1,2-ДИГИДРО-4,6-ДИМЕТИЛ-N-/β-ОКСИЭТИЛ/-ПИРИМИДОН 2 (КСИМЕДОН) НЕ ПРОЯВЛЯЕТ ЭМБРИОТОКСИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

цыплят-бройлеров: Автореф диссертации канд. с-х наук / Чувашская государственная сельскохозяйственная академия. - Чебоксары, 2004. - 24с.

ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ЯИЦ ПРИ ВКЛЮЧЕНИИ В

РАЦИОН КОРМЛЕНИЯ КУР БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЙ ДОБАВКИ

«ГУМИФИТ»

Фролов А.В.

Резюме

При использовании в рационе кур биологически активной кормовой добавки «Гумифит» происходит повышение содержания в крови гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов, показателей неспецифической резистентности, стимуляция белкового, углеводного и минерального обменов, яичной продуктивности, биологической полноценности и воспроизводительной способности.

VETERINARY-SANITARY MILK QUALITY ESTIMATION WITH BIOLOGICALLY ACTIVE SUPPLEMENT ” GUMIFIT” IN THE COWS' RATIONS

Frolov A.V.

Summary

Including of the biologically active food additive “Gumifit” into the diet of chickens favours the increase of content of hemoglobin, leucocytes in blood, indicators of non-specific resistance, stimulation of protein, carbohydrate and mineral metabolism, egg-laying productivity, biological value and reproductive ability.

УДК 618.2:615.256.5

1,2-ДИГИДРО-4,6-ДИМЕТИЛ-^/р-ОКСИЭТИЛ/-ПИРИМВДОН 2

(КСИМЕДОН) НЕ ПРОЯВЛЯЕТ ЭМБРИОТОКСИЧЕСКИЕ

СВОЙСТВА Хафизьянова Р.Х., Гайнетдинов Р.Ф., Алеева Г.Н., Бурыкин И.М.

Казанский государственный медицинский университет

Ключевые слова: крыса, ксимедон, плод, беременность,

тератогенность, репродуктивная токсичность.

Key words: rat, xymedon, fetus, pregnancy, teratogenicity, reproductive toxicity

Данные о способности лекарственных препаратов оказывать негативное влияние на нормальные процессы эмбрионального развития было получено в 60-х годах прошлого века в Европе, в ходе исследования причин аномально высокой частоты рождения детей с множественными аномалиями конечностей и внутренних органов, так называемой «талидомидной катастрофы». В дальнейшем перечень лекарственных препаратов неблагоприятно воздействующих на развивающийся плод был значительно расширен [4, 5]. Поэтому, в целях предотвращения развития таких нежелательных реакций, в рамках доклинических исследований новых лекарственных препаратов обязательным является изучение их воздействия на процессы эмбрионального развития.

В настоящее время одним из перспективных препаратов, успешно внедренный в клиническую практику, является производное пиримидина -ксимедон (1,2-дигидро-4,6-диметил-Ы-/р-оксиэтил/-пиримидон 2). Этот препарат обладает широким спектром фармакологических эффектов: активизирует процессы регенерации при линейных ранах кожных покровов и плоскостных дефектах кожи, способен регулировать коллагеногенез, препятствуя образованию келоидных рубцов, оказывает регулирующее действие на процессы воспаления. Исследователями показано иммуностимулирующее действие как «in vitro», так и «in vivo», подтвержденное в клинических исследованиях. Антиоксидантный эффект ксимедона выражается в мембраностабилизирующем действии [2, 3, 7, 8].

Исследования показали наличие нескольких механизмов реализующих фармакологические эффекты препарата. Ксимедон активирует аденилатциклазу, что приводит к быстрому накоплению циклического аденозинмонофосфата в клетке и стимуляции обменных процессов, в первую очередь биосинтеза белка. Препарат воздействует также на систему регуляции активного транспорта кальция в клетке, влияет на процессы тканевого дыхания, проявляет антимикробный эффект. Ксимедон оказывает действие на сульфгидрильный статус иммунокомпетентных клеток, обладает антимутагенной активностью [2, 3].

Учитывая фармакологические эффекты и механизм действия ксимедона, изучение репродуктивной безопасности препарата при введении его в период беременности является востребованным.

Целью настоящей работы явилось изучение влияния курсового введения ксимедона на течение беременности и развитие эмбрионов крыс.

Методика исследования. В работе были использованы 19 самок беспородных белых крыс с массой тела 230 - 250 г. Животные содержались в стандартных условиях вивария. Первым днем беременности считали обнаружение сперматозоидов во влагалищных мазках. Беременные крысы были разделены на две группы. Первая служила контролем, вторая получала исследуемый препарат.

Ксимедон (субстанция синтезирована в ИОФХ им. акад. Арбузова КНЦ РАН) инъецировали животным внутрибрюшинно 19-кратно с первого по девятнадцатый день беременности в дозе 30 мг/кг. Контрольной группе вводился эквиобъем дистиллированной воды. Общее состояние, поведение, потребление воды и пищи, динамику массы беременных самок оценивали ежедневно в течение всего эксперимента.

При выведении крыс из эксперимента под легким эфирным наркозом на 20-й день беременности, выделяли и определяли коэффициенты массы внутренних органов: яичников, матки, печени, почек, сердца, селезенки, надпочечников. После извлечения плодов матку осматривали для подсчета мест имплантации и тел резорбции. Затем оценивали число желтых тел в яичниках, количество живых и мертвых плодов в матке. Рассчитывали показатели эмбриональной гибели: индексы пред- и постимплантационной смертности по стандартным формулам [10]. Проводили взвешивание, измерение длины всех зародышей и их плацент и осмотр плодов с целью выявления внешних аномалий развития. Часть помета крыс помещали в фиксатор Буэна для исследования по методу Вильсона - Дыбана, а другую часть потомства фиксировали в 960 спирте для изучения костного скелета по методу Даусона - Дыбана [5]. Аногенитальный индекс рассчитывали как отношение аногенитальной дистанции плода к кубическому корню его массы [10].

Результаты исследования обрабатывали параметрическим методом Стьюдента в случае нормального распределения признака и непараметрическим Мана - Уитни, в случае отличия закона распределения от нормального. Для всех показателей рассчитывали среднюю и ее стандартную ошибку (М±т). Статистический анализ проводили с использованием пакета программ N0882000 [9].

Результаты исследования. Оценка общего состояния крыс не выявила каких - либо симптомов общетоксического действия ксимедона на беременных самок на всех сроках наблюдения, что подтверждает хорошую переносимость препарата при курсовом введении.

Крысы хорошо переносили беременность и в течение всего эксперимента отмечалось постепенное нарастание их массы тела. Значимых различий массы тела между опытной и контрольной группой животных не было зарегистрировано.

После курсового введения ксимедона отмечалось неоднозначное изменение коэффициентов массы ряда внутренних органов опытных беременных крыс. Коэффициенты массы сердца, печени, почек, селезенки и тимуса в опытных и контрольных группах животных статистически не различались, в то время как коэффициенты массы гипофиза, матки и яичников были достоверно повышены на 42,8%; 37,9%; 57,8%

соответственно по сравнению с контрольными животными.

Регистрировалось значимое уменьшение коэффициента мозга на 11,6% опытных крыс.

При макроскопическом исследовании внутренних органов, плевральной и брюшной полости опытных и контрольных крыс каких-либо патологических изменений не было выявлено.

Плоды крыс были равномерно расположены в обеих рогах матки беременных крыс контрольной и опытной групп. Мертвых плодов ни в одной из групп обнаружено не было. Количество живых плодов в исследуемых группах животных статистически не различалось. При визуальной оценке всего помета не было отмечено наличие крыс в обеих группах с полной резорбцией эмбрионов. В матках как опытных, так и контрольных крыс регистрировались места ранней и поздней резорбции. В яичниках крыс, как в опытной группе, так и контрольной число желтых тел значимо не различалось. Введение ксимедона в период гестации не оказывало влияния на индекс постимплантационной смертности эмбрионов, что указывает на отсутствие у препарата эмбриолетального действия (таб. 1).

1. Морфометрические показатели и выживаемость плодов контрольных и опытных крыс, получавших ксимедон

Параметры контроль (дист. вода) опыт (ксимедон 30 мг/кг *19)

Беременных крыс 13 6

Крыс с живыми плодами 13 6

Крыс с мертвыми плодами 0 0

Крыс с полной резорбцией 0 0

Число желтых тел 12,38±0,53 12,50±0,67

Число мест ранней резорбции 1,54±0,60 1,00±0,37

Число мест поздней резорбции 0,46±0,18 1,50±0,56

Число мест общей резорбции 2,00±0,63 2,50±0,76

Число живых плодов 8,08±0,89 9,50±0,72

Число мертвых плодов 0,00±0,00 0,00±0,00

Индекс предимплантационной смертности 0,17±0,07 0,04±0,03

Индекс постимплантационной смертности 0,24±0,08 0,18±0,08

Масса плода, гр. 2,68±0,14 2,72±0,11

Масса плаценты, гр. 0,65±0,02 0,65±0,01

Длина плода, мм. 36,27±0,74 36,10±0,71

Диаметр плаценты, мм. 14,94±0,31 15,14±0,17

Считается, что помимо гибели плода проявлением эмбриотоксического действия лекарственных препаратов может быть

задержка развития плода. По данным настоящего исследования, ксимедон не влиял на массу и длину плаценты и плодов крыс (таб. 1).

Классическим тератогенным эффектом лекарств является нарушение развития плодов, проявляющееся изменением нормального развития органов и тканей, что приводит к формированию анатомических структур с различными дефектами и пороками.

Результаты детального внешнего осмотра плодов, извлеченных из матки опытных и контрольных крыс, показали, что внешние аномалии головы (микроцефалия, анофтальмия, микрофтальмия, выпадение языка), уха (анотия), туловища (отек, расщелина грудины, укорочение шеи, редукция задней части тела, искривление позвоночника, спинномозговая грыжа, дефект передней брюшной стенки, пупочная грыжа), конечностей (олиго- и полидактилия, укорочение), плаценты (деформация, сращение) отсутствовали.

Исследование внутренних органов плодов контрольных и опытных групп крыс не выявило аномалий развития. Частота вариаций развития внутренних органов, таких как расширение почечных лоханок и мочеточников у контрольной и опытной групп плодов достоверно не различалась и соответствовала показателям, описанным другими авторами [10]. У плодов крыс, получавших ксимедон и дистиллированную воду, были зарегистрированы вариации развития расширение лоханки почек (8,6% и 9,5%, соответственно), расширение мочеточников (8,6% и 9,5% соответственно).

2. Аномалии внутренних органов плодов контрольных и опытных крыс, получавших ксимедон

Параметры Контроль (дист. вода) Опыт (ксимедон 30 мг/кг * 19)

Кол-во эмбрионов 35 21

Кол-во (крыс-самок) 11 6

Расширение почечной лоханки 3 2

Расширение мочеточника 3 2

Полнокровие предсердий 17 21*

желудочков сердца 1 6*

сагиттальных синусов 12 11

сосудов вестибулярного аппарата 0 0

сосудов легких 0 2

сосудов тела 4 11*

* - р<0.05 к контролю (дистиллированная вода)

Как у контрольных, так и у опытных животных отмечались кровоизлияния и полнокровие внутренних органов. Назначение препарата

сопровождалось увеличением числа плодов с полнокровием предсердий с 48,5 до 100%%, желудочков сердца с 2,8 до 28,5%%, сосудов тела с 11,4 до 52,3%%. Полнокровие сагиттальных синусов (34,2% и 52,3%) и сосудов легких (0% и 9,5%) было равнозначными в обеих группах животных (таб. 2).

Для выявления аномалии костной системы плодов был осуществлен визуальный осмотр 38 контрольных и 17 опытных плодов крыс. Было установлено, что у одного контрольного и одного опытного плода имелось отсутствие зачатка грудины и у трех (17,6%) опытных отмечалось наличие 14-го ребра (Р<0.05). Аномалии черепа, позвонков, передних и нижних конечностей, тазового кольца у исследуемых плодов обеих групп не были выявлены.

Результаты морфометрических исследований не выявили значимого отрицательного действия ксимедона на длину точек окостенения костей передних и задних конечностей плодов крыс (Таб. 3).

3. Морфометрические параметры костной системы и параметры половой дифференцировки плодов контрольных и опытных крыс, получавших ксимедон

Параметры Контроль (дист. вода) Опыт (ксимедон 30 мг/кг * 19)

Морфометрические параметры костной ткани

Длина (мм) М ± т М ± т

Лучевая 1,93±0,06 2,01±0,09

Локтевая 2,46±0,07 2,63±0,11

Плечевая 2,32±0,08 2,42±0,10

Бедренная 1,73±0,07 1,84±0,09

Большеберцовая 1,98±0,07 2,12±0,10

Малоберцовая 1,83±0,06 2,02±0,09

Лопатка 2,34±0,07 2,38±0,08

Количество точек окостенения М ± т М ± т

Зачатков кисти 3,08±0,22 2,87±0,13

Зачатки стопы 3,24±0,41 3,52±0,18

Ребер 13,84±0,84 13,20±0,20

Параметры половой дифференцировки

Индекс муж/жен 1,10 1,19

Аногенитальная дистанция, муж (мм.) 1,89±0,07 1,80±0,04

Аногенитальная дистанция, жен (мм.) 1,12±0,01 1,12±0,01

Аногентальный индекс, муж. 1,35±0,04 1,28±0,02

Аногентальный индекс, жен. 0,81±0,006 0,82±0,01

В литературе указывается на возможность влияния химических агентов на процессы половой дифференцировки. Показана взаимосвязь аномальной половой дифференцировки некоторых животных, проявляющейся стерильностью мужских и женских особей, и концентрацией полихлорированных бифенилов, проявляющих

эстрогенные свойства. Критериями, позволяющими оценить влияние препарата на процессы половой дифференцировки, являются аногенитальная дистанция и соотношение числа мужских и женских особей [10]. Курсовое введение ксимедона не приводило к изменению аногенитального индекса плодов, соотношение мужских и женских особей, что указывает на отсутствие у препарата негативного влияния на процессы половой дифференцировки плодов (Таб. 3).

Анализ данных литературы свидетельствует о неоднозначном действии производных пиримидина на эмбриональное развитие экспериментальных животных. Действие пентоксила на внутриутробное развитии эмбрионов крысы зависело от дозы и срока введения, достигая максимума в дозе 500 мг/кг на 13 день гестации [1]. Введение другого производного пиримидина - 4-метилурацила в дозе 2000 мг/кг на 10 день беременности увеличивало постимплантационную смертность эмбрионального с 7,3% до 34,8%. Следует отметить, что используемая доза препарата значительно превышала рекомендуемую в терапии 28,5 мг/кг. При использовании дозы 4-метилурацила 50 мг/кг и введении его многократно (с 1 по 16 день гестации) у потомства крыс не было отмечено каких - либо дефектов развития [6]. Оценка нового производного пиримидина - дипиперидинодиоксипропилметилурацила при применении в течение 20 дней в период беременности в дозах 50, 100 и 150 мг/кг не выявило тератогенного эффекта на плоды крысы. Эти факты позволяют предположить об отсутствии тератогенного эффекта у производных пиримидина.

Результаты настоящего исследования, посвященного сравнительной оценке воздействия ксимедона в дозе 30 мг/кг на организм беременных крыс, позволяют заключить, что беременные самки крыс хорошо переносят курсовое введение препарата. Он не вызывает никаких симптомов интоксикации, не тормозит прирост массы тела беременных крыс. При 19-кратном введении ксимедона проявляется специфическая органотропность препарата, выражающаяся в увеличении коэффициентов массы гипофиза, яичников и надпочечников у беременных крыс. Ксимедон не меняет коэффициент массы сердца, печени, почек, селезенки, тимуса беременных крыс. Впервые показано, что ксимедон не проявляет эмбриолетального действия, не вызывает задержки развития плодов крыс. В общесуммарной дозе равной 570 мг/кг при курсовом введении на протяжении всей беременности у крыс ксимедон не вызывает внешних аномалий, пороков развития внутренних органов и не влияет существенно

на формирование процессы оссификации костей у плодов, т.е. не проявляет выраженного тератогенного действия. Способность препарата повышать число плодов с полнокровием предсердии и желудочков сердца, тела интерпретируются как вариации развития согласно современным представлениям эмбриологии [10].

Таким образом, на основании результатов экспериментов можно заключить, что длительное введение ксимедона не оказывает эмбриолетального, эмбриотоксического и тератогенного свойств и этот лекарственный препарат может быть использован в период беременности у женщин в дозе 30 мг/кг.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Бариляк И.Р. Анализ механизмов патогенного действия антидиабетических сульфаниламидов на эмбриональное развитие крыс: автореф. дис. ... канд. мед. наук / И.Р.Бариляк. - Ленинград. - 1967. - 21 с. 2. Горбунов С.М. Результаты экспериментального исследования ксимедона. / С.М. Горбунов, Измайлов С.Г. // Ксимедон. Казань: изд-во ИОФХ им. А.Е. Арбузова КФАН СССР. - Казань. - 1986. - C. 26—30.

3. Измайлов С.Г. Ксимедон в клинической практике / С.Г.Измайлов,

Г.А.Измайлов, М.Ю. Аверьянов. - Нижний Новгород: Изд-во

Нижегородской государственной медицинской академии, 2001. - С. 188.

4. Карпов О.И. Риск применения лекарственных препаратов при

беременности и лактации / О.И.Карпов, А.А.Зайцев.- СПб.: «Издательство Диля», 2003. - 352 с. 5. Кирюшенков А.П. Влияние лекарственных средств, алкоголя и никотина на плод / А.П.Кирюшенков, М.Л.Тараховский.-М:Медицина, 1990.- 272 с. 6. Монахов Б.В. Результаты опытов с воздействием метилурацила на беременных крыс и эмбрионы / Б.В.Монахов, Н.Р.Мюллер, К.В.Яременко // Вопросы онкологии.- 1967.-т.ХШ, №2.- с. 111. 7. Результаты клинических испытаний у взрослых в качестве противоожогового средства препарата ксимедон в лекарственной форме — таблетки по 0,25 г в сравнении с метилурацилом / Г.А. Измайлов, И.З. Шафиков, Г.Б. Эвранова и др. // Ксимедон. Казань: изд-во ИОФХ им. А.Е.Арбузова КФАН СССР. - 1986. - С. 78—105. 8. Хайбуллина З.Г.

Антиокислительная активность производных пиримидина и бензимидазола в биохимическом механизме их антитоксического действия: автореф. дис. ... канд. биол. наук / З.Г. Хайбуллина. - Уфа. - 1994. - 28 с. 9. Хафизьянова, Р.Х. Математическая статистика в экспериментальной и клинической фармакологии / Р. Х. Хафизьянова, И. М. Бурыкин, Г. Н. Алеева. - Казань: Медицина, 2006. - 374 с. 10. Evaluation of developmental toxicity in rats exposed to the environmental estrogen bisphenol A during pregnancy / J.C.Kim, H.C.Shin, S.W.Cha et all. // Life Sciences.- 2001.- V.69.-P.2611-2625.

1,2-ДИгаДРО-4,6-ДИМЕТИЛ-К-/р-ОКСИЭТИЛ/-ПИРИМИДОН 2 (КСИМЕДОН) НЕ ПРОЯВЛЯЕТ ЭМБРИОТОКСИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА

Хафизьянова Р.Х., Гайнетдинов Р.Ф., Алеева Г.Н., Бурыкин И.М.

Резюме

Проведено исследование 1,2-дигидро-4,6-диметил-Ы-/р-оксиэтил/-пиримидон 2 (ксимедон) на организм и потомство беременных крыс. Препарат вводили с первого по девятнадцатый день беременности в дозе 30 мг/кг. Плоды оценивали на 20 день беременности. Выявлено, что исследуемое вещество не вызывал гибели и специфических аномалий развития у плодов крыс. Препарат не изменял признаки половой дифференцировки плодов. Не было отмечено негативного воздействия на развитие костной системы плодов. Таким образом, 1,2-дигидро-4,6-диметил-Ы-/р-оксиэтил/-пиримидон 2 не обладает эмбриолетальным, эмбриотоксическим и тератогенным эффектом при введении крысам в период беременности.

1,2-DIHYDRO-4 ,6-DIMETHYL-N-/p-OXYETHYL/-PIRIMIDON 2 (XIMEDON) SHOWED NO EMBRYOTOXIC PROPERTIES

Khafizianova R.Kh., Gainetdinov R.F., Aleeva G.N., Burykin I.M.

Summary

The research of influence 1,2-dihydro-4,6-dimethyl-N-/^-oxyethyl/-pirimidon 2 (Xymedon) on the organism and the offspring of pregnant rat. The drug was administered first to the 19th day of pregnancy at a dose of 30 mg / kg. The fetus was assessed on 20th day of pregnancy. Revealed that the analyzed substance did not cause death and specific malformations in fetuses of rats. The drug did not alter the signs of sexual differentiation of the fetuses. There have been no negative impact on the development of skeletal system of the fetuses. Thus, 1,2-dihydro-4,6-dimethyl-N-/p-oxyethyl/-pirimidon 2 do not have embrioletal, embryotoxic and teratogenic effect in rats during pregnancy.

УДК 1+57

О ВИТАЛИЗМЕ И МЕХАНИЦИЗМЕ КАК ПАРАДИГМАХ В

БИОЛОГИИ

Хачатрян А.А.

ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э.Баумана»

Ключевые слова: витализм, неовитализм, механицизм,

редукционизм, антиредукционизм, современная биология, единство и