласыныц Мемлекетпк медицина университет^ Семей к-
Фракциональдыщ гамма - сэуленщ эсерЫен алша^ кезечде, бешмделу синдромыныщ ерте жэне кеш кезечдерЫде иммундыщ жYЙенщ гуморальды буынындагы депрессияныщ дамуы жYредi.
Ключевые слова: Фракциональдыщ гамма - сэулеа, депрессия, гуморальды иммунитет, адаптациялыщ син-дромi.
Summary
ADAPTATION OF HUMORAL LINK OF IMMUNE SYSTEM IN LATE PERIOD AFTER FRACTIONAL GAMMA-IRRADIOTION M.R. Madieva, A.R. Musainova, B.A. Zhetpisbayev, A.S. Saydachmetova, H.S. Zhetpisbayeva
Semey State Medical University
In late period after fractional gamma-irradiation both in early and late periods of adaptation syndrome further deepening of depression in humoral link of immunity.
Key words: fractionated gamma radiation, depression, humoral immunity, adaptation syndrome.
